FISH檢測乳腺癌中HER2擴增實驗
試劑、試劑盒 胃蛋白酶中性福爾馬林緩沖液甲酰胺乙醇儀器、耗材 探針試劑盒熒光顯微鏡實驗步驟 一、切片及制片1.從福爾馬林固定石蠟包埋的組織塊上切厚組織切片,37°C 水浴展片。2.貼在正含電荷的載玻片上。3.另連續切一張相應的組織切片,用蘇木素和伊紅(H&E) 染色(見注釋 2)0二、脫蠟和浸透組織切片1.在 HE 切片上確認適當的腫瘤細胞位置(見注釋 3)。2.檢查切片組織的成分及固定質量(見注釋 4)。3.烤箱或烤片器中烤片 60°C、2 h(見注釋 5)。4.將切片放入切片架,二甲苯 3 缸,每缸 5 min,去除石蠟。過 3 遍無水乙醇(見注釋 6)。5.用烤片器或電熱板 45°C、3 min 干片。6.將切片放入室溫下 50 mL0.2mol/LHCl 中 20 min。7.50 ml 蒸餾水洗片 lmin,2XSSC 洗 2 次,每次 3 min。8.放入 81°C 的 lmol/LNaSCN 中,30 mi......閱讀全文
FISH-檢測乳腺癌中-HER2-擴增實驗
基因擴增經常在人腫瘤細胞中被檢測到并在腫瘤發生中起重要的作用。用比較基因組雜交對腫瘤細胞進行全基因組掃描,揭示出在實體腫瘤基因組的許多區域有基因拷貝數的改變。對改變區域 DNA 的深入研究顯示在實體瘤中復雜的 DNA 重排涉及多個基因并跨越幾個 Mb。在染色體倍體變化中,經常伴有基因重排。盡管研究
FISH-檢測乳腺癌中-HER2-擴增實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 胃蛋白酶 中性福爾馬林緩沖液 甲酰胺 乙醇 儀器、耗材 探針試劑盒
FISH-檢測乳腺癌中-HER2-擴增實驗
試劑、試劑盒 胃蛋白酶中性福爾馬林緩沖液甲酰胺乙醇儀器、耗材 探針試劑盒熒光顯微鏡實驗步驟 一、切片及制片1.從福爾馬林固定石蠟包埋的組織塊上切厚組織切片,37°C 水浴展片。2.貼在正含電荷的載玻片上。3.另連續切一張相應的組織切片,用蘇木素和伊紅(H&E) 染色(見注釋 2)0二、脫蠟和浸透組織
臨床診斷中的FISH檢測
FISH(即熒光原位雜交)技術作為分子診斷的重要工具,在科研和臨床診斷領域都有著廣泛的應用。FISH檢測是利用熒光基團標記DNA探針,再將標記的DNA探針與樣本DNA進行原位雜交,最后在熒光顯微鏡下對熒光信號進行計數,以此作為診斷的依據。FISH的操作簡便快捷,結果直觀準確,因此FISH成了許多疾病
臨床診斷中的FISH檢測
FISH(即熒光原位雜交)技術作為分子診斷的重要工具,在科研和臨床診斷領域都有著廣泛的應用。FISH檢測是利用熒光基團標記DNA探針,再將標記的DNA探針與樣本DNA進行原位雜交,最后在熒光顯微鏡下對熒光信號進行計數,以此作為診斷的依據。FISH的操作簡便快捷,結果直觀準確,因此FISH成了許多疾病
量子點多色成像揭示乳腺癌標志物的原位分子表達譜
華盛頓大學X. H. Gao教授和埃默里大學R. M. O’Regan教授課題組,將525 nm, 565 nm, 605 nm, 655 nm 和705 nm發射波長的量子點,直接與HER2, ER, PR, EGFR 和 mTOR的一抗進行偶聯。上述分子是臨床重要的乳腺癌標志物,對于乳腺
精確HER2檢測能防止乳腺癌及胃癌
“臨床上有不少患者由于檢測結果出現假陽性或假陰性而錯過最佳治療機會,患者進行規劃化的HER2檢測,能防止乳腺癌及胃癌HER2患者被漏診或誤診,對治療的真正規范化有重要意義。”復旦大學附屬腫瘤醫院腫瘤內科主任李進教授在日前舉行的“腫瘤個體化治療策略”媒體發布會如是說道。 據了解,目前臨床上用于H
3D-CNV鑒定(Sucess-Story)CN
HER2 (人表皮生長因子2,又稱為ERBB2) 是一種原癌基因,在特定的情況下會促進癌癥細胞的增殖。原癌基因促進腫瘤發生的機制有三種:(1) 染色體重排導致超活性基因融合,(2) 編碼序列上的點突變或缺失導致超活性蛋白生成,(3) 基因擴增導致蛋白質過表達。HER2基因擴增多年來一直被視作
總緩解率達60.9%!HER2陽性乳腺癌重磅消息!
