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    七步反應、不需分離、全連續合成利奈唑胺

    從現有的文獻可以看出,合成利奈唑胺的步驟至少有7步,有的合成路線包含有基團的保護和脫保護工藝。從起始原料到終產物需要60小時以上,整體工藝需要的時間長,操作繁瑣,效率較低。下面就讓我們一起來欣賞這篇佳作。有興趣的朋友可以下載全文閱讀DOI:10.1002 / anie. 201901814。圖1:逆合成分析策略作者通過經典的逆合成分析策略將利奈唑胺合成路線分解出了6個化合物(圖1)。從最初的起始物料出發,研究整個合成路線。首先,作者從合成化合物7出發,通過Ritter反應,一步制備酰胺物7。在制備過程中,并非一帆風順,在使用BF3·C2H5OC2H5過程中,反應監測到了大量的副產物,主產物收率較低,在這樣的情況下,作者仔細地研究了反應的機理,并嘗試將BF3·C2H5OC2H5替換成C8H18BF3O,最終以90%的收率得到化合物7(圖2)。圖2:連續流工藝中化合物7的路線優化在合成化合物7的基礎之上,作者對每一步開始連續流工藝研......閱讀全文

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗             實驗步驟

    Western Blot的過程與優化,著重于化學發光檢測

    實驗步驟 一、蛋白質印跡法 蛋白質印跡 (Western Blotting) 法是在混合的復合物中鑒定和定量特定蛋白質的一種有效且常用的方法 (Towbin et al. ,1979)。這一技術對固定在硝酸纖維素膜或聚偏二氟乙烯

    常用的分子生物學基本技術

    核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的

    美國化學會C&EN評選出2015年頂級化學成果

      新年將至,又到了年終盤點的時候。美國化學會(ACS)旗下的C&EN網站也端出了一席年終大餐:2015年化學領域最受矚目的研究成果。其實,在過去的這一年中一直關注X-MOL的讀者朋友也許會發現,其中絕大多數成果已經在X-MOL平臺報道過了。不過,我們覺得,在這節日的氣氛中,讓這一

    分子生物學常用實驗技術(page 2)

    一、RNA 制備   模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人

    食品安全快速檢測技術你知多少?

    快速檢測技術廣泛用于食品安全快速檢測,臨床檢驗、檢驗檢疫、毒品檢驗等公共領域。食品安全快速檢測是指對食品利用便攜式分析儀器及配套試劑快速得到檢測結果的一種檢測方式。    1、食品安全問題主要有害污染物    (1)農藥,化肥:有機磷,有機氯,硝酸鹽 

    N-芳基吡唑衍生物的連續合成

    吡唑在許多藥物中是關鍵的藥效基團。1969年從鏈霉菌中分離出的吡唑衍生物(1)具有廣譜抗病毒活性。多種重磅藥物塞來昔布(2,Celebrex),利莫那班(3,Acomplia),西地那非(4,Viagra)和最近批準的肺癌藥物克唑替尼(5,Xalkori)具有吡唑亞結構。Figure 1具有吡唑結構

    【技術】N-芳基吡唑衍生物的連續合成

      吡唑在許多藥物中是關鍵的藥效基團。1969年從鏈霉菌中分離出的吡唑衍生物(1)具有廣譜抗病毒活性。多種重磅藥物塞來昔布(2,Celebrex),利莫那班(3,Acomplia),西地那非(4,Viagra)和最近批準的肺癌藥物克唑替尼(5,Xalkori)具有吡唑亞結構。   Figure 1

    從概念到產業:綠色化學的征程和未來

      日前,首屆綠色與可持續發展化學國際會議在北京召開。綠色化學的先驅者Paul Anastas博士和領軍人物如佟振合院士、Klaus Kümmerer、李朝軍、Shu Kobayashi、張鎖江、趙宇亮、韓布興、James Clark等綠色化學領域的“big names”齊聚一堂,共同討論綠色化學和

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗(五)

    六、CID、ECD和 ETD的對比基于質譜的蛋白質組學分析依賴于氣相中肽段在低碰撞能量下斷裂, 在質量譜圖中形成峰。進而通過峰圖確定肽段序列,再推斷出相關蛋白質。完成肽段斷裂最主要的方法就是碰撞誘導解離(collision induced dissociation,C I D ) ( S w

