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PCR實驗技巧增加PCR的特異性：1. prime理想的，只同目的序列兩側的單一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些條件a. 足夠長,18-24bp,以保證特異性.當然不是說越長越好,太長的引物同樣會降低特異性,并且降低產量b. GC% 40%~~~~60%c. 5'端和中間序列要多GC,以增加穩定性d. 避免3'端GC rich, 最后3個BASE不要有GC,或者最后5個有3個不要是GCe. 避免3'端的互補, 否則容易造成DIMERf. 避免3'端的錯配g. 避免內部形成二級結構h. 附加序列(RT site, Promoter sequence)加到5'端, 在算Tm值時不算,但在檢測互補和二級結構是要加上它們i. 使用兼并引物時, 要參考密碼子使用表,注意生物的偏好性,不要在3'端使用兼并引物,并使用 較高的引物濃度(1uM-3uM)j. 最好學會使用一種desig......閱讀全文
PCR實驗技巧增加PCR的特異性：1. prime理想的，只同目的序列兩側的單一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些條件a. 足夠長,18-24bp,以保證特異性.當然不是說越長越好,太長的引物同樣會降低特異性,并且降低產量b. GC% 40%~~~~60%c. 5'端和中間序列要多
引物設計簡介1．寡聚核苷酸引物的選擇，通常是整個擴增反應成功的關鍵。所選的引物序列將決定PCR產物的大小、位置、以及擴增區域的Tm值這個和擴增物產量有關的重要物理參數。好的引物設計可以避免背景和非特異產物的產生，甚至在RNA-PCR中也能識別cDNA或基因組模板。引物設計也極大的影響擴增產量：若使用
常規PCR一般注意點：1）PCR模板是關鍵，引物可以優化。制備模板的時候，一定要注意核酸模板的純度和量。純度上要避免雜質和雜蛋白質的混入，同時還要注意添加模板的量，模板很理想的話，不用加太多，加的多了，混進去的雜質機會就多了。當模板的濃度過低,比如低于100個分子時, 引物和模板之間就很難發生反應.
差儀使用和分析過程中會有很多專業術語，這些術語一般不了解儀器的人不會特別清楚。為了更加熟悉和了解色差儀，我們把這些術語統一整理一下分享給大家看。 CIELABColorSpace（CIELAB色空間） 利用L*、a*及b*三個不同的坐標軸，替顏色在幾何坐標圖中，指示位置及代號。 C
想必很多人都很少聽過光譜儀，只有這個領域的人才知道光譜儀是什么。光譜儀就是以光電倍增管等光探測器測量譜線不同波長位置強度的裝置。 光譜儀應用很廣，在農業、天文、汽車、生物、化學、鍍膜、色度計量、環境檢測、薄膜工業、食品、印刷、造紙、喇曼光譜、半導體工業、成分檢測、顏色混合及匹配、生物醫學應用、
6月20日上午，“中國科學家資料整理與研究中心”(以下簡稱研究中心)成立儀式在中科院自然科學史研究所舉行。中國科協黨組成員、書記處書記王春法，中國科協調宣部副部長羅暉，中國科協發展研究中心主任、中國科協調宣部副部長王康友，研究所所長張柏春研究員等出席了成立儀式。研究所副所長王揚宗和羅暉分別代表雙
面對新學期的開始，是不是讓不少ELISA實驗的新手同學們有點兒手足無措呢？在實驗中有些不太懂的地方可以請教師兄或者老師，很多人在實驗過程中，難免會遇到各種不同的問題，比如說正態分布及標準差，真值，質控血清如何使用，實驗的效果不好等等。今天上海勁馬實驗室為您分享了elisa試劑盒實驗基礎
1. 如果擴增曲線ct值比較靠后的話，32左右，一般有什么方法解決？ ct值比較靠后，對實驗有一定的影響，因為經過那么多次的循環，酶的活性有可能有所下降，這時候擴增效率會有所改變（而定量PCR的理論基礎就是每次循環的擴增效率我們認為是確定的一個值）。因此最好能夠把ct值往前移。 解決辦
1. 如果擴增曲線ct值比較靠后的話，32左右，一般有什么方法解決？ct值比較靠后，對實驗有一定的影響，因為經過那么多次的循環，酶的活性有可能有所下降，這時候擴增效率會有所改變（而定量PCR的理論基礎就是每次循環的擴增效率我們認為是確定的一個值）。因此最好能夠把ct值往前移。解決辦法可以將模板加以濃
在所有RNA實驗中，最關鍵的因素是分離得到全長的RNA。而實驗失敗的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由于RNA酶廣泛存在而穩定，一般反應不需要輔助因子。因而RNA制劑中只要存在少量的RNA酶就會引起RNA在制備與分析過程中的降解，而所制備的RNA的純度和完整性又可直接影響RNA分析的結果，所