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    大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養與鑒定(二)

    1.4 顆粒細胞鑒定1.4.1 HE染色 取生長旺盛的第4 d的細胞,用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化后制成1×105/ml的細胞懸液,種植于已預置好小蓋玻片的24孔培養板中,放人CO2 培養箱中,在37 ℃、5% CO2及完全飽和濕度條件下進行培養。當細胞生長至70%融合時取出玻片,用PBS沖洗蓋玻片3次,每次5 min。4%多聚甲醛固定20 min。取出細胞爬片,PBS沖洗2次,蘇木素染色2 min,流水沖去浮色,入鹽酸酒精中分色數秒,流水沖洗3 min,鏡下細胞核染色清晰,胞漿不著色。5%伊紅染色2~3 min,流水沖去浮色,梯度酒精脫水,二甲苯透明,封片后光鏡下觀察細胞形態。1.4.2 FSHR表達鑒定顆粒細胞 細胞爬片制作同前,4%多聚甲醛固定。按以下步驟進行細胞免疫化學染色:固定好的細胞爬片,PBS洗滌3 min×3次;3% H2O2室溫孵育5 min,消除內源性過氧化物酶活性,PBS......閱讀全文

    大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養與鑒定(二)

    1.4 顆粒細胞鑒定1.4.1 HE染色 取生長旺盛的第4 d的細胞,用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化后制成1×105/ml的細胞懸液,種植于已預置好小蓋玻片的24孔培養板中,放人CO2 培養箱中,在37 ℃、5% CO2及完全飽和濕度條件下進行培養。當細胞生長至70%融合時取出

    大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養與鑒定(一)

    大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養與鑒定?許 川1/舒為群1,/張 亮1/曹 佳2/周 新3(1.第三軍醫大學軍事預防醫學院環境衛生學教研室, 重慶 400038; 2. 第三軍醫大學軍事預防醫學院軍事毒理學教研室,重慶 400038;3. 第三軍醫大學西南醫院燒傷科, 重慶 400038)?Cultur

    想要實現大鼠卵巢顆粒細胞原代培養,必須完成這些步驟

    大鼠卵巢顆粒細胞分離自PMSG誘導后3天的大鼠的卵巢組織,顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞,其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動、發育、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動。細胞形狀呈圓形或橢圓形。    大鼠卵巢顆粒細胞原代分離培養:    1、材料準備:取21-25天雌性SD大鼠,每日皮下注

    大鼠原代細胞分離與培養

      一、大鼠神經元細胞(酶消化法)   簡述:新生24h或E18胎鼠,取腦,剝離海馬,剪碎,木瓜酶消化,清洗過篩后鋪于多聚賴氨酸包被的培養板中。   二、大鼠雪旺細胞(植塊法)   簡述:新生24h大鼠,取坐骨神經,剝去外膜和束膜,剪成1mm3的小塊,均勻鋪于培養皿內,加少量血清,37℃ C

    新生大鼠心肌細胞原代培養實驗(二)

    ?3. ? 用第二套手術器械進行下列操作。用眼科直鑷和眼科彎剪把培養皿中的心臟周邊的血凝塊及纖維組織剔除掉,放在另一個預先裝好D-Hank's液的培養皿中,把心臟組織再洗一遍后,將心臟組織放在另外一個培養皿中(或者其它合適容器中,視個人習慣),加少許 0.06%胰酶,用眼科彎剪將心臟

    新生大鼠心肌細胞原代培養實驗——原代培養技術

    新生大鼠心肌細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于細胞形態研究;(3)應用于臨床研究。實驗方法原理將大鼠的心肌細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料SD 乳鼠試劑、試劑盒低糖 DMEM、胰酶EDTA青鏈

    用于生產MSCs的大鼠骨髓原代培養

    試劑和材料: 1.?完全培養基(CCM):α-MEM:α-低限量基礎培養基,含谷氨酰胺,無核苷酸或脫氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、經FBS雜交瘤純化,非熱滅活、青霉素100U/ml、鏈霉素100μg/ml。含0.2μg/ml兩性霉素B。過濾除菌。儲存于4℃,不超過

    大鼠肝星狀細胞原代培養實驗

    胰酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。

    大鼠肝星狀細胞原代培養實驗

    胰酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。

    大鼠骨髓原代培養用于生產MSCs

    試劑和材料:完全培養基(CCM):α-MEM:α-低限量基礎培養基,含谷氨酰胺,無核苷酸或脫氧核苷酸;添加:20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、經F雜交瘤純化,非熱滅活、青霉素100U/ml、鏈霉素100μg/ml。含0.2μg/ml兩性霉素B。過濾除菌。儲存于4℃,不超過2周;2.A;3.

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