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    NaCl離心法去除質粒DNA制備物中的小片段核酸實驗

    常規的質粒 DNA 制備物中都會不同程度地污染有來自宿主菌基因組或質粒斷裂碎片的小分子 DNA 或 RNA。盡管它們的分子質量不大,但數量多,會對制備物中 DNA 片段 3' 和 5' 端的總量產生明顯影響。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理常規的質粒 DNA 制備物中都會不同程度地污染有來自宿主菌基因組或質粒斷裂碎片的小分子 DNA 或 RNA。盡管它們的分子質量不大,但數量多,會對制備物中 DNA 片段 3' 和 5' 端的總量產生明顯影響。試劑、試劑盒乙醇NaCl乙酸鈉TE胰 RNase儀器、耗材Beckman SW 50.1 轉子實驗步驟一、材料1. 緩沖液和溶劑乙醇,NaCl(1 mol/L,用 TE ( pH 8.0 )配制),乙酸鈉(3 mol/L,pH 5.2 ),TE ( pH 8.0)。2. 酶和緩沖液無 DNase 的胰 RNase3. 核酸和寡核苷......閱讀全文

    核酸分離與純化的設計與原則

    細胞內的核酸包括DNA與RNA兩種分子,均與蛋白質結合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA與蛋白質結合成脫氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotein,DNP),RNA與蛋白質結合成核糖核蛋白(ribonucleoprotein,RNP)。其中真核生物的DNA又有染色體DNA

    核酸抽提經驗及原理

    1、核酸抽提原理 簡單地講,核酸抽提包含樣品的裂解和純化兩大步驟。裂解是使樣品中的核酸游離在裂解體系中的過程,純化則是使核酸與裂解體系中的其它成分,如蛋白質、鹽及其它雜質徹底分離的過程。 經典的裂解液幾乎都含有去污劑 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等

    新冠核酸檢測檢查哪些項目

      自2019 年 12 月以來,湖北省武漢市陸續發現新型冠狀病毒(2019 novel coronavirus, 2019-nCoV)感染患者,且呈快速上升之勢。自新型冠狀病毒疫情爆發以來,近期湖北、武漢疫情從過去的爆發式增長已經走向趨緩,武漢防控工作取得階段性成效。  而事實上,在2020年1月

    核酸分離與純化的設計與原則(一)

    第一節        核酸分離與純化的設計與原則細胞內的核酸包括DNA與RNA兩種分子,均與蛋白質結合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA與蛋白質結合成脫氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotei

    國產核酸蛋白檢測儀的發展與性能

    國產核酸蛋白檢測儀的發展與性能層析分離技術是我國高校《生化分析實驗》中的基礎實驗。70年代后期國內研制的“核酸蛋白檢測儀”,使用某一波長(280nm或254nm等)進行定性檢測分離,用記錄儀描譜,長期在高校實驗室使用。在我國科技人員努力下,近年來,市場上相繼出現了可代替記錄儀的“電腦采集器”、“電腦

    國產核酸蛋白檢測儀的發展與性能

    層析分離技術是我國高校《生化分析實驗》中的基礎實驗。70年代后期國內研制的“核酸蛋白檢測儀”,使用某一波長(280nm或254nm等)進行定性檢測分離,用記錄儀描譜,長期在高校實驗室使用。在我國科技人員努力下,近年來,市場上相繼出現了可代替記錄儀的“電腦采集器”、“電腦核酸蛋白檢測儀”、“雙波長電腦

    自動化核酸提取、檢測和定量平臺

    在現今分子生物領域中,樣本的核酸提取、檢測和定量已是每個實驗室常用的實驗手段。近年,實時定量PCR和第二代測序技術的誕生更令核酸提取的需求大大增加。這些新的核酸檢測技術對核酸的純度要求比較高,所以核酸提取的質量也比以前更受注重。另一方面,準確的核酸定量對于這些新技術,如第二代測序,起了成敗的關鍵作用

    分子間相互作用分析:熒光標記VS無標記

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    核酸分離與純化的設計與原則(二)

    (四)核酸的濃縮、沉淀與洗滌隨著核酸提取試劑的逐步加入,以及去除污染物過程中核酸分子不可避免的丟失,樣品中核酸的濃度會逐漸下降,及至影響到后面的實驗操作或不能滿足后繼研究與應用的需要時,需要對核酸進行濃縮。沉淀是核酸濃縮最常用的方法,其優點在于核酸沉淀后,可以很容易地改變溶解緩沖液和調整核酸溶液至所

    分子生物學實驗室的常規儀器設備及有關操作

      【實驗目的】   (1)了解實驗的常規儀器、設備、耗材。   (2)掌握本實驗所用儀器的功能和使用方法。   【實驗內容】   一、驗室的常規儀器、設備   (一) 溫度控制系統:   1. 冰箱: 根據藥品、試劑及多種生物制劑保存的需要,必須具備不同控溫級別的

    分子生物學實驗室的常規儀器設備及有關操作(二)

    (六)超凈工作臺:內有紫外燈、照明燈、還應有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設備,是一種提供局部潔凈度的設備。其原理是鼓風機驅動空氣,經過低、中效的過濾器后,通過工作臺面,使實驗操作區域成為無菌的環境。超凈臺按氣流方向的不同大致有幾種類型:  ①側流式:凈化后氣流,從左側或右側通過工作臺

    GP全自動核酸提取儀在2019-nCoV冠狀病毒核酸制備中的意義

    最近“2019-nCoV”冠狀病毒肆虐全球,這種突發傳染病嚴重威脅人民的健康和生命安全,目前這種冠狀病毒的核酸檢測是最高效快速的確診方法之一,而核酸的制備是精準檢測該病毒的重要前提。核酸的自動制備不僅確保了提取核酸質量的一致性和穩定性,還能保護檢測人員不受病毒感染威脅。GP 核酸提取儀以自身的優

