基因擴增技術的相關介紹
細胞內選擇性復制DNA,產生大量的拷貝。如 兩棲類 卵母細胞在發育的早期,rRNA基因的數量擴增到1000多倍。基因擴增是通過形成幾千個核進行的,每個核里含有幾百拷貝的編碼28S、18S和5.8S的rRNA基因,最后卵母細胞中的這些rRNA基因的拷貝數幾乎達到50萬個,而在相同 生物的其它類型細胞中,這些rRNA基因的拷貝數只有幾百個。卵母細胞中有如此眾多的rRNA基因拷貝,為 卵細胞在受精后的發育過程中合成大量 核糖體創造了條件。 至于卵母細胞中rRNA基因擴增的機制,有人認為可能是通過從染色體上分離出來的環狀DNA分子,這種環狀DNA中含有rRNA基因,但是第一個含有rRNA基因的環狀DNA是如何形成的尚不清楚。由于環狀DNA能夠通過滾環復制(rollingcirclereplication)的方式進行復制,因而能夠產生大量的rRNA基因。 為一特異蛋白質編碼的基因的拷貝數選擇性地增加而其他基因并未按比例增加的過程......閱讀全文
基因擴增儀(PCR儀)技術原理
?基因擴增儀(PCR儀)技術原理:標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環,并遵守聚合酶鏈反應規律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發下發出熒光,隨著循環次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長,
PCR基因擴增儀技術參數
樣品規格0.2ml×96孔、12×8聯排管、96微孔板、0.5ml×77孔控溫模式基座BLOCK模式、管內TUBE模擬計算模式反應體積10-100ul溫控范圍0--99.9℃BLOCK升降溫速率(Max.)≥4℃/sec樣品升降溫速率(Max.)≥3.5℃/sec溫度顯示精度±0.1℃溫度準確度±0
基因擴增儀(PCR儀)技術原理
基因擴增儀(PCR儀)技術原理:標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環,并遵守聚合酶鏈反應規律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發下發出熒光,隨著循環次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長,通
關于轉基因技術的應用相關介紹
自1996年首例轉基因農作物產業化應用以來,全球轉基因技術研究與產業應用快速發展。發達國家紛紛把發展轉基因技術作為搶占未來科技制高點和增強農業國際競爭力的戰略重點,發展中國家也積極跟進,并呈現以下發展態勢: 一是品種培育速度加快。隨著生命科學、基因組學、信息學等學科的發展,轉基因技術研究日新月
基因工程技術的相關介紹
基因工程技術:將重組對象的目的基因插入載體,拼接后轉入新的宿主細胞,構建成工程菌(或細胞),實現遺傳物質的重新組合,并使目的基因在工程菌內進行復制和表達的技術. 基因工程技術使很多自然界很難或不能獲得的蛋白得以大規模合成.80年代以來,表達真核cDNA,細菌毒素和病毒抗原基因等,為人類獲取大量
基因診斷技術核酸雜交的相關介紹
是從核酸分子混合液中檢測特定大小的核酸分子的傳統方法。核酸雜交反應是一對一的反應,即膜上有一個被檢測分子時,相應就有一個標記的探針分子與它雜交。其原理是核酸變性和復性理論。即雙鏈的核酸分子在某些理化因素作用下雙鏈解開,而在條件恢復后又可依堿基配對規律形成雙鏈結構。雜交通常在一支持膜上進行,因此又
PCR基因擴增儀的分類介紹
PCR基因擴增儀的類型:PCR基因擴增儀的設計均按照DNA變性、復性和延伸三個環節以及溫度均恒、傳導快和升降溫迅速等原則,結合傳感技術、微電子技術和電子計算機等技術發展而成的自動化和智能化的儀器設備,下面僅從保溫和變溫的角度介紹幾類PCR儀的原理。1. 水浴式PCR基因擴增儀 水浴式PCR基因擴增儀
關于人工基因擴增的介紹
