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  • 基礎知識:福爾馬林固定石蠟包埋組織DNA提取

    本篇文章是關于一個我們很少被問問題的題目,因為太簡單,方法很常規結果也很少出錯。我想說的是:福爾馬林固定石蠟包埋組織的DNA提取。什么是FFPE組織?FFPE指的是為維持細胞核蛋白結構,先用福爾馬林固定然后固體石蠟包埋,以便使用超薄切片機切成5-10微米厚的薄片的組織樣品(通常是疑似腫瘤組織)。福爾馬林與蛋白氨基發生了不可逆交聯,保護細胞結構完整性,染色顯示組織中腫瘤帶來的畸形結構。但是,固定劑的交聯作用對核酸來說是有害的。福爾馬林石蠟和交聯作用還妨礙了核酸的提取,抑制脫氧核糖核酸聚合酶、PCR擴增,都必須去除。從這些樣品中獲取DNA的前景看似很暗淡。幸運的是,我們已經客服了這兩種主要障礙,從FFPE組織中獲得高質量DNA不再困難。石蠟如何去除?傳統去除石蠟的方法通常是使用二甲苯,一種高度易燃的有機溶劑。組織切片用二甲苯反復沖洗數次溶解石蠟,然后在DNA提取前再用乙醇反復沖洗去除殘余二甲苯。如此反復多次的沖洗步驟,每次都會有少量......閱讀全文

    關于福爾馬林的毒性介紹

      福爾馬林能與蛋白質中NH2基結合生成甲酰化蛋白,其反應速度受pH值和溫度的顯著影響。氣態甲醛強烈刺激黏膜,甲醛水溶液可使蛋白質變性,被廣泛用于殺菌劑。對動物實驗中,大鼠經口LD50為800mg/kg,豚鼠為240mg/kg。對人體,在低濃度下最初刺激眼黏膜,濃度稍高時刺激上呼吸道,引起咳嗽、胸悶

    關于福爾馬林的基本介紹

      福爾馬林(formalin;福美林)是甲醛〈formaldehyde〉(HCHO)的水溶液,外觀無色透明,具有腐蝕性,且因內含的甲醛揮發性很強,開瓶后一下子就會散發出強烈的刺鼻味道。  甲醛是碳、氫和氧的化合物,在平常的情況下是氣體狀態,帶有強烈刺激眼膜和呼吸器官的特性。  福爾馬林的甲醛含量為

    關于福爾馬林的醫用信息介紹

      福爾馬林本身是有刺激性氣味的無色液體,主要成分是甲醛,一種易溶于水的高刺激性有毒氣體,具有易燃性及腐蝕性,在空氣里一般能測出微量。在甲醛制造方面通常利用氧化甲醇的化工方法制得。甲醇氧化之后可得甲醛,而甲醛繼續氧化之后可得甲酸。三者皆為毒性物質,在劑量相同的情形下,以對人體的毒性而言,毒性比為甲醇

    關于福爾馬林的藥物分析介紹

      方法名稱:福爾馬林溶液—甲醛的測定—中和滴定法。  應用范圍:本方法采用滴定法測定甲醛溶液中甲醛的含量。  本方法適用于甲醛溶液。  方法原理:供試品置錐形瓶中,加水、過氧化氫試液及溴代麝香草酚藍指示液,滴加氫氧化鈉滴定液至溶液顯藍色,再精密加氫氧化鈉滴定液,瓶口置一玻璃小漏斗,置水浴上加熱,不

    關于福爾馬林的醫學用途介紹

      福爾馬林的使用涵蓋之層面其實相當廣泛,其中因甲醛能與蛋白質的氨基結合,使蛋白質凝固,因此在醫藥上可做為檢驗時的組織固定劑、以及防腐劑等。在濃度與劑量足夠時,此特性對大部分微生物都具破壞能力,所以也常做為一種消毒劑。而福爾馬林在工業上的使用,性質也相當多,例如運用于制作黏著劑、染劑、涂料等,所衍生