    大連化物所G-四鏈體核酸結構及催化功能研究取得進展

     近日,中國科學院大連化學物理研究所催化基礎國家重點實驗室中科院院士李燦、博士研究生程明攀等在G-四鏈體核酸(G4-DNA)結構性質和催化功能研究方面取得進展,發現G4-DNA的loop區域序列的排列組合方式對富含鳥嘌呤(guanine,G)的DNA序列折疊形成的G4-DNA的二級結構和熱穩定性具有

    研磨機研磨樣品真實案例

    案例一:多樣品組織研磨機Tissuelyser-24研磨指甲-上海凈信返回 實驗目的:研磨指甲提取核酸。實驗地點:北京全普基因公司實驗材料和器具樣品:指甲儀器:TISSUELYSER-24多樣品研磨機(上海凈信)配件:XXmlL研磨管 研磨珠(上海凈信 ,XXmm  XXmm)研磨條件:液

    新型離子交換柱應用歸納

    圖1.  不同粒度填料在不同流速下的壓力對比。色譜條件:柱尺寸,4.6mm ID× 3.5cm;流動相,20mmol/L Tris-HCl(pH8.5)。 本文實驗通過對蛋白、核苷酸等樣品分離,考察了新型無孔離子交換色譜柱的分離性能。結果表明,該類色譜柱可以在較低的柱壓下實

    全血、血清、血漿樣本在DNA檢測過程中的區別

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      很多的血液類DNA提取試劑盒在適用樣本上都會寫上全血、血漿、血清均可適用,所以很多老師在做核酸診斷類的實驗時,就認為這三種樣本都可以使用,選擇比較隨意,但是得到的結果往往并不盡如人意,那么這三種樣本有什么區別,對核酸診斷實驗有什么影響呢?   簡單來說,血漿是全血的一部分,血清是血漿的一部分。

    RT-PCR技術-2

    三:操作1:反轉錄反應按下表準備反應液樣品 體積 終濃度5×反應緩沖液 10μl 1×dNTP混合液 1μl 0.2mM下游引物 50pmol* 1μm上游引物 50pmol* 1μm25mM MgSO4 2μL 1mMAMV反轉錄酶 1μl 0.1μ/μlTflDNA聚合酶 1μl 0.1μ/μl

    核酸的變性和復性

    DNA的變性 DNA的復性 核酸分子雜交   變性(denaturation)和復性(renaturation) 是雙鏈核酸分子的二個重要物理特性。也是核酸研究中經常引用的術語。雙鏈DNA,RNA雙鏈區,DNA: RNA雜種雙鏈(hybrid duplex)以及其它異源

    DNA印跡(Southern Blot)實驗

    【實驗原理】DNA印跡是1975年由英國Southern創建的。其基本原理是:DNA分子經限制性核酸內切酶酶切后,由瓊脂糖凝膠電泳將所得 DNA片段按分子質量大小分離,然后將DNA片段變性,并使凝膠中的單鏈DNA片段轉移到尼龍膜、硝酸纖維素膜(NC)或其他固相支持物上,此法中DNA 片段

    分子生物學實驗基礎知識

    分子生物學是在生物化學基礎上發展起來的,以研究核酸和蛋白質結構、功能等生命本質的學科,在核酸、蛋白質分子水平研究發病、診斷、治療和預后的機制。其中基因工程(基因技術,基因重組)是目前分子生物學研究熱點,這些技術可以改造或擴增基因和基因產物,使微量的研究對象達到分析水平,是研究基因調控和表達的方法,也

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    動物肝臟RNA的制備(苯酚法)和純度測定-1

    原理細胞內大部分RNA 均與蛋白質結合在一起,以核蛋白的形式存在。因此分離RNA時必須使RNA與蛋白質解離,并除去蛋白質。除去蛋白質的方法主要有:(1)用氯仿-辛醇混合液劇烈振蕩,使蛋白質變性。(2)在冷的2mol/L鹽酸胍溶液中沉淀RNA,大部分蛋白質仍處于溶解狀態。(3)以去污劑如十二烷基硫

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    怎么判斷磁珠法核酸提取儀提取磁珠的穩定性?

      核酸提取磁珠又稱為DNA提取磁珠,RNA提取磁珠,硅基磁珠,是生物磁珠的一種,其原理是采用穩定的高分子材料作為分離載體,引入磁性,再偶聯上配基,形成含有磁性粒子的高分子微球。核酸提取磁珠適用于各類生物檢材的DNA、RNA提取,目前已廣泛應用于植物、動物、全血、血清、口腔拭子、唾液、干血片、細菌、

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      從國家認監委官網獲悉,近日,江西檢驗檢疫局綜合技術中心收到參加英國Fapas 組織的“GeMMU43玉米轉基因成分檢測”的能力驗證結果,所檢測的11個轉基因成分參數均獲滿意,在36家實驗室中只有10家實驗室取得了參數全部滿意的喜人結果,標志著該中心在轉基因檢測領域水平又上一個新臺階,相關檢測完全

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    分子生物學實驗室的常規儀器設備

       (一) 溫度控制系統:  1. 冰箱: 根據藥品、試劑及多種生物制劑保存的需要,必須具備不同控溫級別的冰箱,最常使用的有:4℃、-20℃、-80℃冰箱。  4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。  -20℃適用于某些試劑、藥品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白質樣品等。  -80℃適合某些長

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