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目前應用的兩種快速序列測定技術是Sanger等（1977）提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化學降解法。雖然其原理大相徑庭，但這兩種方法都是同樣生成互相獨立的若干組帶放射性標記的寡核苷酸，每組寡核苷酸都有固定的起點，但卻隨機終止于特定的一種或者多種殘基上。由于DNA上的每一個堿基出現在可變終止端的機會均等，因些上述每一組產物都是一些寡核苷酸混合物，這些寡核苷酸的長度由某一種特定堿基在原DNA全片段上的位置所決定。然后在可以區分長度僅差一個核苷酸的不同DNA分子的條件下，對各組寡核苷酸進行電泳分析，只要把幾組寡核苷酸加樣于測序凝膠中若干個相鄰的泳道這上，即可從凝膠的放射自影片上直接讀出DNA上的核苷酸順序。一Sanger雙脫氧鏈終止法 現行的邏終止法人加減法序列測定技術（Sacger和Coulson，1975）發展而來的。加減法首次引入了使用特異引物在DNA聚合酶作用下進行延伸反應、堿基特異性的鏈終止，以及......閱讀全文
DNA序列測定技術序列測定的技術和策略Sanger雙脫氧鏈終止法Maxam－Gilbert DNA化學降解法測序策略 目前應用的兩種快速序列測定技術是Sanger等（1977）提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化學降解法。雖然其原理大相徑庭，但這兩種方法都是同樣生成互相獨立的
現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解，并且導致了免疫新策略的產生，免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。 一、GST pull-down實驗 GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶，GST pull-down實驗是一個行之有效的驗
二、Maxam－Gilbert DNA 化學降解法與包括合成反應的鏈終止技術不同，Maxam-Gilbert法要對原DNA 進行化學降解。這一方法是在體外研究lac阻抑制與lac操縱基因相互作用時醞釀發展起來的。時至今日，可以探測DNA 構象的蛋白質－DNA 相到作用，仍然是Maxam- G
序列測定的技術和策略Sanger雙脫氧鏈終止法Maxam－Gilbert DNA 化學降解法測序策略目前應用的兩種快速序列測定技術是Sanger等（1977）提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化學降解法。雖然其原理大相徑庭，但這兩種方法都是同樣生成互相獨立的若干組帶放射性標記的
在DNA測序過去的40年中，我們見證了諸多技術的變革和測序規模的極度增長。從幾千個堿基到第一個人體基因組，乃至當前數以萬計的人體和無數其它的基因組。包括作為大量分子現象的“計數器”在內，DNA測序被廣泛和創造性地應用于各個領域。從長遠來看，我們可以預測DNA測序技術所帶來的影響將會與顯微鏡的使用
一、RNA 制備 模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人
一、雜交通過堿基對之間非共價鍵（主要是氫鍵）的形成即出現穩定的雙鏈區，這是核酸分子雜交的基礎。雜交分子的形成并不要求兩條單鏈的堿基順序完全互補，所以不同來源的核酸單鏈只要彼此之間有一定程度的互補順序（即某種程度的同源性）就可以形成雜交雙鏈。分子雜交可在DNA與DNA、RNA與RNA或RNA與DNA的
