PCR原理及常見問題解答
PCR (Polymerase Chain Reaction)，中文翻譯為聚合酶鏈式反應，是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制。 由1983年美國Mullis首先提出設想，1985年由其發明了聚合酶鏈反應，即簡易DNA擴增法，意味著PCR技術的真正誕生。到如今，PCR技術已廣泛應用于生命科學、醫學研究、遺傳工程、法醫學、考古學、人類學等領域。 PCR原理 PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：①模板DNA的變性：模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后，雙鏈DNA解離，成為單鏈；②模板DNA與引物的退火（復性）：模板DNA經加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合；③引物的延伸：DNA模板--引物結合物在72℃、DNA聚合酶......閱讀全文
PCR原理及常見問題解答
PCR (Polymerase Chain Reaction)，中文翻譯為聚合酶鏈式反應，是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制。 由1983年美國Mullis首先提出設想，1985年由其發明了聚合酶鏈反應，即簡易DNA擴增法，意味著PCR技術的真
PCR原理及常見問題解答
PCR?(Polymerase Chain Reaction)，中文翻譯為聚合酶鏈式反應，是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制。 由1983年美國Mullis首先提出設想，1985年由其發明了聚合酶鏈反應，即簡易DNA擴增法，意味著PCR
降落PCR的原理及常見問題解答
提問：降落PCR（Touchdown PCR）的原理？回答：Touchdown PCR是指每隔一個循環降低1°C反應退火溫度，直至達到“Touchdown”退火溫度，然后以此退火溫度進行10個左右的循環。該方法zui初出現是為了避開確定zui佳退火溫度而進行的復雜的反應優化過程。正確和非正確退火溫度
【分享】降落PCR的原理及常見問題解答
提問：降落PCR（Touchdown PCR）的原理？回答：Touchdown PCR是指每隔一個循環降低1°C反應退火溫度，直至達到“Touchdown”退火溫度，然后以此退火溫度進行10個左右的循環。該方法最初出現是為了避開確定最佳退火溫度而進行的復雜的反應優化過程。正確和非正確退火溫度之間的任
PCR－Array－常見問題解答
PCR Array FAQ:任何一臺能夠做QPCR的儀器據能夠做PCRarray嗎？QPCR 儀器都可以進行QPCR array的實驗。根據儀器采用的96孔或者384孔板，分為以下5種板型（plate format）：plate formatInstrument providerQPCR instr
7500熒光定量PCR儀常見問題解答
就像解決熒光定量PCR儀常規問題一樣，學幾招，也許在某一刻就是你需要的，先儲備起來吧！Q?：7500快速定量PCR儀可以使用0.2ml PCR反應管或者96孔板嗎？A：不可以，7500 快速定量PCR儀只支持0.1ml PCR反應管或者96孔板Q?：如何監控反應體系是否有蒸發？A：查看Rox信號是否
7500熒光定量PCR儀常見問題解答
打怪升級的不敗經驗在于“儲備”，儲備技能和能量，從容應對每一個遇到的挑戰。就像解決熒光定量PCR儀常規問題一樣，學幾招，也許在某一刻就是你需要的，先儲備起來吧！Q ：7500快速定量PCR儀可以使用0.2ml PCR反應管或者96孔板嗎？A：不可以，7500 快速定量PCR儀只支持0.1ml PCR
7500熒光定量PCR儀常見問題解答
Q?：7500快速定量PCR儀可以使用0.2ml PCR反應管或者96孔板嗎？A：不可以，7500 快速定量PCR儀只支持0.1ml PCR反應管或者96孔板Q?：如何監控反應體系是否有蒸發？A：查看Rox信號是否在整個PCR過程中保持一致。在多組分圖譜界面，選擇單孔，如果Rox信號逐漸增高，代表樣
詳述Pcr儀的四大分類及常見問題解答
詳述Pcr儀的四大分類及常見問題解答PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前常用的技術，可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準，可以將PCR儀分為普通PCR儀，梯度PCR儀
詳述Pcr儀的四大分類及常見問題解答
詳述Pcr儀的四大分類及常見問題解答PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前常用的技術，可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準，可以將PCR儀分為普通PCR儀，梯度PCR儀
詳述Pcr儀的四大分類及常見問題解答
詳述Pcr儀的四大分類及常見問題解答PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前常用的技術，可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準，可以將PCR儀分為普通PCR儀，梯度PCR儀
熒光定量PCR儀使用過程常見問題解答
定量PCR儀的開關機順序是怎樣的？按照正確的開關機順序操作，有助于延長儀器的使用壽命，減少儀器出故障的頻率。開機順序：先開電腦，待電腦完全啟動后再開啟定量PCR儀主機，等主機面板上的綠燈亮后即可打開定量PCR的收集軟件，進行實驗。關機順序：確認實驗已經結束后，首先關閉信號收集軟件，然后關掉定量PCR
流式試劑選擇及常見問題解答
