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細胞內選擇性復制DNA,產生大量的拷貝。如 兩棲類 卵母細胞在發育的早期，rRNA基因的數量擴增到1000多倍。基因擴增是通過形成幾千個核進行的，每個核里含有幾百拷貝的編碼28S、18S和5.8S的rRNA基因，最后卵母細胞中的這些rRNA基因的拷貝數幾乎達到50萬個，而在相同 生物的其它類型細胞中，這些rRNA基因的拷貝數只有幾百個。卵母細胞中有如此眾多的rRNA基因拷貝，為 卵細胞在受精后的發育過程中合成大量 核糖體創造了條件。 至于卵母細胞中rRNA基因擴增的機制，有人認為可能是通過從染色體上分離出來的環狀DNA分子，這種環狀DNA中含有rRNA基因，但是第一個含有rRNA基因的環狀DNA是如何形成的尚不清楚。由于環狀DNA能夠通過滾環復制(rollingcirclereplication)的方式進行復制，因而能夠產生大量的rRNA基因。 為一特異蛋白質編碼的基因的拷貝數選擇性地增加而其他基因并未按比例增加的過程......閱讀全文
細胞內選擇性復制DNA,產生大量的拷貝。如 兩棲類 卵母細胞在發育的早期，rRNA基因的數量擴增到1000多倍。基因擴增是通過形成幾千個核進行的，每個核里含有幾百拷貝的編碼28S、18S和5.8S的rRNA基因，最后卵母細胞中的這些rRNA基因的拷貝數幾乎達到50萬個，而在相同 生物的其它類型
基因擴增就是基因拷貝數增加或表達活性增強。 gene amplification 為一特異蛋白質編碼的基因的拷貝數選擇性地增加而其他基因并未按比例增加的過程。在自然條件下，基因擴增是通過從染色體切除基因的重復序列再在質粒中進行染色體外復制或通過將核糖體RNA的全部重復序列生成RNA轉錄物再轉錄
1.PCR熱循環儀 2. 移液器（0.1-2.5μL）3.PCR板 實驗 試劑 1．10×緩沖液：500mmol/LKCI、100mmol/LTriS·HCI(pH8.3，室溫）、15mmol/LMgCl2 2.dNTPMix：2.5mmol/LdATP、2.5mmol/LdCTP、2.5
研究人員通常會在下游分析中遭遇DNA樣本量有限或不足的問題。QIAGEN的全基因組擴增技術通過以包括單細胞在內的小量樣本或珍貴樣本擴增獲得基因組DNA，解決此類難題。REPLI-g?Kit能夠準確地復制原始DNA樣本，不會造成偏差，擴增后的DNA可以直接應用于廣泛的遺傳學分析。什么是全基因組擴增(w
①引物的序列應位于基因組DNA的高度保守區,且與非擴增區無同源序列。這樣可以減少引物與基因組的非特異性結合,提高反應的特異性 ②引物長度:15-40bp為宜。引物過短或過長均可使反應的特異性下降。 ③引物的堿基盡可能隨機發布,避免出現數個嘌呤或嘧啶的連續排列,G+C堿基的含量在40%-75%
特異性高首次報導的PCR所用的DNA聚合酶是大腸桿菌的DNAPolymerase I的Klenow大片段,其酶活性在90℃會變性失活,需每次PCR循環都要重新加入Klenow大片段,同時引物是在37℃延伸(聚合)易產生模板—引物之間的堿基錯配、致特異性較差,1988年Saiki等從溫泉水中分離到的水
又稱無細胞分子克隆系統或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增法,是基因擴增技術的一次重大革新。可將極微量的靶DNA特異地擴增上百萬倍,從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力,能檢測單分子DNA或對每10萬個細胞中僅含1個靶DNA分子的樣品,因而此方法立即在分子生物學、微生物學、醫學及遺傳學等多領域
基因工程技術:將重組對象的目的基因插入載體,拼接后轉入新的宿主細胞,構建成工程菌(或細胞),實現遺傳物質的重新組合,并使目的基因在工程菌內進行復制和表達的技術. 基因工程技術使很多自然界很難或不能獲得的蛋白得以大規模合成.80年代以來,表達真核cDNA,細菌毒素和病毒抗原基因等,為人類獲取大量
1、加熱模式：立體膜加熱技術 2、制冷技術：新一代“peltier”效應“半導體熱泵制冷” 3、控溫及管理：16位微機智能式 4、DTC型基因擴增儀主要由外殼、變溫反應腔、散熱系統、加熱系統、制冷系統、電子控制系統、供電系統、人機界面等各部分組成。 5、單機操作，也可與
NASBA的簡要過程如下：1.RNA模板鏈進入反應混合物后，第一個引物首先與模板鏈的3'端結束。2. 反轉錄酶，合成反義的補償的DNA鏈。3. RNA 酶H（一種核糖核酸內切酶，能夠特異性地水解雜交到DNA鏈上的RNA磷酸二酯鍵，分解RNA/DNA雜交體系中的RNA鏈，但不能消化單鏈或雙鏈DN