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    知識分享:蛋白質含量的測定方法

    實驗原理: 蛋白質含量測定法,是生物化學研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經典方法,即定氮法、雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法,即考馬斯亮藍法(Bradford法)。其中Bradford法和Lowry法靈敏度最高,比紫外吸收法靈敏10~20倍,比Biuret法靈敏100倍以上。定氮法雖然比較復雜,但較準確,往往以定氮法測定的蛋白質作為其他方法的標準蛋白質。 值得注意的是,這后四種方法并不能在任何條件下適用于任何形式的蛋白質,因為一種蛋白質溶液用這四種方法測定,有可能得出四種不同的結果。每種測定法都不是完美無缺的,都有其優缺點。在選擇方法時應考慮:①實驗對測定所要求的靈敏度和精確度;②蛋白質的性質;③溶液中存在的干擾物質;④測定所要花費的時間。考馬斯亮藍法(Bradford法),由于其突出的優點,正得到......閱讀全文

    知識分享:蛋白質含量的測定方法

      實驗原理:   蛋白質含量測定法,是生物化學研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經典方法,即定氮法、雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法,即考馬斯亮藍法(Bradford法)。其中Bra

    蛋白質含量的測定方法(二)

    (二)試劑與器材1.試劑(1)試劑甲:(A) 10克Na2CO3,2克NaOH和0.25克酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸餾水中。(B) 0.5克硫酸銅(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸餾水中,每次使用前,將50份(A)與1份(B)混合,即為試劑甲。(2)試劑乙

    蛋白質含量的測定方法(一)

    實驗原理:蛋白質含量測定法,是生物化學研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經典方法,即定氮法、雙縮尿法(Biuret法)、Folin-酚試劑法(Lowry法)和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法,即考馬斯亮藍法(Bradford法)。其中Bradford法

    蛋白質含量的測定方法(三)

    (二)Bradford法的優缺點1、Bradford法的突出優點是:(1)靈敏度高,據估計比Lowry法約高四倍,其最低蛋白質檢測量可達1g。這是因為蛋白質與染料結合后產生的顏色變化很大,蛋白質-染料復合物有更高的消光系數,因而光吸收值隨蛋白質濃度的變化比Lowry法要大的多。(2)測定快速、簡便,

    分享| 蛋白質常見的四種測定方法

      蛋白質是由氨基酸以“脫水縮合”的方式組成的多肽鏈經過盤曲折疊形成的具有一定空間結構的物質。蛋白質中一定含有碳、氫、氧、氮元素,常見的蛋白質檢測方法很多。  1、凱氏定氮法  準備4個50mL凱氏燒瓶并標號,想1、2號燒瓶中加入定量的蛋白質樣品,另外兩個燒瓶作為對照,在每個燒瓶中加入硫酸鉀-硫酸銅

    知識分享:細胞傳代、培養的方法

      實驗原理:   將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養。   細胞在培養瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續生長,同時 也將細胞數量擴大,就

    蛋白質含量的測定方法有哪些

    蛋白質含量測定的方法有微量凱氏定氮法、雙縮脲法、folin―酚試劑法、考馬斯亮蘭法、紫外吸收法等。1、微量凱氏定氮法:含氮有機物即分解產生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸銨。經強堿堿化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。2、雙縮脲法:雙縮脲是兩個分子

    蛋白質含量測定的操作方法

    衡量食品的營養成分時,要測定蛋白質含量,但由于蛋白質組成及其性質的復雜性,在食品分析中,通常用食品的總氮量表示,蛋白質是食品含氮物質的主要形式,每一蛋白質都有其恒定的含氮量,用實驗方法求得某樣品中的含氮量后,通過一定的換算系數。即可計算該樣品的蛋白質含量。?一般食品蛋白質含氮量為l0%如肉、蛋、豌豆

    蛋白質含量的測定方法有哪些

    蛋白質含量測定的方法有微量凱氏定氮法、雙縮脲法、folin―酚試劑法、考馬斯亮蘭法、紫外吸收法等。1、微量凱氏定氮法:含氮有機物即分解產生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸銨。經強堿堿化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。2、雙縮脲法:雙縮脲是兩個分子

    測定蛋白質含量的方法有哪些

    1、凱氏定氮法凱氏定氮法是由丹麥化學家凱道爾于1833年建立的,現已發展為常量、微量、平微量凱氏定氮法以及自動定氮儀法等,是分析有機化合物含氮量的常用方法。凱氏定氮法的理論基礎是蛋白質中的含氮量通常占其總質量的16%左右,因此,通過測定物質中的含氮量便可估算出物質中的總蛋白質含量(假設測定物質中的氮

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