一、概述 前面已經介紹了核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序，通過堿基對之間非共價鍵（主要是氫鍵）的形成即出現穩定的雙鏈區，這是核酸分子雜交的基礎。雜交分子的形成并不要求兩條單鏈的堿基順序完全互補，所以不同來源的核酸單鏈只要彼此之間有一定程度的互補順序（即某種程度的同源性）就可以形成雜交雙鏈。分子雜交
一、概述 前面已經介紹了核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序，通過堿基對之間非共價鍵（主要是氫鍵）的形成即出現穩定的雙鏈區，這是核酸分子雜交的基礎。雜交分子的形成并不要求兩條單鏈的堿基順序完全互補，所以不同來源的核酸單鏈只要彼此之間有一定程度的互補順序（即某種程度的同源性）就可以形成雜交雙鏈。分子雜交
人類基因組計劃的主要任務之一就是要從大片段基因組區域或整條染色體DNA 上鑒定出基因表達序列(gene expressed sequences)或轉錄單位(transcription units)。在人類基因組30億個堿基對中，發生轉錄的表達序列(即基因)僅占總序列的3～5％。基因組中絕大部
2011年4月20日，第二屆全國藥品質量分析論壇的第二天，首先進行了為期半天的分會報告，從事化學藥品、生化藥品、中藥、中藥注射劑、藥包材/藥用輔料的專家學者繼續給出了精彩的報告，每場報告后都進行了熱烈的互動交流。下午，來自中國食品藥品檢定研究院的林瑞超教授、江蘇省食品藥品檢驗所的樊夏雷主任、國家
在血液中循環的細胞具有多種功能，在成年人機體中，其來自于骨髓中的祖細胞，祖細胞中DNA序列的突變會引發血細胞發育的改變，有時候會導致癌癥發生；由于技術限制，科學家們在闡明祖細胞突變對血細胞發育的影響上面對一定的挑戰，近日，研究者Nam等人在Nature雜志上發表文章指出，他們開發了一種新方法能夠
通過這根在西伯利亞Ust’-Ishim地區發現的距今4.5萬年的股骨，研究人員對人類最古老的基因進行了測序。圖片來源：ALEXANDER MAKLAKOV 當Kelly Harkins的博士研究——古結核病在2012年陷入僵局之后，她開始向更廣泛的學界尋求幫助。
細胞是生物學的基本單位，近年來研究人員正努力地嘗試將它們進行單個分離、研究和比較。而應用而生的就是單細胞測序技術，該技術是指DNA研究中涉及測序單細胞微生物相對簡單的基因組，更大更復雜的人類細胞基因組。而隨著測序成本的大幅度下降，破譯來自單細胞的30億堿基的基因組并對逐個細胞進行序列比較已經開始
微陣列技術在單個實驗中能同時分析數千個參數。捕獲分子微點在固體支持物上固定成行列并暴露在含相應結合分子的樣品中。基于熒光、化學發光、質譜、放射性或電化學的讀出系統能檢測每個微點形成的復合物。這些微小化和平行的結合分析高度靈敏，方法的分析能力又能被微陣列基因表達分析所放大。在這些系統中，檢測固定的DN
如同在房地產中一樣，在生物學中位置也很重要。活化基因的mRNAs戰略性定位在整個活體組織中，它們的位置往往幫助調控了細胞和組織的生長及發育方式。然而為了同時分析許多的mRNAs，科學學家們不得不將細胞碾磨成漿，這使得他們沒有好的辦法精確確定這些mRNAs在細胞內的定位。 現在，哈佛大學Wy
(1) 定性PCR法定性PCR可直接檢測啟動子、終止子、標記基因片斷、目的基因片斷。為使目的基因很好的進行表達，在構建基因表達載體時常在目的基因的5’和3’端分別加上啟動子和終止子。當前大約75%的轉基因植物中使用Ca MV( Cauliflower mosaicvirus) 3 5 S啟動
摘要：本文論述了轉基因農產品、食品的安全性問題以及對轉基因食品從基因、基因轉錄、基因翻譯表達三個層面的檢測技術做了概述。 關鍵詞：轉基因食品 轉基因農產品 食品安全 生物技術 檢測技術 Abstract: discuss on the question Gen