圣安東尼奧乳腺癌研討會(SABCS)是全球規模最大、最具影響力的乳腺癌會議,每年有來自全球90多個國家超過7000名科研人員與醫生代表參加。2019年第42屆SABCS會議于近日在美國圣安東尼奧舉行,此次會議上,阿斯利康(AstraZeneca)與合作伙伴第一三共(Daiichi Sankyo)
阿斯利康/第一三共$69億合作產品Enhertu在美國上市
第一三共制藥(Daiichi Sankyo)近日宣布,在美國市場推出乳腺癌新藥Enhertu(fam-trastuzumab deruxtecan-nxki,DS-8201),該藥與阿斯利康(AstraZeneca)合作開發,于2019年12月20日獲得FDA加速批準,用于在轉移性疾病中已接受過
基因檢測幫助乳腺癌患者避免不必要的化療
美國托馬斯杰斐遜大學醫院的研究人員發現,確定乳腺癌分子亞型的基因檢測能帶來更精確的預后,從而為最佳治療方案提供寶貴的指導。領導這項研究的是杰斐遜乳腺護理中心的主任Massimo Cristofanilli醫學博士。 Cristofanilli博士及其同事認為,Agendia公司推出的M
HER2陽性乳腺癌?的進展綜述
??????? 過去的10年里,隨著新的HER2靶向治療藥物的出現,HER2陽性乳腺癌的治療方面有了很大的進展。在2014年Miami乳腺癌會議過程中,乳腺癌專家、加拿大多倫多大學副教授和多倫多Sunnybrook Odette癌癥研究中心乳腺腫瘤主任Sunil Verma等人探討了這些進展
FISH-技術基本實驗
實驗方法原理試劑、試劑盒70%乙醇SSC磷酸鹽緩沖溶液(PBS)Hemo-De清理試劑蛋白酶溶液儀器、耗材水浴鍋增濕器玻片實驗步驟一、制備培養的中期細胞標本1.在一個獨立小室里放置一個水浴鍋和一臺增濕器。濕度應大約50%,如果房間濕度計顯示低于45%,則應使用加濕器。2.預熱水浴鍋至67℃±2℃,在
FISH-技術基本實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 試劑、試劑盒 70%乙醇 SSC
FISH-技術基本實驗
實驗方法原理 試劑、試劑盒 70%乙醇SSC磷酸鹽緩沖溶液(PBS)Hemo-De清理試劑蛋白酶溶液儀器、耗材 水浴鍋增濕器玻片實驗步驟 一、制備培養的中期細胞標本1.在一個獨立小室里放置一個水浴鍋和一臺增濕器。濕度應大約50%,如果房間濕度計顯示低于45%,則應使用加濕器。2.預熱水浴鍋至67℃±
熒光原位雜交在實體腫瘤學方面的應用介紹
在FISH技術之前的所有測定基因擴增的方法,都是采用經典的分子生物學方法,與FISH相比,這些方法不僅費時費力,而且也不能在細胞水平上觀察到基因擴增的狀態。FISH技術更大的優點是可以在間期細胞核上觀察到DNA擴增的直接證據,而且間期細胞核所顯示出的擴增DNA熒光信號的數量多少及熒光強度常與DN
復發/轉移性乳腺癌標志物臨床應用專家共識(二)
3、復發/轉移性乳腺癌一線治療療效的預測生物標志物3.1? ?BRCA1/2?具有明確遺傳傾向的乳腺癌患者約15%攜帶BRCA1/2基因胚系變異,攜帶BRCA1/2基因致病突變者,不論女性還是男性,乳腺癌發病風險均大幅增加。目前NCCN、ESMO、ASBS及CSCO等指南推薦適用BRCA1/2基因檢
HER2基因檢測法的意義
實驗室人員可通過HER2基因檢測法,在少量乳腺癌標本中,計算第17號染色體上HER2基因的拷貝數。通過化學染色,標本中的HER2基因和第17號染色體拷貝的顏色發生改變。HER2基因的拷貝呈現黑色,第17號染色體拷貝呈現紅色。在標準顯微鏡下可觀察到這些顏色變化。 這些特征能使檢驗人員在同一片子上
羅氏新款雙原位雜交伴隨診斷試劑盒-致力個性化醫療
羅氏(Roche)近日宣布推出新的VENTANA HER2 Dual ISH DNA Probe Cocktail assay(VENTANA HER2雙原位雜交DNA探針雞尾酒檢測法),用于檢測乳腺癌和胃癌中的HER2生物標志物。HER2(人表皮生長因子受體2)是乳腺癌和胃癌的重要生物標志物,
用細胞爬進行RNA-FISH檢測的實驗操作