在研究或診斷中,DNA擴增可以通過以下方法進行: 聚合酶鏈反應(PCR):一種簡單、廉價、可靠的通過聚合核苷酸,重復復制靶標DNA片段的方法 [2] 。 連接酶鏈反應(LCR):一種擴增核酸獲得探針的基因擴增方法。對于兩條DNA鏈中的每一條,連接酶連接兩個部分探針成實際的一條。因此,LCR使
PCR基因擴增儀的分類介紹
PCR基因擴增儀的類型:PCR基因擴增儀的設計均按照DNA變性、復性和延伸三個環節以及溫度均恒、傳導快和升降溫迅速等原則,結合傳感技術、微電子技術和電子計算機等技術發展而成的自動化和智能化的儀器設備,下面僅從保溫和變溫的角度介紹幾類PCR儀的原理。1.?水浴式PCR基因擴增儀 水浴式PCR基因擴增儀
人工基因擴增的方法介紹
在研究或診斷中,DNA擴增可以通過以下方法進行:聚合酶鏈反應(PCR):一種簡單、廉價、可靠的通過聚合核苷酸,重復復制靶標DNA片段的方法。連接酶鏈反應(LCR):一種擴增核酸獲得探針的基因擴增方法。對于兩條DNA鏈中的每一條,連接酶連接兩個部分探針成實際的一條。因此,LCR使用兩種酶:DNA聚合酶
智能型基因擴增PCR裝置的研究相關
以聚合酶鏈式反應(PCR)為基礎的 離體 基因擴增技術對 基因工程的研究和應用產生了革命性影響。提供自動化的PCR專用儀器則是推廣 PCR技術的關鍵。為解決國產PCR裝置的更新換代并替代大量進口,中科院 發育生物學所最近完成了以智能化 儀表控制系統為核心的干式基因擴增PCR裝置,經多種對照引物和
基因診斷技術的DNA測序的相關介紹
目前在實驗室手工測序常用Sanger雙脫氧鏈終止法。Sanger法就是使用DNA聚合酶和雙脫氧鏈終止物測定DNA核苷酸序列的方法。它要求使用一種單鏈的DNA模板或經變性的雙鏈DNA模板和一種恰當的DNA合成引物。其基本原理是DNA聚合酶利用單鏈的DNA模板,合成出準確互補鏈,在合成時,某種dNT
基因擴增儀的技術特性與性能規格
技術特性 1、加熱模式:立體膜加熱技術 2、制冷技術:新一代“peltier”效應“半導體熱泵制冷” 3、控溫及管理:16位微機智能式 4、DTC型基因擴增儀主要由外殼、變溫反應腔、散熱系統、加熱系統、制冷系統、電子控制系統、供電系統、人機界面等各部分組成。 5、單機操作,也可與電腦聯
基因擴增技術的具體方法和程序
試劑(1)引物:決定擴增的特異性。根據檢測的DNA不同,選用不同引物,每種病原微生物都有自己特異的引物。(2)耐熱的DNA聚合酶:此酶是從耐熱細菌中分離出來的,能耐受高溫90℃-100℃。(3)10×PCR緩沖液:500mmol/l KCl;100mmol/L Tris-HCl(pH8.4,20℃)
基因擴增技術de條件及影響因素
模板核酸PCR可以以DNA或RNA為模板進行核酸的體外擴增。不過RNA的擴增首先逆轉錄成cDNA后才能進行PCR循環。不同來源的核酸標本必須經處理后才能用于PCR的擴增,處理不當或處理過程中DNA掉失都會導致PCR擴增失敗。采集標本方法不當,未能獲得所要檢測的靶DNA都會導致出現假陰性。但是如果待擴
EMA-常溫核酸擴增技術介紹
基于分子仿生學的原理,把生物體內(如大腸桿菌,酵母或人體等)多酶介導的核酸復制機理在體外再現,使痕量的核酸靶標在普通生物耐受的條件下(常溫下)進行快速的擴增,同時利用特異性熒光探針結合擴增產物,通過熒光檢測儀實時監測熒光信號,實現核酸靶標的快速擴增和檢測。?常溫核酸擴增技(簡稱EMA技術),是由點晶
詳述PCR基因擴增儀的分類介紹
?PCR基因擴增儀的類型:PCR基因擴增儀的設計均按照DNA變性、復性和延伸三個環節以及溫度均恒、傳導快和升降溫迅速等原則,結合傳感技術、微電子技術和電子計算機等技術發展而成的自動化和智能化的儀器設備,下面僅從保溫和變溫的角度介紹幾類PCR儀的原理。1.?水浴式PCR基因擴增儀 水浴式PCR基因擴增
PCR儀(基因擴增儀)的分類介紹
PCR儀(基因擴增儀)的類型:PCR儀(基因擴增儀)的設計均按照DNA變性、復性和延伸三個環節以及溫度均恒、傳導快和升降溫迅速等原則,結合傳感技術、微電子技術和電子計算機等技術發展而成的自動化和智能化的儀器設備,下面僅從保溫和變溫的角度介紹幾類PCR儀的原理。1. 水浴式PCR儀(基因擴增儀) 水浴
基因擴增的概念
基因擴增是指某一個特定基因的拷貝數選擇性地增加而其它基因的拷貝數并未按比例增加的過程。
