免疫球蛋白提取技術(一)
免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表著機體體液免疫的水平,并進一步代表著B細胞的功能,因此測定血清Ig含量可以推知機體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。隨著免疫學的發展和需要,免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多,有單一法,但大多數采用二步法以上相結合的方法,特別是以硫酸銨提純為基礎,再經過層析柱的方法來提高免疫球蛋白及其各成分的純度最為常用。硫酸銨溶液能使蛋白質膠體脫水并中和其電荷而使之沉淀下來(稱為鹽析)。不同濃度的硫酸銨鹽析蛋白成分不同,利用這一原理提取所需的免疫球蛋白成分。鹽析只能粗提,為了獲得純化的免疫球蛋白成分,必須進一步采用層析的方法進行分離。免疫球蛋白包括IgG、IgM、IgA、IgE和IgD。一、IgG的分離與提純1、材料與試劑配制(1)動物血清(2)硫酸銨飽和溶液硫酸銨800g~850gH2O 1000ml加熱至絕大部分溶質溶解為止,趁熱過濾......閱讀全文
免疫球蛋白純化技術——鹽析法純化免疫球蛋白
在大多數情況下,免疫血清、雜交瘤細胞培養上清以及腹水中的抗體需經純化后再用于各種免疫學檢測中去。免疫球蛋白常用的純化方法有鹽析法、凝膠過濾、離子交換層析、親和層析以及高效液相色譜等方法。(來源:醫學基礎免疫學實驗指導,主編金伯泉李恩善,第1 版,北京:世界圖書出版社,1990)實驗方法原理蛋白質在水
免疫球蛋白分類
免疫球蛋白可分為五類,即免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE),IgG,IgA和IgM還有亞類。 IgG,IgD,IgE均為單體,分泌液中IgA(SIgA)是雙體,IgM是五聚體。
免疫球蛋白A單體-和免疫球蛋白A雙體的區分
IgA存在于兩種同種型IgA1和IgA2中。它們都是高度糖基化的蛋白質。雖然IgA1在血清中占優勢(~80%),但IgA2在分泌物中的含量高于血清(在分泌物中約為35%); IgA1和IgA2分泌細胞的比例在人體不同的淋巴組織中有所不同:IgA1是血清中發現的主要IgA亞類。大多數淋巴組織具有產生I
免疫球蛋白檢測項目介紹血清免疫球蛋白E(IgE)
血清免疫球蛋白E(IgE)介紹:?IgE是一種分泌型免疫球蛋白,分子量為196,000,由兩條輕鏈和兩條重鏈組成。它是由鼻咽、扁桃體、支氣管、胃腸粘膜等處固有層的漿細胞產生,是引起I型變態反應的主要抗體,最明顯的基本生物學特性是親同種細胞性,人的IgE只能使人及猴的細胞致敏,而不能使其他動物過敏。I
免疫球蛋白檢測項目介紹血清免疫球蛋白M(IgM)
血清免疫球蛋白M(IgM)介紹:?IgM占血清免疫球蛋白總量的6%,主要存在血管內,是機體受抗原刺激后最先產生的抗體,起“先鋒免疫”作用,具有很強的細胞毒活性和細胞溶解活性,由于IgM主要存在在血管內,是抗血管內感染的第一線抗體,對防止敗血癥的發生有重要作用。 ?臨床上,IgM常用ELISA測定。E
免疫球蛋白檢測項目介紹血清免疫球蛋白G(IgG)
血清免疫球蛋白G(IgG)介紹:?免疫球蛋白G(IgG)是在脾臟和淋巴結中合成,在人體血清中的含量最高(占Ig量的75%),而且在血清中半衰期長,主要分布在血清和組織液中,是抗細菌、抗毒素和抗病毒抗體的主要組成部分,也是機體抗感染免疫的過程中的重要物質基礎。由于IgG的含量最高,是人體免疫反應的最重
免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白D(IgD)-的純化
基 本 方 案 1 用透析和凝膠過濾層析法純化 IgM此 法 純 化 的 IgM 可達到較好純度,可用于酶解、異 硫 氰 酸 鹽 熒 光 素(FITC) 標記 、生物素標記或放射性標記。材 料(帶 V 項 目 見 附 錄 1)腹 水 或 單 克 隆 抗 體(MAb) 上 清(單 元 1.4)PBSS
RNA提取心得(組織RNA提取和培養細胞的RNA提取)
一.組織RNA提取 1.最好新鮮組織,這樣RNA提取的效果比較好,這是肯定的。 2. 如果不是新鮮的(最好在半年之內,-80℃或者液氮中凍存的)組織,注意不要反復凍融,從冰凍狀態拿到0-4℃,注意不要拿到常溫,待組織解凍后,用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織,稱重后,放到預冷的勻漿器中,然后
總RNA的提取(Trizol法提取)
在收集到生物材料之后,最好能即刻進行RNA制備工作。若需暫時儲存,則應以液氮將生物材料急速冷凍后,儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA時,將儲存于冷凍柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破細胞,不可以先行解凍,以避免RNase的作用。1.????? 提取組織RNA時,每50~100mg組織用1ml
免疫球蛋白是什么?