用細胞爬片進行 RNA FISH 檢測的實驗流程?1. 細胞在蓋玻片上進行培養,細胞長好后用 CSK 緩沖液簡單洗滌。?2. 細胞爬片用 4% 多聚甲醛在 4℃ 固定 10 min。?3. 用含有 0.5% TritonX-100,,10 mM VRC 的 CSKBuffer 溶液在 4℃ 處理 1
HER2陽性乳腺癌新藥!有效治療腦轉移
西雅圖遺傳學公司(Seattle Genetics)近日宣布,已完成向美國食品和藥物管理局(FDA)提交靶向抗癌藥tucatinib的新藥申請(NDA)。該NDA尋求FDA批準tucatinib聯合曲妥珠單抗(trastuzumab)和卡培他濱(capecitabine),用于在新輔助治療、輔助
熒光原位雜交的技術應用
(一)基因(或DNA片段)染色體定位和基因圖譜繪制目前應用的基因定位的主要方法是FISH。分離到的DNA序列直接通過FISH,同時采用多種顏色熒光素的標記探針,結合中期染色體和間期細胞方面的信息,可快速確定一-系列DNA序列之間的相互次序和距離,完成基因制圖。用不同顏色炎光索標記2個不同的DNA鏈,
《自然·醫學》:指導HER2陽性大腸癌靶向治療,ctDNA能行
作為最常見的消化道惡性腫瘤之一,結直腸癌的發病率目前占所有惡性腫瘤第3位,而癌癥相關病死率已躍居第2位,嚴重威脅著人類健康[1]。隨著分子生物學研究的深入和驅動基因的發現,結直腸癌的治療也逐漸向個體化、精準化方向發展。人表皮生長因子受體2(HER2)已初步被確認為結直腸癌治療靶點[2],既往研究
HER2+乳腺癌治療新希望!增殖蔓延多步驟共同靶點被發現
AXL可由其配體GAS6激活并在三陰性乳腺癌細胞中表達。在當前的研究中,研究人員發現HER2陽性(HER2 +)乳腺癌中AXL的表達,其與患者生存率較差相關。 使用小鼠的HER2 +乳腺癌模型,研究人員發現AXL對于轉移至關重要。研究人員明確AXL對于轉移部位的血管內滲出,外滲和生長是必需的。
乳腺癌新藥!三線治療HER2陽性轉移性乳腺癌
Puma Biotechnology是一家專注于開發和商業化創新產品以加強癌癥護理的生物制藥公司。近日,該公司宣布,已向美國食品和藥物管理局(FDA)提交了一份補充新藥申請(sNDA),尋求批準靶向抗癌藥Nerlynx(neratinib)聯合卡培他濱(capecitabine)用于既往已接受2
乳腺癌的基因檢測有哪些
乳腺癌的基因檢測首先是BRCA1和BRCA2,BRCA1和BRCA2是現在最主要的基因檢測,其他還有HER2(HER2過表達型)。在基因檢測里最有意義的是BRCA1和BRCA2,如果它們有突變會影響乳腺癌的發生。BRCA1和BRCA2檢測的結果是以白人為基礎的,最明顯是阿肯色州猶太人,來源于東歐
熒光原位雜交的技術應用
作為一種可視化特定DNA序列的分子細胞遺傳學技術,熒光原位雜交技術目前被廣泛應用于染色體畸變。如非整倍體、染色體重組。其基本流程包括探針標記、探針的變性、樣本變性、雜交和熒光信號采集。熒光原位雜交技術在基因定性、定量,整合、表達等方面的研究中頗具優勢,目前已經被廣泛應用于遺傳病診斷、病毒感染分析、產
熒光原位雜交的技術應用
作為一種可視化特定DNA序列的分子細胞遺傳學技術,熒光原位雜交技術目前被廣泛應用于染色體畸變。如非整倍體、染色體重組。其基本流程包括探針標記、探針的變性、樣本變性、雜交和熒光信號采集。熒光原位雜交技術在基因定性、定量,整合、表達等方面的研究中頗具優勢,目前已經被廣泛應用于遺傳病診斷、病毒感染分析、產
熒光原位雜交技術的應用介紹
作為一種可視化特定DNA序列的分子細胞遺傳學技術,熒光原位雜交技術目前被廣泛應用于染色體畸變。如非整倍體、染色體重組。其基本流程包括探針標記、探針的變性、樣本變性、雜交和熒光信號采集。熒光原位雜交技術在基因定性、定量,整合、表達等方面的研究中頗具優勢,目前已經被廣泛應用于遺傳病診斷、病毒感染分析、產
?-熒光原位雜交的技術應用
作為一種可視化特定DNA序列的分子細胞遺傳學技術,熒光原位雜交技術目前被廣泛應用于染色體畸變。如非整倍體、染色體重組。其基本流程包括探針標記、探針的變性、樣本變性、雜交和熒光信號采集。熒光原位雜交技術在基因定性、定量,整合、表達等方面的研究中頗具優勢,目前已經被廣泛應用于遺傳病診斷、病毒感染分析、產