基因擴增的概念
基因擴增是指某一個特定基因的拷貝數選擇性地增加而其它基因的拷貝數并未按比例增加的過程。
基因擴增產物分析方法介紹
PCR擴增DNA片段只是一個重要手段。擴增片段的檢測和分析才是目的,根據研究對象和目的的不同而采用不同的分析法。瓊脂糖凝膠電泳可幫助判斷擴增產物的大小,有助于擴增產物的鑒定,點雜交除可鑒定擴增產物外,還有助于產物的分型;Southern雜交分析可從非特異擴增產物中鑒定出特異產物的大小,增加檢測的特異
PCR基因擴增
實驗概要PCR擴增目標DNA片段。實驗原理多聚酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR)基本原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性、退火、延伸三個基本反應步驟構成。? 1. 模板DNA的變性:模板DNA經加熱至93℃
基因組DNA提取與PCR擴增技術
一、基因組DNA提取實驗目的基因組DNA的制備是基因分析的前提。 本實驗要求掌握基因組DNA提取的基本方法。實驗原理 DNA在生物體內是與蛋白質形成復合物的形式存在的。核酸與蛋白質之間的結合力包括離子鍵、氫鍵、范德華力等,破壞或降低這些結合力就可把核酸與蛋白分開。 DNA、RNA所含有的嘌呤環和嘧啶
三種PCR基因擴增儀的介紹
?1. 金屬模塊式PCR基因擴增儀? ? 此類擴增儀可用于普通0.5ml管、薄壁管DNA擴增和原位DNA擴增,其核心為鋁或不銹鋼加熱塊,上面分布數量不等的樣品管孔,采用電阻加熱、壓縮機制冷、半導體調制溫度或電子調制溫度。該機體積小,升降溫速度快,樣品基座溫度準確、均一度高,自動化程度高,擴增程序容量
詳述PCR儀(基因擴增儀)的分類介紹
PCR儀(基因擴增儀)的類型:PCR儀(基因擴增儀)的設計均按照DNA變性、復性和延伸三個環節以及溫度均恒、傳導快和升降溫迅速等原則,結合傳感技術、微電子技術和電子計算機等技術發展而成的自動化和智能化的儀器設備,下面僅從保溫和變溫的角度介紹幾類PCR儀的原理。1.?水浴式PCR基因擴增儀 水浴式PC
恒溫核酸擴增技術的擴增速度
由于恒溫核酸擴增只需要在一個溫度下進行,相比較于PCR不同溫度之間的循環,恒溫擴增不需要反復的升溫降溫過程,有些恒溫擴增的速度是快于PCR的擴增速度的。例如:環介導恒溫核酸擴增(LAMP),重組聚合酶擴增法(RPA)以及切刻內切酶恒溫擴增(NEAR)。目前英國公司optigene已經成功的改造了
核酸擴增—轉錄介導的擴增技術(TMA)
TMA是一種利用RNA聚合酶和逆轉錄酶在約42℃等溫條件下來擴增RNA或DNA的技術,其原理是帶有T7 RNA聚合酶識別的啟動子序列的啟動子引物與模板退火經反轉錄形成RNA-DNA雜交分子,被反轉錄酶的RNase H活性水解形成單鏈RNA,然后與引物2退火,通過反轉錄合成雙鏈DNA,在T7 RN
PCR基因擴增儀用途和特點介紹
聚合酶鏈式反應,簡稱PCR。聚合酶鏈式反應是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應組成一個周期,循環進行,使目的DNA得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。PCR基因擴增儀的用途:用于科研及臨床的基因擴增定性PCR基因擴增熒光/酶免終點定
PCR技術擴增目的基因中的引物有什么作用
1.與DNA復制中的作用類似,但是在細胞內有其他的酶進行這項工作。在PCR技術中,只加入了四種底物和Taq酶,模板。DNA聚合酶只能在有3‘端時才能復制下去。2.決定擴增片段。擴增目的基因,就要根據目的基因兩側序列設計引物,這樣只有目的基因擴增了,得到大量目的基因。這是PCR技術的一項重要應用。
基因擴增儀的用途
用于科研及臨床的基因擴增 定性PCR基因擴增 熒光/酶免終點定量DNA基因擴增 基因芯片等其他基因分析應用的基因擴增 適合國內外各種PCR試劑盒傳染病類(各型肝炎病毒、結核桿菌、STD性傳播疾病、優生優育、支原體、衣原體、寄生蟲等)、腫瘤類(P53、幽門螺桿菌等)、科研類(遺傳鑒定、細菌