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    【銳賽小課題】miRNA研究之動物總RNA的提取與電泳

    動物總RNA的提取與電泳 I. 實驗目的與要求 A. 理解和掌握提取和純化動物總RNA的技術原理和操作方法。 B. 理解和掌握通過電泳鑒定提取所得的動物總RNA的技術原理和操作方法。 II. 實驗原理和背景知識 A. RNA是生命活動中基因表達過程非常重要的生物大分子,如mRNA,它攜帶了DNA的全部編碼信息。RNA的分離是研究基因功能的重要基礎之一,在分子生物學中占有重要的地位。提取的mRNA可用于Northern blot、RT-PCR、構建 cDNA文庫、Gene Chips以及體外翻譯等實驗。 B. 本次試驗中,由于RNase極穩定,所以,在操作RNA時,要格外仔細,以防RNA被降解。在提取RNA之前,必須對所用器皿進行RNase滅活處理。如用180oC干烤8小時以上處理玻璃器皿,或用0.1%的焦碳酸二乙酯(DEPC)的水溶液浸泡玻璃器皿和其它用品。所用水以及相關的緩沖液也需要......閱讀全文

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    miRNA研究之動物總RNA的提取與電泳

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    【銳賽小課堂】miRNA研究之RNA標記

      RNA標記是將標記物(如放射性同位素、熒光素或酶)共價地連接到RNA,通過檢測標記物,進而實現對RNA鑒別和檢測的目的。RNA標記在分子探針領域應用廣泛,在疾病診斷方面也很有前景。   理想的RNA標記方法應符合以下要求:   1. 操作簡單,靈敏度高   2. 不影響堿基配對的特異性

    miRNA研究之RNA提取試劑的選擇

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    【銳賽小課題】染色體分離實驗

      一、聚胺法分離染色質   試劑、試劑盒:秋水仙胺、聚胺緩沖液   實驗步驟:   有絲分裂中細胞的同步化   1. 37℃,用合適的含有 FCS,抗生素和其他必要成分的培養基培養細胞。   2. 收集有絲分裂細胞前 10~16 小時在培養基中以 0.06 μg/ml 的

    提取動物關節軟骨組織總RNA

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    【銳賽小課堂】WB生物樣本總蛋白抽提

      銳賽小課堂1222-158   一、貼壁細胞蛋白提取   A   1..將水浴鍋的溫度調至100℃,等水浴鍋達到100℃溫度后,取出需要收樣的細胞的培養皿或者孔板。   2.將緩沖液(1Xloading buffer)置于100℃水浴鍋中預熱10min。   (loding buffe

    總RNA的提取

    完整RNA 的提取和純化,是進行RNA 方面的研究工作,如Nothern雜交、mRNA 分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有RNA的提取過程中都有五個關鍵點,即1):樣品細胞或組織的有效破碎;2),有效地使核蛋白復合體變性;3),對內源RNA酶的有效抑制;4)

    植物總RNA的快速提取與純化

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