    福爾馬林:保存標本-幫助DNA和RNA的提取

      在歷史上人們使用了各種固定液(各種濃度的乙醇和福爾馬林,目前公認的固定液是10%的中性福爾馬林溶液)。馬爾福林基本的固定能力是通過蛋白質交聯,從而使固定物質更加牢固。福爾馬林還可以作為適合基因組研究的培養基,比如DNA和RNA的提取研究。  DNA和RNA的恢復,對于許多科學領域和醫學專業都非常

    從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織中提取RNA

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 R N A 消化液 β-巰基乙醇 蛋白酶 K(20 mg ml) 水平衡苯酚 氯仿 糖原 TE

    從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織中提取RNA

    試劑、試劑盒 R N A 消化液 β-巰基乙醇 蛋白酶 K(20 mg ml) 水平衡苯酚 氯仿 糖原 TE 緩沖液異丙醇無水乙醇乙醇 DEPC 水實驗步驟 一 材料與設備1)RNA 消化液:每 100ml 包含 40ml 4mol/L 硫氰酸胍,3mllmol/L Tris-HC(PH7.6),2

    基礎知識:福爾馬林固定石蠟包埋組織DNA提取

    本篇文章是關于一個我們很少被問問題的題目,因為太簡單,方法很常規結果也很少出錯。我想說的是:福爾馬林固定石蠟包埋組織的DNA提取。什么是FFPE組織?FFPE指的是為維持細胞核蛋白結構,先用福爾馬林固定然后固體石蠟包埋,以便使用超薄切片機切成5-10微米厚的薄片的組織樣品(通常是疑似腫瘤組織)。福爾

    海參造假花樣翻新-增重加鹽糖保鮮用福爾馬林

      又是一年中秋節,海參迎來銷售旺季。但記者近日采訪發現,一些無良商販對海參造假手法花樣翻新,不僅破壞了海參的營養功效,還會對人體健康產生危害。業內人士透露,經過“特殊處理”的海參“還不如雞蛋有營養”。  海參造假花樣翻新  近年來,海參產量在不斷增加。然而市場的無序競爭,帶來了諸多亂

    2.1.8-從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織中提取RNA

    從病理科取來的經福爾馬林固定、石蠟包埋的組織可用于RNA 表達分析.常規固定和石蠟包埋后,從活組織、手術、尸體組織中分離出來的 RNA 并不完全降解.并且即使在切除后未立即固定,富含 RNase 的器宮如胰腺內仍存在大約 100 個堿基或更長的 RNA碎片。下面介紹一種從 6?8 um 組織切片中提

    商戶曝干海貨黑幕:用福爾馬林泡蝦仁提升賣相

    昨天,快報記者分別將蝦仁,生、熟蹄筋浸泡在甲醛溶液中做實驗  近日有消息稱,青島南山市場30多家商戶自曝干海貨、水產品等多個行業黑幕,特地向市民展示了硫磺熏過的蓮子、福爾馬林(甲醛的水溶液)泡過的蝦仁、甲醛泡過的墨魚、藥水浸過的蹄筋等行內“毒物”,并進行了“真假對比”,

    成都黑作坊牛血制“鴨血”-泡福爾馬林裝嫩

    作坊內還待加工的血旺  部分血旺被檢測出含有甲醛,新都當地相關部門已對該作坊進行查處   “有人用牛血旺冒充豬血和鴨血,還往里面添加福爾馬林。”11月28日,華西都市報接到張欣(化名)發來的一條短信,她說自己曾在新都區一家加工血旺的手工作坊工作近1年,親眼目睹了該作坊生產問題血旺的全過程。   

    韓每日乳業牛奶檢出福爾馬林-多款奶粉中國有售

      韓國第三大奶制品生產商――每日乳業的牛奶中日前被檢測出含有福爾馬林,原因是其使用了受污染的進口飼料。記者了解到,每日乳業有多款乳制品在中國有售,其中國總代理方面昨天表示,進口到中國的奶粉其奶源地并非韓國。  據了解,每日乳業的牛奶中被檢測出含有福爾馬林,原因是其使用了受