免疫球蛋白(Ig)是B細胞經抗原刺激后增殖分化為漿細胞后產生的、存在于血液和體液中能與相應抗原特異性結合、執行體液免疫功能的一組球蛋白。免疫球蛋白可分為分泌型(sIg)及膜型(mIg),前者主要存在于體液中,具有抗體的各種功能,后者作為抗原受體表達于B細胞表面,稱為膜表面免疫球蛋白。 抗體是機
免疫球蛋白的概述
免疫球蛋白指具有抗體活性、或化學結構與抗體相似的球蛋白。
免疫球蛋白的結構
1.輕鏈和重鏈 Ig基本結構:兩對四條肽鏈通過鏈間二硫鍵連接形成Ig的單體結構。兩條相同的長鏈稱為重鏈,即H鏈;另兩條相同的短鏈稱為輕鏈,即L鏈。 兩條重鏈間,輕鏈與重鏈間以二硫鍵相連,整個Ig分子呈“子呈字型。結構域由鏈內二硫鍵所連接的兩個β片層所組成。 2.可變區和恒定區 (1)可變
免疫球蛋白的功能
人體血清免疫球蛋白IgG是初級免疫應答中最持久、最重要的抗體,它僅以單體形式存在。大多是抗菌性、抗毒性和抗病毒抗體屬于IgG,它在抗感染中起到主力軍作用,它能夠促進單核巨噬細胞的吞噬作用(調理作用),中和細菌毒素的毒性(中和毒素)和病毒抗原結合使病毒失去感染宿主細胞的能力(中和病毒)。IgG 在
免疫球蛋白M簡介
B淋巴細胞在抗原刺激下轉化為漿細胞,產生能與相應抗原發生特異性結合的抗體,稱為免疫球蛋白。免疫球蛋白分布于人的血液、體液及外分泌液中,根據其重鏈的抗原性不同,可分為免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE)五類。 免疫
免疫球蛋白A的簡介
免疫球蛋白A(簡稱為IgA)。IgA分兩種類型:即血清型IgA和分泌型IgA。血清型IgA存在于血清中,血清IgA具有某些IgG和IgM的免疫功能,特異性IgA能中和血液中的抗原,同時也出現替代性補體免疫系統。分泌型IgA存在于分泌液中,例如:唾液、淚液以及乳汁當中,均含有IgA抗體。分泌型Ig
免疫球蛋白A的作用
IgA具有抗菌、抗毒、抗病毒作用,對支原體和某些真菌可能也有作用。 血清型免疫球蛋白A的作用 血清IgA具有多種抗體活性,如同種血凝素,抗胰島素,抗布氏菌,抗白喉毒素,抗脊髓灰質炎病毒抗體等。有人認為IgA與組織抗原或蛋白抗原具有特殊結合力,從而可消除進入循環中的此類抗原,防止這些抗原誘導的
免疫球蛋白A的簡介
免疫球蛋白A(簡稱為IgA)。IgA分兩種類型:即血清型IgA和分泌型IgA。血清型IgA存在于血清中,血清IgA具有某些IgG和IgM的免疫功能,特異性IgA能中和血液中的抗原,同時也出現替代性補體免疫系統。分泌型IgA存在于分泌液中,例如:唾液、淚液以及乳汁當中,均含有IgA抗體。分泌型Ig
免疫球蛋白A的簡介
免疫球蛋白A(簡稱為IgA)。IgA分兩種類型:即血清型IgA和分泌型IgA。血清型IgA存在于血清中,血清IgA具有某些IgG和IgM的免疫功能,特異性IgA能中和血液中的抗原,同時也出現替代性補體免疫系統。分泌型IgA存在于分泌液中,例如:唾液、淚液以及乳汁當中,均含有IgA抗體。分泌型Ig
免疫球蛋白A的作用
IgA具有抗菌、抗毒、抗病毒作用,對支原體和某些真菌可能也有作用。 血清型免疫球蛋白A的作用 血清IgA具有多種抗體活性,如同種血凝素,抗胰島素,抗布氏菌,抗白喉毒素,抗脊髓灰質炎病毒抗體等。有人認為IgA與組織抗原或蛋白抗原具有特殊結合力,從而可消除進入循環中的此類抗原,防止這些抗原誘導的
免疫球蛋白分子介紹
抗體分子(antibody,Ab)是由漿細胞合成和分泌的,而每一種漿細胞克隆可以產生一種特異的抗體分子,所以血清中的抗體是多種抗體分子的混合物,它們的化學結構是不均一的,而且含量很少,不易純化,是抗體分子結構分析的困難。多發性骨髓瘤是由漿細胞無限增殖形成的細胞克隆,由于所有瘤細胞的遺傳特性相同,因此
免疫球蛋白A的作用
IgA具有抗菌、抗毒、抗病毒作用,對支原體和某些真菌可能也有作用。 血清型免疫球蛋白A的作用 血清IgA具有多種抗體活性,如同種血凝素,抗胰島素,抗布氏菌,抗白喉毒素,抗脊髓灰質炎病毒抗體等。有人認為IgA與組織抗原或蛋白抗原具有特殊結合力,從而可消除進入循環中的此類抗原,防止這些抗原誘導的
免疫球蛋白的介紹
免疫球蛋白(Ig)指具有抗體(Ab)活性或化學結構,與抗體分子相似的球蛋白。免疫球蛋白是由兩條相同的輕鏈和兩條相同的重鏈通過鏈間二硫鍵連接而成的四肽鏈結構。免疫球蛋白分為五類,即免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE)
什么是免疫球蛋白?