一、如何搭配流式抗體熒光標記流式抗體熒光標記搭配主要由3個因素決定的：流式細胞儀能檢測多少個通道、需要同時檢測檢測多少個指標、廠家的抗體有多少種熒光標記。如果流式細胞儀的通道越多，那么同一份樣本能同時做的表面/胞內標志就越多A、 如何根據流式細胞儀搭配流式抗體1） BD流式細胞儀（06版目錄第614
PCR常見問題及回答
?PCR常見問題及回答?1. cDNA產量的很低?可能的原因：*RNA模板質量低*對mRNA濃度估計過高*反應體系中存在反轉錄酶抑制劑或反轉錄酶量不足*同位素磷32過期*反應體積過大，不應超過50μl?2. 擴增產物在電泳分析時沒有條帶或條帶很淺?*zui常見的原因在于您的反應體系是PCR的反應體系
PCR常見問題及對策
PCR常見問題及對策（一）沒有得到擴增產物（1）酶失活或在反應體系中未加入酶。Taq?DNA聚合酶因保存或運輸不當而失活，往往通過更換新酶或用另一來源的酶以獲得滿意的結果。（2）模板含有雜質。特別是對甲醛固定及石蠟包埋的組織常含甲酸，造成DNA脫嘌呤而影響PCR的結果。（3）變性溫度是否準確：PCR
蒸餾裝置及消化爐常見問題解答
蒸餾裝置和消化爐這兩個設備，既可以單獨使用，又可以組合起來作為整套的凱式定氮儀裝置。當單獨使用時，蒸餾裝置裝置是專門用來對樣品進行蒸餾的，即當樣品被消化后將含氮的物質經過高溫蒸餾出來，而消化爐是用來對樣品進行消化，一般的我們用濃硫酸，再加上催化劑，一同跟含氮的樣品進行消化。此時含氮樣品中的氮就會和硫
PCR儀常見問題及回答
聚合酶鏈式反應是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液，只要能分離出一丁點的DNA，就能用PCR加以放大，進行比對
PCR儀常見問題及回答
1. cDNA產量的很低可能的原因：＊RNA模板質量低＊對mRNA濃度估計過高＊反應體系中存在反轉錄酶抑制劑或反轉錄酶量不足＊同位素磷32過期＊反應體積過大，不應超過50μl2. 擴增產物在電泳分析時沒有條帶或條帶很淺＊zui常見的原因在于您的反應體系是PCR的反應體系而不是RT-PCR的反應體系＊
PCR儀常見問題及回答
PCR儀常見問題及回答1. cDNA產量的很低可能的原因：＊RNA模板質量低＊對mRNA濃度估計過高＊反應體系中存在反轉錄酶抑制劑或反轉錄酶量不足＊同位素磷32過期＊反應體積過大，不應超過50μl2. 擴增產物在電泳分析時沒有條帶或條帶很淺＊zui常見的原因在于您的反應體系是PCR的反應體系而不是R
PCR儀常見問題及回答
1. cDNA產量的很低可能的原因：*RNA模板質量低*對mRNA濃度估計過高*反應體系中存在反轉錄酶抑制劑或反轉錄酶量不足*同位素磷32過期*反應體積過大，不應超過50μl2. 擴增產物在電泳分析時沒有條帶或條帶很淺*最常見的原因在于您的反應體系是PCR的反應體系而不是RT-PCR的反應體系*與反
PCR儀常見問題及解答
? 聚合酶鏈式反應是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液，只要能分離出一丁點的DNA，就能用PCR加以放大，進行
PCR－擴增常見問題及特點
常見問題PCR產物的電泳檢測時間一般為48h以內，有些最好于當日電泳檢測，大于48h后帶型不規則甚至消失。假陰性，不出現擴增條帶。PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的制備，②引物的質量與特異性，③酶的質量及， ④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。模板：①模板中含有雜蛋白質，②模板中
氣質常見問題解答
包括常見的氣質問題和MSD質譜通訊中斷問題 氣質常見問題解答
細胞常見問題解答
1.原代細胞與細胞系有什么區別？ 細胞培養物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據傳統定義，第一次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells.
抗體常見問題解答
Q&A 常見問題： 如何選擇合適的一抗？ 如何選擇合適的二抗？ 如何選擇合適的同型對照？ 如何選擇陽性對照？ 如何確定一抗的稀釋比例？ 如何選擇合適的抗原修復方式？ 為何WB檢測條帶大小與預期有差別？ 抗體能夠用于其他種屬/實驗
抗體常見問題解答
常見問題： 如何選擇合適的一抗？ 如何選擇合適的二抗？ 如何選擇合適的同型對照？ 如何選擇陽性對照？ 如何確定一抗的稀釋比例？ 如何選擇合適的抗原修復方式？ 為何WB檢測條帶大小與預期有差別？ 抗體能夠用于其他種屬/實驗方法？
qPCR－常見問題解答
通常來講，real-time qPCR 的反應程序不需要像常規的 PCR 那樣，要變性、退火、延伸 3 步。由于其產物長度在 80～150 bp 之間，所以只需要變性和退火就可以了。 SYBR@Green 等染料法，最好在 PCR 擴增程序結束后，加一個溶解程序，來形成溶解曲線，判斷 PC
pH計的維護保養及常見問題解答
一、pH計的原理 通過測定電極與參比電極組成的工作電池在溶液中測得的電位差，并利用待測溶液的pH值與工作電池的電勢大小之間的線性關系，再通過電流計轉換成pH單位數值來實現測定。 二、pH計的保養 1 pH計玻璃電極的貯存 pH計短期內不用時，可充分浸泡在蒸
pH計的維護保養及常見問題解答
一、pH計的原理 通過測定電極與參比電極組成的工作電池在溶液中測得的電位差，并利用待測溶液的pH值與工作電池的電勢大小之間的線性關系，再通過電流計轉換成pH單位數值來實現測定。 二、pH計的保養 1 pH計玻璃電極的貯存 pH計短期內不用時，可充分浸泡在蒸
pH計的維護保養及常見問題解答
一、pH計的原理 通過測定電極與參比電極組成的工作電池在溶液中測得的電位差，并利用待測溶液的pH值與工作電池的電勢大小之間的線性關系，再通過電流計轉換成pH單位數值來實現測定。 二、pH計的保養 1 pH計玻璃電極的貯存 pH計短期內不用時