    分子實驗方法4:RNA的提取和cDNA合成

    第一節 概 述  從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA文庫,構建的cDNA文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA和相應基因組DNA序列差異可確定內含子存在和了解轉錄后加工

    多相催化氫化反應在藥物合成中的應用

    催化氫化反應是指還原劑或氫分子等在催化劑的作用下對不飽和化合物的加成反應。它是有機化合物還原方法中方便、常用、重要的方法之一。多相催化氫化反應主要包括碳碳、碳氧、碳氮鍵等不飽和重鍵的加氫反應和某些單鍵發生的裂解反應。被還原的底物和氫一般吸附在催化劑表面,活化后進行反應。多相催化氫化主要有如下優點。①

    DNA序列測定的技術和策略

    目前應用的兩種快速序列測定技術是Sanger等(1977)提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化學降解法。雖然其原理大相徑庭,但這兩種方法都是同樣生成互相獨立的若干組帶放射性標記的寡核苷酸,每組寡核苷酸都有固定的起點,但卻隨機終止于特定的一種或者多種殘基上。由于DNA上的每一個堿

    你知道廢水脫氮除磷技術研究進展方向嗎?

      北極星水處理網訊(華信博潤科技整理發布)氮磷作為湖泊富營養化的重要元素,一直受到人們的關注。本文綜述了處理氮磷廢水的主要技術及相關應用,并對未來的發展提出展望。   廢水脫氮技術   吹脫法   吹脫、汽提法對于脫除水中溶解氣體和某些揮發性物質有較好的效果。吹脫法去氮是利用NH4+與NH3

    你知道廢水脫氮除磷技術研究進展方向嗎?

      北極星水處理網訊(華信博潤科技整理發布)氮磷作為湖泊富營養化的重要元素,一直受到人們的關注。本文綜述了處理氮磷廢水的主要技術及相關應用,并對未來的發展提出展望。   廢水脫氮技術   吹脫法   吹脫、汽提法對于脫除水中溶解氣體和某些揮發性物質有較好的效果。吹脫法去氮是利用NH4+與NH3

    你知道廢水脫氮除磷技術研究進展方向嗎?

      北極星水處理網訊(華信博潤科技整理發布)氮磷作為湖泊富營養化的重要元素,一直受到人們的關注。本文綜述了處理氮磷廢水的主要技術及相關應用,并對未來的發展提出展望。   廢水脫氮技術   吹脫法   吹脫、汽提法對于脫除水中溶解氣體和某些揮發性物質有較好的效果。吹脫法去氮是利用NH4+與NH3

    熒光RNA隨機引物觸發的聚合酶鏈反應實驗

    差異顯示聚合酶鏈反應(PCR) 可促進在諸多物種中與污染暴露相關的新分子標志物的鑒定。至今,已有多種差異顯示方法被詳細描述。這里,我們描述了一種改良的RNA 隨機引物觸發的 PCR 方 法(RNAarbitrarily primed PCR, RAP-PCR) , 主要涉及通過 羅 丹 明(rhod

    熒光RNA隨機引物觸發的聚合酶鏈反應實驗

    實驗步驟 ##一、 從組織和培養細胞中分離RNA1.TRIzol試 劑(Invitrogen)。該試劑含有苯酚和硫氰酸鹽化合物,操作時應穿實驗服,戴手套,存放于 4°C 。2.氯仿。3.異丙醇。4.乙醇。5.焦炭酸二乙酯(DEPC) 處理的水

    4.3 非洲爪蟾卵母細胞體外翻譯系統

    非洲爪蟾卵母細胞體外翻譯系統由于具有轉移定位、信號肽的切除和糖篇化的能力,因此對于絕大多數的外源性 mRNA 都具冇持續性的修飾加工能力。由于其膜的穩定性高,因此可使用蔗糖密度梯度離心或蛋白酶保護反應等方法分析轉錄產物的定位。實驗材料成年雌性非洲爪蟾抑肽酶tRNA蛋白酶 K儀器、耗材離心機冷室實驗步

