(一)核糖核酸酶A核糖核酸酶A(RNase A)來源于牛胰臟,是一種內切核糖核酸酶,可特異攻擊RNA上嘧啶殘基的3’端,切割胞嘧啶或尿嘧啶與相鄰核苷酸形成的磷酸二酯鍵,反應終產物是3’嘧啶核苷酸和末端帶3’嘧啶核苷酸的寡核苷酸。無輔助因子及二價陽離子存在時,核糖核酸酶A的作用可以被胎盤RNA酶抑制劑(RNasin)或氧釩一核糖核苷復合物(vanadyl—ribonuclosidecomplex,VRC)所抑制。RNase A的反應條件極廣,且極難失活。在低鹽濃度(0~100 mmol/l NaCl)下,RNase A切割單鏈和雙鏈RNA、DNA:RNA雜交體中的RNA;當NaCl濃度為300 mmol/l。或更高時,RNase A就特異性切割單鏈RNA。去除反應液中的RNase A,通常需要蛋白酶K處理、酚反復抽提和乙醇沉淀。在分子克隆中,核糖核酸酶A的主要用途為:①從DNA:RNA雜交體中去除未雜交的RNA區。②確定RNA或D......閱讀全文
(一)核糖核酸酶A核糖核酸酶A(RNase A)來源于牛胰臟,是一種內切核糖核酸酶,可特異攻擊RNA上嘧啶殘基的3’端,切割胞嘧啶或尿嘧啶與相鄰核苷酸形成的磷酸二酯鍵,反應終產物是3’嘧啶核苷酸和末端帶3’嘧啶核苷酸的寡核苷酸。無輔助因子及二價陽離子存在時,核糖核酸酶A的作用可以被胎盤RNA酶抑制劑
實驗方法原理 RNaseⅠ分解 RNA 形成 3'-磷酸單核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸,以 Cp 或 Up 結尾形成一個 2',3'-環狀磷酸中間體。實驗材料 酶樣品試劑、試劑盒 乙酸緩沖液乙酸鈾酰-高氯溶液RNA(酵母)溶液核酸核酸酶儀器、耗材 分光光度計實驗步驟
去氧核糖核酸酶在高等動物的胰液中發現。核苷酶,發現存在于高等動物的腸液中。 人體的消化功能依靠胃腸運動的機械性消化和消化酶作用的化學性消化來完成。消化液中含有大量消化酶,可促進食物中糖、脂肪、蛋白質的水解。由大分子物質變為小分子物質,以便被人體吸收利用。葡萄糖、甘油、甘油-酯、氨基酸等都是可溶
生化研究,測定核酸的結構· RNase 保護檢測· 去除非特異結合的RNA· 分析RNA 序列· 水解蛋白樣品中的RNA· 純化DNA此外,它具有顯著的細胞毒性,可以殺滅許多腫瘤細胞系,可以抑制導致艾滋病的HIV-1病毒在細胞中的復制,可以治療乙肝。(1)從DNA-RNA或RNA—RNA雜合體中去除
一、體外轉錄在無菌1.5 ml 微型離心管中,結合以下內容:4 ul 5倍轉錄緩沖液2 ul 0.1 M DTT4 ul 2.5 MM NTP(A,C,G)0.8 ul RNA酶抑制劑(25 U/ul)RNA酶抑制劑(Promega)中100 UM冷UTP1 ul/ug ?UL線性DNA模板5 ul
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 RNaseⅠ 分解 RNA 形成 3'-磷酸單核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸,以 Cp 或
實驗方法原理 RNaseⅠ 分解 RNA 形成 3'-磷酸單核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸,以 Cp 或 Up 結尾形成一個 2',3'-環狀磷酸中間體。 實驗材料 酶樣品 試劑、試劑盒 乙酸緩沖液乙酸鈾酰-高氯溶液RNA(酵母)溶液核酸核酸酶 儀器
生化研究,測定核酸的結構 · RNase 保護檢測 · 去除非特異結合的RNA · 分析RNA 序列 · 水解蛋白樣品中的RNA · 純化DNA 此外,它具有顯著的細胞毒性,可以殺滅許多腫瘤細胞系,可以抑制導致艾滋病的HIV-1病毒在細胞中的復制,可以治療乙肝。 (1)從DNA-R
在許多反轉錄病毒中與多功能酶的反轉錄酶有關,在病毒基因組進入DNA轉錄的不同階段執行重要的功能。在真細菌中,核糖核酸酶H確信在以下方面是所必需的:從Okazaki片段去除RNA引物時、在轉錄子進入DNA聚合酶I啟動DNA合成所用引物的轉錄過程時,以及在去除R-環為在大腸桿菌染色體復制起點提供不規
指能水解RNA磷酸二酯鍵的酶稱核糖核酸酶(ribonuclease,RNase)。不同的RNase其專一性不同,例如牛胰核糖核酸酶(RNase I),它的作用位點是嘧啶核苷3’一磷酸與其他核苷酸之間的連接鍵,而核糖核酸酶T1(RNase T1)的作用位點是3’鳥苷酸與其他相鄰核酸之間的5’一OH間的