知識分享:維真穩轉株構建流程
穩轉株即穩定表達細胞株,指的是基于某一細胞系構建的持續過表達或干擾某特定基因的細胞系。慢病毒感染-藥物篩選法是目前廣泛應用的穩轉株構建方法,具有高效整合、目標細胞廣泛等特點。 一.準備及預實驗 確定細胞系相關信息,需包括如下內容 目標細胞系培養條件 目標細胞增殖速度 支原體污染情況 注:為避免慢病毒感染后細胞死亡,務必保證細胞無支原體污染! 預實驗確定MOI值 查閱文獻確定慢病毒在目標細胞系中的MOI; 參考查閱得到的數據,設計梯度實驗,摸索最適MOI。 預實驗確定篩選藥物用量: 查閱Puromycin/Blastincidin等在目標細胞系中穩轉株篩選的致死用量信息; 參考查閱得到的數據,確定3個藥物濃度梯度(如沒有相關信息,則需將藥物濃度梯度范圍增大,數量增多至6個); Day0將細胞鋪于6孔板中,使Day1細胞融合度約90%; Day1按(2)中設置的藥物梯度,加入藥物; Day4換液,并......閱讀全文
知識分享:維真腺病毒系統產品手冊
產品說明書 本產品僅限用于研究,嚴禁用于疾病診斷。 本產品僅供購買方內部研究使用,未經維真生物公司書面許可,嚴禁轉售。 產品有限責任擔保 維真生物公司保證您收到的產品符合產品目錄上的規格。本擔保規定了維真生物公司更換產品的責任。維真生物公司不提供其他任何形式的對于產品商業或健康用途的保證
知識分享:維真 Cre-loxP 重組系統腺相關病毒產品說明
一.Cre-loxP重組系統作用原理 Cre重組酶和loxP位點 Cre重組酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大腸桿菌噬菌體P1的Cre基因編碼,是由343個氨基酸組成的38kD的蛋白質。它不僅具有催化活性,而且與限制酶相似,能夠特異性識別loxP位點。
維真穩轉株構建流程
穩轉株即穩定表達細胞株,指的是基于某一細胞系構建的持續過表達或干擾某特定基因的細胞系。慢病毒感染-藥物篩選法是目前廣泛應用的穩轉株構建方法,具有高效整合、目標細胞廣泛等特點。 一.準備及預實驗 確定細胞系相關信息,需包括如下內容 目標細胞系培養條件 目標細胞增殖速度 支原體污染情況
維真穩轉株構建流程(二)
平板挑取法?計數100個多克隆穩轉株細胞,接種于一個10cm培養盤中;注:盡量吹打均勻,防止細胞聚團。過夜培養后,觀察并尋找單個細胞的位置,并在盤底做標記;培養培養2周;注:培養的第一周不要換液,接下來每3-4天換液。待標記處的細胞擴增為肉眼可見的白點,在移液器尖端吸取一點胰酶,緩慢滴至細胞處,待細
維真穩轉株構建流程(一)
穩轉株即穩定表達細胞株,指的是基于某一細胞系構建的持續過表達或干擾某特定基因的細胞系。慢病毒感染-藥物篩選法是目前廣泛應用的穩轉株構建方法,具有高效整合、目標細胞廣泛等特點。一.準備及預實驗確定細胞系相關信息,需包括如下內容目標細胞系培養條件目標細胞增殖速度支原體污染情況注:為避免慢病毒感染后細胞死
知識分享:維真穩轉株構建流程
穩轉株即穩定表達細胞株,指的是基于某一細胞系構建的持續過表達或干擾某特定基因的細胞系。慢病毒感染-藥物篩選法是目前廣泛應用的穩轉株構建方法,具有高效整合、目標細胞廣泛等特點。 一.準備及預實驗 確定細胞系相關信息,需包括如下內容 目標細胞系培養條件 目標細胞增殖速度 支原體污染情況
劉真:練就體細胞克隆猴技術絕活
幾天前,劉真轉發了一條招聘博士后的通知。“我們的設備去年底到位,年后開始調試,實驗室已經開始運轉了。”劉真告訴科技日報記者。 全球首例體細胞克隆猴的成功,讓劉真成為獼猴體細胞克隆技術的世界“冠軍”,也成為中國科學院神經科學研究所(以下簡稱“神經所”)最年輕的課題組負責人。 2017年底,“中
中國“真激光”顯示技術還原“真世界”
88000流明高亮度真激光投影機點亮布達拉宮(中科極光供圖) 近年來,顯示技術的發展速度越來越快,分辨率從480p、1080p到4k、8K,使得電視、投影機等顯示產品也迎來發展的快車道。2012年,國際電信聯盟(ITU)針對高畫質影像制定了最新標準BT.2020,作為未來影音廣播的技術標準。 日
健康白酒是真健康還是真忽悠?
近兩年來,酒企紛紛推出以“健康”為賣點的白酒產品。當白酒再次力推“健康”概念時,難免讓人聯想到10年前“喝酒能保肝護肝”的那場風波。而今,又有哪些企業再次入局?當白酒與健康這兩個話題再次碰撞,是否又成為新一輪概念炒作? “健康”或成白酒行業發展方向 2014年,深陷產業調整的白酒企業仍未走出
中國“真激光”顯示技術還原“真世界”
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