    AAF固定液(酒精醋酸福爾馬林混合固定液)使用說明

    AAF固定液說明關鍵詞:固定液,緩沖液,生化溶液,喬羽生物試劑簡介:?固定的目的在于保存細胞和組織的原有形態結構,固定劑能阻止內源性溶酶體酶對自身組織和細胞的自溶、抑制細菌和霉菌的生長。固定劑通過凝固、生成添加化合物等使蛋白質內部結構發生改變,從而使酶失活。固定劑對細胞核細胞外成分發生物理改變。未

    蔬菜與甲醛“親密接觸”后會如何?

       有關菜籃子的新聞莫過于甲醛白菜、甲醛蓮藕、甲醛山藥了。為此,實驗室將甲醛(福爾馬林溶液)噴灑在蔬菜上,還原被甲醛污染過的蔬菜,并教您如何鑒別新鮮蔬菜,為您以后在選購蔬菜時提個醒。   甲醛小知識   在做實驗之前,記者惡補化學知識并咨詢化學教師,了解到甲醛是一種無色的刺激性氣體,易溶于水、醇和

    組織樣品穩定劑在室溫安全保存生物樣品中RNA、DNA和蛋...

    組織樣品穩定劑在室溫安全保存生物樣品中RNA、DNA和蛋白質的應用還在使用福爾馬林【主要成分是甲醛;濃度35%或37%以上的甲醛水溶液】?福爾馬林作保存液,效果好、價格低,廣泛地使用;可惜缺點是福爾馬林不適宜在冰箱中冷藏,否則容易發生凝聚;保存易形成多聚甲醛使浸液變濁,影響觀察;實驗室每年要更換一次

    混合型固定液的類型及功能特點

    混合原則:a、優缺點互補;b、膨脹與收縮相互平衡;c、強氧化劑與還原劑應分別配置。1、酒精-福爾馬林液70% 酒精 100 ml福爾馬林 2 -10 ml固定植物一般組織,尤其用在柱頭中的萌發花粉管的固定。固定后的材料,立即用作觀察。通常固定24小時,可長久保存。特點:不易收縮,常用于固定花粉管。2

    混合型固定液的種類介紹

    混合原則:a、優缺點互補;b、膨脹與收縮相互平衡;c、強氧化劑與還原劑應分別配置。1、酒精-福爾馬林液70% 酒精 100 ml福爾馬林 2 -10 ml固定植物一般組織,尤其用在柱頭中的萌發花粉管的固定。固定后的材料,立即用作觀察。通常固定24小時,可長久保存。特點:不易收縮,常用于固定花粉管。2

    小型兩棲類動物的標本制作

    實驗概要本實驗以蛙類為例,說明了標本制作過程。主要試劑1. 福爾馬林液:用于固定和保存標本。2. 0.5~0.8%氫氧化鈉溶液:用于腐蝕標本上的殘存肌肉。3. 汽油:用于脫掉標本上的脂肪。4. 3%過氧化氫:用于漂白標本。主要設備1. 解剖盤、標本瓶、注射器:用于盛放標本和向標本注射固定液。2. 解

    寄生蟲標本的固定與保存

    蠕蟲成蟲的固定與保存1、線蟲生理鹽水洗凈蟲體粘附的污物,然后用加熱至70~80℃的70%酒精或巴氏液(甲醛3份、生理鹽水97份)固定,冷卻后移至新的70%酒精或巴氏液中保存。小型線蟲(旋毛蟲、蟯蟲、鉤蟲等)宜用甘油酒精(70%酒精95ml、甘油5ml)加熱固定,保存于80%酒精中。也可用冰醋酸固定約

