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1、引物長度一般為15-30bp，常用的為18-27bp，但不能大于38bp；2、引物GC含量一般為40%-60%，以45-55%為宜，上下游引物GC含量和Tm值要保持接近；3、引物所對應的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之間，Tm值曲線以選取72度附近為佳，5'到 3’的下降形狀也有利于引物與模板的結合；4、引物之間：兩個引物之間不應有多于4個的互補或同源堿基，不然會形成引物二聚體，尤應避免3’端的互補重疊。......閱讀全文
1、引物長度一般為15-30bp，常用的為18-27bp，但不能大于38bp；2、引物GC含量一般為40%-60%，以45-55%為宜，上下游引物GC含量和Tm值要保持接近；3、引物所對應的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之間，Tm值曲線以選取72度附近為佳，5'到 3
一般就是設計引物能夠跨越至少一個exon-exon junction的，就是引物在兩個exon的交界處，這樣pcr的時候就不會有DNA污染現在NCBI可以直接有引物設計，還可以選擇上述的設計方式或者可以通過找到cDNA序列然后自己在primer3上設計也可以
一 設計引物應遵循以下原則1 、引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。2 、引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。3 、引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC最好隨機分布，避免5個以上
6. 更改ParameterCondition中默認的Normal至AT rich。默認顯示Normal說明我們所上傳VP1 gene的序列中GC含量位于40%-65%的正常范圍內。高于65%屬于GC rich；低于40%屬于AT rich。 7. 再次點擊Generate時平臺顯
IMSA，全稱為isothermal multiple-self-matching-initiated amplification，中文名為等溫多自配引發擴增。該技術的詳細介紹可見本公眾號歷史文章：“分子診斷萬花筒” 開篇——等溫多自配引發擴增技術簡介。在這里隆地熊為大家介紹一種如何利用LAMP引物
（3）找到該文檔，郵件選擇打開方式為記事本，可得引物信息。再次點擊文檔，另存為Up-LF或Down-LB.txt文件。這里的第16套引物，我們需要它的下游環引物即LB，故名為Down-LB。這樣命名的目的是為了防止混淆；??????（4）同樣打開LAMP引物設計平臺（http://primerexp
Primer Premier4.0是由加拿大的Premier公司開發的專業用于PCR或測序引物以及雜交探針的設計，評估的軟件，和Plasmid Premier2.02一起是該公司推出的最新的軟件產品。其主要界面同樣也是分為序列編輯窗口（Genetank），引物設計窗口（Primer Design），
Nucleotides:Stocks of nucleotides for PCR (or other procedure) are?NEARLY ALWAYS dNTPs (deoxynucleotides), and concentrations is almost always given i
自從1985年美國PE—Cetus公司的人類遺傳研究室 Mullis等發明了具有劃時代意義的聚合酶鏈反應(PCP0 以來，PCR已經成為了分子生物學領域最基本也是最重要的技術手段之-[ I。然而能否找到一對合適的核苷酸片段作為引物，使其有效地擴增模板DNA序列，無疑決定著PCR的成敗。現在動物遺傳育
PCR引物設計的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段，使其能有效地擴增模板DNA序列。因此，引物的優劣直接關系到PCR的特異性與成功與否。要設計引物首先要找到DNA序列的保守區。同時應預測將要擴增的片段單鏈是否形成二級結構。如這個區域單鏈能形成二級結構，就要避開它。如這一段不能形成二級結構，那就可以在