1.4.4蔗糖水消耗實驗給藥結束后,大鼠適應性的飲用1%的蔗糖溶液3d后飲用正常飲用水1 d,測試前2h,單籠飼養大鼠,正常攝食,分別為大鼠供應1%蔗糖溶液和自來水,此過程需要保持各試驗組蔗糖水的位置均衡。1h后,測定液體飲用量。蔗糖水偏愛度1%蔗糖水的消耗量占總消耗量的百分比。
1.4.5懸尾實驗第27 d給藥1h后,在大鼠尾部距尾尖端1 cm處用醫用膠布粘縛,將其倒吊于距離地面15 cm左右的橫桿上,觀察6 min,記錄大鼠后5 min內的不動時間,大鼠之間采用白板遮擋,避免相互干擾。
1.4.6強迫游泳實驗第28 d給藥1h后,將大鼠放于直徑約20 cm,水深17 cm,水溫(2211)0C的塑料桶中,實驗觀察6 min,記錄后5 min內大鼠累積不動時間。
1.4.7組織收集及DA NE含量測定實驗結束后,大鼠斷頭取血,收集血漿。快速摘取大鼠下丘腦組織,采用雙蒸水勻漿后,用于含量測定。
1.4.8統計學方法利用SPSS統計軟件進行統計分析,數據采用(x1s)表示,采用單因素方差分析(ANO-VA)統計。檢驗水準。= 0. 05(雙側)。
2結果
2. 1銀耳提取物對大鼠體重的影響與空白組相比,模型組大鼠體重顯著降低(P<0.01),與模型組相比,1.5 g/kg銀耳提取物可以顯著提高慢性應激抑郁大鼠體重(P <0.01),見圖1
2. 2銀耳提取物對大鼠蔗糖偏愛的影響見圖2。與空白組相比,模型組大鼠蔗糖偏愛度顯著下降(p<0.01)。1.5 g/kg銀耳提取物顯著提高大鼠的糖水偏愛度(P <0.01)。
2. 3銀耳提取物降低大鼠不動時間與空白組相比,模型組大鼠5 min內懸尾不動時間均顯著上升(P<0.01),1.0,1.5 g/kg的銀耳提取物顯著降低5 min大鼠懸尾不動時間(P <0.05) o
與大鼠懸尾不動時間相同,與模型組大鼠相比,1.0,1.5 g/kg銀耳提取物顯著降低5 min內大鼠游泳不動時間(P<0.01),見圖3。
2. 4銀耳提取物提高大鼠下丘腦及血漿NE,DA含量與空白大鼠相比,模型組大鼠下丘腦及血漿中DE,NE水平顯著下降(P <0.05) ,1.0,1.5 g/kg銀耳提取物可以顯著提高大鼠下丘腦及血漿DA含量(P<0. 05 )。同時銀耳提取物劑量依賴性的增強大鼠下丘腦NE含量(P <0.01),見圖4。
3討論
慢性應激抑郁大鼠的一個非常重要的抑郁樣的表型就是對蔗糖偏愛度的下降。在本研究中,與空白組相比,模型組大鼠蔗糖偏愛度顯著下降,而銀耳提取物顯著增加抑郁癥大鼠蔗糖偏愛度,推斷1.5 g/kg銀耳提取物具有抗抑郁活性。
強迫游泳和懸尾實驗等是目前常用的抗抑郁藥物篩選的行為學檢測方法,其原理均為將動物置于不可逃避的環境中,動物會拼命掙扎,企圖逃跑,在經過努力不能脫困后,出現間斷性不動,表現為“行為絕望”狀態,與抑郁癥類似,絕多大數抗抑郁藥均可縮短動物的不動時間。研究發現,1.0,1.5 g/kg銀耳提取物顯著提高5 min內抑郁大鼠行為不動時間(P<0. 05 ),因此推斷銀耳提取物具有一定的抗抑郁活性。
抑郁癥的發病率正在逐步攀升,預計到2020年,可能成為僅次于心臟病的第二大疾病,抑郁癥發病機制至今未明,但大量實驗研究表明NE,DA等單胺類神經遞質含量改變與抑郁癥有密切關系。隨著對抗抑郁癥發病機制的深入了解,天然抗抑郁藥物的研究和開發也成了新的熱點和發展趨勢
本研究通過慢性應激建立抑郁癥大鼠模型,在大鼠體內實驗,證明了銀耳提取物的抗抑郁癥活力,其作用與增加大鼠血漿及下丘腦DA NE含量直接相關。本研究為銀耳作為抗抑郁保健食品及藥品的廣泛應用提供了科學依據。
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