21世紀之所以能成為生物學的世紀，這是因為隨著百姓生活水平的提高，溫飽問題早已解決，并催生了“大健康產業”成為永不落幕的朝陽產業。2012年全世界共新增1400萬癌癥病例并有820萬人死亡，癌癥已經成為世界性難題。由于基因突變導致腫瘤形成，人以群分，腫瘤以基因突變分，二代測序為繪制腫瘤基因突變譜
一、基因檢測公司梳理 目前全國涉及基因檢測概念的公司有200余家，按照業務范圍劃分，這些公司可以分為：①最上游的基因檢測儀器開發企業（測序儀、芯片掃描儀、PCR設備），②提供樣本處理試劑和耗材的中上游企業（建庫試劑盒、檢測試劑盒、工具酶、基因芯片），③提供第三方基因檢測服務的中游企業
美國于2015年年初提出的“精確醫學”計劃倍受世界各國關注。有消息稱，我國的相關計劃將在今年下半年或明年啟動。對此，中科院上海生命科學研究院吳家睿研究員近期撰文指出，“精確醫學”是一個有著豐富內涵的復雜概念，需要人們認真地思考和小心地解讀。當前，亟需我們明晰的兩個問題是：為何要在此時啟動精確醫學
三、生物芯片技術研究應用點滴 人類基因組計劃推動了各種生物基因組測序工作的進展，越來越多的生物全基因組序列被測定并公布，可是這才是解讀“天書”的開始。掌握了基因組序列，卻不知道基因序列背后所隱藏的秘密——即基因組的功能，就不能真正理解“天書”更
（2） 苯丙酮尿癥 苯丙酮尿癥（PKU）的病因是患者肝細胞缺乏苯丙氨酸羥化酶，使體內的苯丙氨酸不能正常代謝為酪氨酸，導致血清中苯丙酮酸濃度升高。現已知苯丙氨酸羥化酶基因定位于12q24.1，此基因全長約90kb，含13個外顯子，在中國人中已發現10余種點突變，這是造成酶活性缺乏的原因。 2．
新一代測序 新一代測序(NGS)技術一路走來，逐漸褪下其神秘面紗，進入越來越多的實驗室。隨著時間的推移，NGS系統從“高端大氣上檔次”的大型平臺演化成滿足個性化需求的臺式測序儀。MiSeq、Ion Torrent和454 GS Junior這些儀器的上市，也推動了測序平臺的普及。同
數字PCR作為第三代PCR技術，它是將分子生物學與現代微機電、微納制造等工程技術相結合的典范。數字PCR以聚合酶鏈式反應的理論和技術體系為基礎，結合現代微機電和光學檢測技術，實現單分子水平的核酸精確定量檢測。數字PCR的核心思想是將核酸樣品平行劃分為大規模單分子水平的微反應單元，然后對眾
1946年世界上第一臺電子數字計算機ENIAC在美國Pennsylvania大學問。在隨后的50年里，以美國的硅谷為搖籃，計算機技術不斷飛速發展，給我們的生活帶來了巨大的變革。無獨有偶，1991年又是在美國硅谷，Affymax公司開始了生物芯片的研制，他們將芯片光刻技術與光化學合成技術相結合制作了寡
近日，牡蠣基因組計劃（Oyster Genome Project，OGP）項目組宣布，歷時兩年的牡蠣基因組序列圖譜終于繪制完成。這是世界上第一張養殖貝類的全基因組序列圖譜，標志著基于短序列的高雜合度基因組拼接和組裝技術獲得了重大突破。據悉，目前的基因組圖譜已達到國際領先的基因組圖
基因表達譜 的發展有助于科研工作人員進一步的理論知識充實及應用到研發等領域中。基因芯片是最近幾年發展起來的基因表達重要工具，本文主要對這種技術的數據分析和管理方法作具體介紹。一、引言DNA微陣列(DNA microarray),也叫基因芯片，是近幾年發展起來的一種能快速、高效檢測DNA片段序列、基因
于軍，紐約大學醫學院生物醫學科學博士，師從臺灣中研院院士孫同天教授；博士后研究追隨美國“人類基因組計劃”的領導者和設計者之一，著名基因組學家、美國科學院院士Maynard V.Olson。 1993年，于軍參與“
大規模基因組測序計劃的實施已改變生命科學的重心，在相當短的時期內，一些原核生物和某些低等真核生物的基因組序列已被測定. 1995年，流感嗜血桿菌基因組序列首次被破譯，在此后不到兩年的時間，近50個細菌的基因組序列已被完成. 然而，這僅僅是理解有機物功能的一個起點. 在基因組時代，許多DNA序列信