    非洲爪蟾卵母細胞體外翻譯系統

                實驗材料 成年雌性非洲爪蟾 抑肽酶 tRNA 蛋白酶 K

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗2

    二、用 于 鑒 定 P T M 的富 集 技 術2.1 磷酸化絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸殘基的可逆磷酸化也許是研究最為深人的 PT M 。蛋白質磷酸化信號網絡介導細胞對與不同的應激因子、生長因子、細胞因子以及細胞間相互作用作出響應。憐酸化還影響多種細胞進程,如增殖、凋亡 、遷移 、轉錄和蛋白質翻譯(W

    聚合酶鏈反應(PCR)技術的發展和應用-2

    第五節 PCR各處應用模式  一、兼并引物(Degenerate Primer)PCR  密碼子具有兼并性,如表22-4,單以氨基酸順序推測編碼的DNA序列是不精確的,但可以設計成對兼并引物,擴增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時寡核苷酸中核苷酸序列可以改變,但核苷酸的數量應相同。兼并度越低,

    3.1.1 RNA 標準轉錄反應

    利用 DNA 聚合酶 I 的大片段(Klenow 酶)的 3'— 5'外切酶活性將 3'黏性末端轉化成平末端。具體方法是在體外轉錄體系尚未加入核苷酸和 RNA 聚合酶時,加入 Klenoow 片段 (終濃度為 5U/ug),于 22℃ 孵育 15mim, 然后再加入核苷酸混合物和RNA 聚合酶實驗材

    RNA 標準轉錄反應

                實驗材料 模板 DNA 或質粒 試劑、試劑盒 TE 異

    RNA 標準轉錄反應

    實驗材料 模板 DNA 或質粒試劑、試劑盒 TE 異丙醇 3mol LNaAc 無水乙醇 5×轉錄緩沖液 l00 mmol L DTT RNasin rATPrGTPrUTP 各 2.5 mmol L [α42P] rCTP SPGT3 或 T7RNA 聚合酶 TE-飽和的酚氯仿異戊醇 DN

    2019中國生命科學領域CNS盤點:曹雪濤 顏寧 施一公上榜

      截至2019年12月23日,中國學者在Cell,Nature及Science在線發表了107篇文章(2019年的Cell ,Nature 及Science 已經全部更新),iNature團隊對于這些文章做了系統的總結:  按雜志來劃分:Cell 發表了31篇,Nature 發表了44篇,Scie

    氨基酸結構和分類(五)

    凝血酶,水解Arg-Gly肽鍵。 羥胺可水解Asn-Gly,但Asn-Leu和 Asn-Ala也能部分裂解。 以上方法中,酶不能水解脯氨酸參與形成的肽鍵。 多肽部分水解后,降解成長短不一的小肽段,可用層析或電泳加以分離提純。經常用雙向層析或電泳分離,再用茚三酮顯色,所得的圖譜稱為肽指紋譜。

    青年學者齊聚光譜會 十五期原子光譜沙龍報告個個精彩

      分析測試百科網訊 2016年10月29日,第十九屆全國分子光譜學學術會議期間,舉辦了原子光譜及相關技術研究進展分會暨第十五期原子光譜沙龍,約50余人參與該分會和沙龍,十余位原子光譜領域的學者和專家做了精彩報告。原子光譜沙龍活動由清華大學分析中心邢志老師發起,分析測試百科網協助組織,沙龍側重一線實

    免疫細胞化學在神經科學中的應用

    免疫細胞化學的發展對許多領域的研究起到很大的推動作用,在神經科學的研究中尤為突出。本章 僅就免疫細胞化學在神經科學的基礎研究方面的應用做一簡要介紹。  一、確定神經遞質的性質、定性和分布  早期的神經科學工作者應用傳統的神經解剖學研究方法如甲基藍染色法、鍍銀染色法等對中樞及外周神經系統的結構做了大量

    RT-PCR實驗方法大全

    RT-PCR實驗有三步:抽提RNA,RT,PCR。 要求:1.做RT前必需測RNA濃度,逆轉錄體系對RNA量還是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不會出太大問題。 3. PCR,按常規。但如需擴長片段,則對前兩步要求較高,需要有完整的cDNA存在,不是單

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