免疫球蛋白提取技術（一）
免疫球蛋白（Immunoglobulin Ig）的含量代表著機體體液免疫的水平，并進一步代表著B細胞的功能，因此測定血清Ig含量可以推知機體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。隨著免疫學的發展和需要，免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多，有單一法，但大多數采用二步法以上相結合的方法，特別是以硫酸銨提純為基礎，再經過層析柱的方法來提高免疫球蛋白及其各成分的純度最為常用。硫酸銨溶液能使蛋白質膠體脫水并中和其電荷而使之沉淀下來（稱為鹽析）。不同濃度的硫酸銨鹽析蛋白成分不同，利用這一原理提取所需的免疫球蛋白成分。鹽析只能粗提，為了獲得純化的免疫球蛋白成分，必須進一步采用層析的方法進行分離。免疫球蛋白包括IgG、IgM、IgA、IgE和IgD。一、IgG的分離與提純1、材料與試劑配制（1）動物血清（2）硫酸銨飽和溶液硫酸銨800g~850gH2O 1000ml加熱至絕大部分溶質溶解為止，趁熱過濾......閱讀全文
免疫球蛋白提取技術
實驗材料 動物血清初乳膽汁試劑、試劑盒 硫酸銨NH4OHPBSNaH2PO4NaH2PO42H2OBaCl2HgIKIHClNaOHPBDEAE52葡聚糖凝膠G200無水硫酸鈉硼酸鹽緩沖液儀器、耗材 離心機透析袋低溫冰箱電泳槽電泳儀
免疫球蛋白提取技術
免疫球蛋白提取技術 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 隨著免疫學的發展和需要，免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多，有單一法，但大多數采用二步法以上相
免疫球蛋白提取技術
免疫球蛋白提取技術可應用于：（1）推知機體的體液免疫功能；（2）診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。實驗方法原理隨著免疫學的發展和需要，免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多，有單一法，但大多數采用二步法以上相結合的方法，特別是以硫酸銨提純為基礎，再經過層析柱的方法來提高免
免疫球蛋白提取技術（二）
（12）IgG的純度鑒定，可采用下列方法之一鑒定。①玻片瓊脂或醋酸纖維膜電泳均可加樣電泳后，只在γ—球蛋白的遷移部位出現一條帶。操作時，同時可用全血清樣品，不同濃度（NH4）2SO4鹽析樣品進行電泳，以資比較。②瓊脂雙相雙擴散鑒定預先準備該IgG免疫異種動物所獲的抗IgG血清。將IgG與抗IgG血清
免疫球蛋白提取技術（一）
免疫球蛋白（Immunoglobulin Ig）的含量代表著機體體液免疫的水平，并進一步代表著B細胞的功能，因此測定血清Ig含量可以推知機體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。隨著免疫學的發展和需要，免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多，有單一法，但大多數
免疫球蛋白提取技術（一）
免疫球蛋白（Immunoglobulin Ig）的含量代表著機體體液免疫的水平，并進一步代表著B細胞的功能，因此測定血清Ig含量可以推知機體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。隨著免疫學的發展和需要，免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多，有單一法，但大多數
免疫球蛋白提取技術（三）
二、IgM的分離與提純1、材料（1）血清（2）葡聚糖凝膠G200（3）洗脫液0.01Mol/L pH7.4PBS（0.14Mol/L NaCl或0.1Mol/L pH8.0 Tris－HCl 0.14Mol/L NaCl）2、操作方法選取2.50cm×90cm層析柱，用葡聚糖凝膠G200裝柱，平衡后
免疫球蛋白提取技術（二）
4、禽血清IgG的分離與提純（Na2SO4法）（1）試劑①5%葡聚糖硫酸鹽②0.02Mol/L MnCl2溶液③無水硫酸鈉④pH8.2硼酸鹽緩沖液⑤0.06Mol/L pH7.4PB液（2）操作方法①取禽血清10ml加5%葡聚糖硫酸鹽液，0.40ml和0.025Mol/L MnCl21.00ml充分
免疫球蛋白IgG的提取-1
一、目的及要求了解和掌握免疫球蛋白的提取方法。 二、概 念 抗體是在抗原物質刺激下，人或脊椎動物免疫系統的漿細胞產生的，能與抗原發生特異性反應的免疫球蛋白，主要存在于人和動物的血清及其體液中。 三、免疫血清的制備 （一）動物的選擇 實驗室常用的動物是家兔和羊，有時也用豚鼠或雞，大
免疫球蛋白IgG的提取-2
（五）免疫的具體方法1、直接法免疫血清的制備取體重2～3Kg的雄雞1只，免疫前采血8～10mL，測其正常抗體。靜脈注射新城疫弱毒新鮮尿囊液病毒2mL，同時腹腔注射8mL，2～4d后同法再免疫一次。第二次免疫后七天試血，血清凝集價在1︰320以上為合格即可全采血；如果不合格，可在第二次免疫后10d左右