具有抗體活性或化學結構與抗體相似的球蛋白統稱為免疫球蛋白(Ig)。
免疫球蛋白的功能
免疫球蛋白可分為抗體和膜免疫球蛋白。抗體主要存在于血清中,也可見于其他體液和外分泌液,其主要功能是特異性地結合抗原。膜免疫球蛋白是B細胞膜上的抗原受體,能特異性識別抗原分子。在體內,抗體和抗原結合后可直接發揮效應,如抗毒素可中和外毒素,病毒的中和抗體可阻止病毒感染靶細胞,分泌型IgA可抑制細菌黏附宿
免疫球蛋白A的作用
IgA具有抗菌、抗毒、抗病毒作用,對支原體和某些真菌可能也有作用。血清型免疫球蛋白A的作用血清IgA具有多種抗體活性,如同種血凝素,抗胰島素,抗布氏菌,抗白喉毒素,抗脊髓灰質炎病毒抗體等。有人認為IgA與組織抗原或蛋白抗原具有特殊結合力,從而可消除進入循環中的此類抗原,防止這些抗原誘導的炎癥或自身免
免疫球蛋白定量測定
免疫球蛋白定量測定較常用的方法有單向擴散法與免疫濁度法,前者較為簡便,后者更為準確迅速。惡性單克隆丙種球蛋白病常呈現某一類丙種球蛋白的顯著增高,大多在30mg/ml以上;而正常的免疫球蛋白,包括與M蛋白同類的丙種球蛋白的含量則顯著降低。在良性丙種球蛋白病的血清標本中,M蛋白的升高幅度一般不象惡性丙
免疫球蛋白純化技術
鹽析法純化免疫球蛋白 DEAE-Sephadex A-50柱層析純化免疫球蛋白 Sepharose CL-4B親和柱層析純化IgG及IgG亞類 高效液相色譜純化小鼠腹水中單克隆抗體 單克隆抗體親和層析柱純化重組人α2a干擾素(rHuIFN-
概述免疫球蛋白M
B淋巴細胞在抗原刺激下轉化為漿細胞,產生能與相應抗原發生特異性結合的抗體,稱為免疫球蛋白。免疫球蛋白分布于人的血液、體液及外分泌液中,根據其重鏈的抗原性不同,可分為免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE)五類。 免疫
免疫球蛋白A主要作用
IgA 分血清型和分泌型兩種,血清型IgA可介導調理吞噬ADCC 作用;分泌型IgA(SIgA)是機體粘膜防御系統的主要成分,覆蓋在鼻、咽、氣管、腸和膀胱粘膜的表面,它能抑制微生物在呼吸道上皮附著,減緩病毒繁殖,是粘膜重要屏障,對某些病毒、細菌和—般抗原具有抗體活性,是防止病原體入侵機體的*道防線。
免疫球蛋白怎么測定?
1、有單向瓊脂擴散法、速率散射比濁法等。臨床上Ig降低:見于各種先天性或獲得性免疫缺陷病。繼發性常與免疫抑制劑應用、射線、蛋白質丟失、營養不良等有關。也可見于細胞毒藥物治療后。臨床上Ig升高:多克隆性增高見于各種慢性感染、慢性肝病、某些自身免疫病等;也見于寄生蟲疾病、結節病等。單克隆性增高又稱M蛋白