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實驗方法原理因為重組蛋白的表達受多角體啟動子的調節，而多角體啟動子在病毒裂解循環的晚期才被激活，所以重組蛋白在感染后期才表達。重組蛋白通常在感染后 15～24 h之間即可檢測到，并可積累至感染后 40 h 左右，然后積累水平下降。由于不同的蛋白質在昆蟲細胞中有不同的穩定性，推薦用這個系統測定蛋白質積累的時間效應。實驗材料野生型桿狀病毒草地夜蛾（Sf 9）細胞高滴度重組桿狀病毒儲液試劑、試劑盒PBS1 × SDS 樣品緩沖液10% 胎牛血清儀器、耗材TNM-FH昆蟲培養基60 mm 組織培養皿27℃ 培養箱（濕度可選）15 ml 聚丙烯離心管Beckman GPR 離心機沸水浴／100℃加熱板超聲儀實驗步驟1. 分別接種 3 × 105 細胞于 15 個盛有 3 ml 含 10% 胎牛血清的 TNM-FH 培養基的 60 mm 組織培養皿中。27℃ 溫育 1 h，使細胞貼壁。然后每次均以感染復數（MOI）為 10 的量，......閱讀全文
實驗方法原理 因為重組蛋白的表達受多角體啟動子的調節，而多角體啟動子在病毒裂解循環的晚期才被激活，所以重組蛋白在感染后期才表達。重組蛋白通常在感染后 15～24 h之間即可檢測到，并可積累至感染后 40 h 左右，然后積累水平下降。由于不同的蛋白質在昆蟲細胞中有不同的穩定性，推薦用這個系
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質
蛋白質（protein）是生命的物質基礎，沒有蛋白質就沒有生命。因此，它是與生命及與各種形式的生命活動緊密聯系在一起的物質。 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒 胎牛血清 儀器、耗材 培養瓶離心機 實驗步驟 1. ?分別接種3×106?Sf9細胞于1
實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒 胎牛血清 儀器、耗材 培養瓶離心機 實驗步驟 1. ?分別接種3×106 Sf9細胞于15個盛有5 ml 含10%胎牛血清的完全培養液60 mm血組織培養皿中。27℃溫育2 h，使細胞貼壁，然后每次均以感染復數（MOI）為
基本方案 小規模表達 輔助方案1 蛋白質生產高峰期的確定 輔助方案2重組蛋白的代謝標記 基本方案2 重組蛋白大規模生產 ? ? ? ? ? ?
實驗方法原理 分析方案依賴于表達蛋白的天然特性。 實驗材料 草地夜蛾（Sf9）細胞高滴度的重組桿狀病毒儲液 試劑、試劑盒 PBS1×SDS樣品緩沖液 儀器、耗材 含 10% 胎牛血清（FBS）的TNM-FH昆蟲培養基60 mm 組織培養皿27℃ 培養箱（濕度可選）15 ml 聚丙烯離心管
實驗方法原理 分析方案依賴于表達蛋白的天然特性。 實驗材料 草地夜蛾（Sf9）細胞高滴度的重組桿狀病毒儲液 試劑、試劑盒 PBS1×SDS樣品緩沖液 儀器、耗材 含 10% 胎牛血清（FBS）的TNM-FH昆蟲培養基60 mm 組織培養皿27℃ 培養箱
實驗材料 草地夜蛾細胞（Sf 9）高滴度重組病毒 儀器、耗材 無血清昆蟲細胞培養基1～10 L 旋轉培養瓶10.16 cm 管索張力器多旋轉瓶攬拌臺27℃ 培養箱供氣泵 實驗步驟 1. 在懸浮培養液中培養 Sf 9 細胞，并使之適應無血清培養液（基本方案 1
實驗方法原理 由于重組蛋白表達的時候，宿主蛋白質的合成基本終止，因此體內代謝標記是檢測重組蛋白的敏感方法。所有的標記氨基酸都摻入到晚期病毒特異的蛋白質（包括目的蛋白）的合成。35S 標記的甲硫氨酸和半胱氨酸是常用的放射標記的氨基酸。為了獲得更好的結果，在標記之前細胞內的這兩種氨基酸應當被
細菌表達系統有各種各樣的載體和宿主菌可供選擇，大部分工程菌的增殖時間短, 不僅便于快速評價實驗結果，而且降低了技術和設備無菌要求的嚴格性。經過簡單的調整, 許多在實驗室規模下具有的這些內在優點在大規模的自動生產過程中也具有 。 實驗步驟 一、使用大腸桿菌生產外源蛋白 有越來越多的