    Bouin氏固定液的配制方法

    Bouin氏固定液   苦味酸飽和水溶液 75ml  福爾馬林(40%甲醛) 25ml  冰醋酸 5ml  1g苦味酸可制成75ml飽和水溶液。  先將苦味酸溶解成水溶液,然后再加入福爾馬林和冰醋酸搖勻即成。  

    免疫細胞化學技術觀察細胞成分實驗

    實驗方法原理免疫細胞化學是在細胞化學技術的基礎上,吸收免疫學的理論和技術發展起來的一項技術,其基本原理是用熒光素或酶等標記物或顯色物標記特異性抗體,通過免疫學中的抗原抗體反應與細胞內的相應抗原結合,形成帶有熒光素或顯色物的抗原抗體復合物,因此可用熒光顯微鏡或普通光學顯微鏡觀察到復合物的存在,達到檢測

    免疫細胞化學技術觀察細胞成分實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 免疫細胞化學是在細胞化學技術的基礎上,吸收免疫學的理論和技術發展起來的一項技術,其基本原理是用熒光素或酶等標記物或顯色物標記特異性抗體,通過免疫學中的抗原抗體反應與細胞內的相應抗原結合,形成帶有熒光素或顯色物的抗原抗體復合物,因

    莢膜染色液的配制方法

    莢膜染色液   1.黑色素水溶液  黑色素 5g  蒸餾水 100ml  福爾馬林(40%甲醛) 0.5ml  將黑色素在蒸餾水中煮沸5分鐘,然后加入福爾馬林作防腐劑。  2.番紅染液  與革蘭氏染液中番紅復染液相同。

    攤販互相揭短工業火堿中泡制出有毒海參

    ??????? 海參是一種名貴海產品,體內含有50多種營養成分,但是,如果海參中摻雜了火堿、福爾馬林等對人體有毒的物質,又會是怎樣呢?   記者近日對沈陽海參市場進行了暗訪。   業內人士指出,按理來說,選購海參應選擇體大肉厚無泥沙、肉質又有彈性的,但如發現海參過分膨脹、肉質失去韌性、參刺脫

    線粒體及高爾基體永久標本的制作

    (一)顯示線粒體—Regand染色法1.取材固定:固定材料必須新鮮,所以要求殺死動物后立即取材,切成1—2mm3大小的塊,投入固定液中。固定液:3%重鉻酸鉀20ml福爾馬林(中性)5ml固定4天(可在冰箱中),每天換固定液一次。4天后轉入3%重鉻酸鉀中7天,每2天換一次液體。2.流水沖洗24小時后,

    光學顯微技術中使用的固定劑的配方介紹

    凝固型固定劑1、酒精(ethyl,alcohol)常用95%酒精及純酒精。酒精穿透力強,固定時間常在1小時以內。高濃度酒精有使材料收縮的作用。70%的酒精可作保存液。配制低度酒精必須要用普通酒精即95%的酒精,絕不可用純酒精。酒精為還原劑,不能與鉻酸、鋨酸、重鉻酸鉀等氧化劑配合。酒精可使核酸,蛋白質

    冷庫除霉有哪些常用方法?

       霉菌最愛在陰濕的地方生長,由于它能適應較低的溫度,所以在冷凍廠的高溫庫中為害最為嚴重。霉菌在冷庫內生長后,孢子到處飛揚,對于肉類、蛋品的質量影響很大,所以霉菌是冷庫內主要危害者。霉菌和致病菌不同,它本身是無害的,也不產生毒素,但是生了霉菌嚴重地損害了商品的外觀,并且促進了肉類、蛋品的霉爛變質。

    常規切片制備的注意事項(一)

    1 . 取材 取材的好壞,直接影響切片的質量。醫生在取材時,首先要有一把鋒利的取材刀,在切割組織時要避免取材刀來回拖拉,切取的組織塊厚薄要均勻,一般厚度以0.2 ~0.3cm為適,較容易發脆的組織如甲狀腺、肝臟、血塊、淋巴結、大塊癌組織等可適當厚一點,而脂肪組織、肺組織、纖維性腫瘤、平滑肌瘤等

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