二氫硫辛酰胺乙酰基轉移酶實驗——Stopped實驗
實驗材料酶樣品試劑、試劑盒Tris-HClCoA乙酰磷酸磷酸轉乙酰酶DL-二氫硫辛酰胺HCl羥胺FeCl3 試劑實驗步驟實驗所需「試劑」具體見「其他」0.98 ml 實驗混合物0.02 ml 酶樣品30 ℃ 培養 15 min,加入 0.1 ml 1 mol/L HCl 停止,沸水浴 5 min。而后 0.4 ml 的測定用量溶于 0.2 ml 2 mol/L 羥胺,并且室溫下持續 10 min 后加入0.6 ml FeCl3 試劑。離心 5 min后測量 546 nm 吸收值。展開 注意事項其他試劑:0.1 mol/L Tris-HCl,pH 7.60.01 mol/L CoA(游離酸,Mr=767.5,CoA·Li3,Mr=785.4;23 mg 溶于 3 ml 水中)1 mol/L 乙酰磷酸(LiK 鹽,Mr=184.1;1.84 mg 溶于 10 ml 水中)磷酸轉乙酰酶(乙酰-CoA:正磷酸轉乙酰酶,4000......閱讀全文
二氫硫辛酰胺乙酰基轉移酶實驗——Stopped-實驗
實驗材料酶樣品試劑、試劑盒Tris-HClCoA乙酰磷酸磷酸轉乙酰酶DL-二氫硫辛酰胺HCl羥胺FeCl3 試劑實驗步驟實驗所需「試劑」具體見「其他」0.98 ml 實驗混合物0.02 ml 酶樣品30 ℃ 培養 15 min,加入 0.1 ml 1 mol/L HCl 停止,沸水浴 5 min。而
二氫硫辛酰胺乙酰基轉移酶實驗
實驗方法原理 實驗材料 酶樣品試劑、試劑盒 Tris-HClCoA乙酰磷酸磷酸轉乙酰酶DL-二氫硫辛酰胺儀器、耗材 分光光度計實驗步驟 實驗所需「試劑」具體見「其他」0.98 ml 實驗混合物0.02 ml 酶樣品30℃ 時,于 240 nm 處吸收值發生變化,需使用石英比色皿。注意事項 其他 試劑
二氫硫辛酰胺乙酰基轉移酶實驗
分光光度法 Stopped 實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料
二氫硫辛酰胺乙酰基轉移酶實驗——分光光度法
實驗方法原理實驗材料酶樣品試劑、試劑盒Tris-HClCoA乙酰磷酸磷酸轉乙酰酶DL-二氫硫辛酰胺儀器、耗材分光光度計實驗步驟實驗所需「試劑」具體見「其他」0.98 ml 實驗混合物0.02 ml 酶樣品30℃ 時,于 240 nm 處吸收值發生變化,需使用石英比色皿。展開?注意事項其他試劑0.1
二氫硫辛酰胺脫氫酶的測定實驗
二氫硫辛酰胺的氧化反應 硫辛酰胺的還原反應 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 此可逆反應可以從任一方向檢測。氧化型硫辛酸和其氨基化合物是可以購買到的,但是利用簡單的步驟
二氫硫辛酰胺脫氫酶的測定實驗_還原反應
實驗材料酶樣品試劑、試劑盒磷酸鉀NAD+NADHDTEEDTADL-硫辛酰胺儀器、耗材分光光度計實驗步驟0.93 ml 實驗混合物0.05 ml 0.2 mol/L DL-二氫硫辛酰胺 10 mol/L0.02 ml 酶樣品30 ℃ 時,于 340 nm 處吸收值發生變化,ε340=6.3×103?
二氫硫辛酰胺脫氫酶的測定實驗_氧化反應
NADH:硫辛酰胺氧化還原酶,硫辛酰胺脫氫酶。此酶發現于細胞中,游離形式(二聚體)存在,與多酶復合體結合,與丙酮酸脫氫酶復合體、酮戊二酸脫氫酶復合體以及分支的含氧酸脫氫酶復合體相似。此酶首先被 Straub(1939)發現,由于其在加入人為的電子受體如氰化鐵、二氯酚吲哚酚和醌后,可以催化 NAD(P
二氫硫辛酰胺的基本信息
中文名稱二氫硫辛酰胺英文名稱dihydrolipoamide定 義α酮酸脫氫酶復合體中轉乙酰化酶的輔酶——硫辛酸與酶的賴氨酸殘基結合,轉移后釋出的還原性硫辛酰胺。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),新陳代謝(二級學科)
二氫硫辛酰胺脫氫酶的測定
實驗方法原理 此可逆反應可以從任一方向檢測。氧化型硫辛酸和其氨基化合物是可以購買到的,但是利用簡單的步驟就可使其還原。硫辛酸和其氨基化合物都可作為底物,有氨基存在,此酶的活性要強 5 倍。實驗材料 酶樣品試劑、試劑盒 磷酸鉀NADDTEDL-二氫硫辛酰胺儀器、耗材 分光光度計實驗步驟 實驗所需「試劑
概述氧化脫羧與簡單脫羧的區別
由丙酮酸脫氫酶系催化進行的丙酮酸催化反應是一種特殊的脫羧方式,即氧化脫羧,它與普通的脫羧反應,即普通脫羧有所不同。 氧化脫羧反應由丙酮酸脫氫酶系催化進行,此酶系包含3種不同的酶:丙酮酸脫氫酶(E1)、二氫硫辛酰胺乙酰轉移酶(E2)、二氫硫辛酰胺脫氫酶(E3),以及6種輔助因子:焦磷酸硫胺素(T
二氫硫辛酰胺脫氫酶的基本形態
DLD是大小為51千道爾頓亞基的同二聚體,其中每個亞基都與一分子的FAD以共價鍵的形式相連。
二氫硫辛酰胺脫氫酶的主要作用
DLD作為一種線粒體蛋白質,在真核生物的能量代謝中起到重要作用,它至少參與了五種多酶復合體,且為復合體完成反應所必需的組份。另外,DLD作為一種黃素蛋白氧化還原酶,以FAD為輔基接受質子與電子催化二硫鍵的形成。
硫辛酰胺還原轉乙酰基酶的基本信息
中文名稱硫辛酰胺還原轉乙酰基酶英文名稱lipoamide reductase-transacetylase定 義編號:EC 2.3.1.12。丙酮酸脫氫酶多酶復合物的一個組分,催化其輔基硫辛酰胺還原為二氫硫辛酰胺,與此同時將連接在丙酮酸脫氫酶輔基(焦磷酸硫胺素)上的羥乙基氧化為乙酰基,并將此乙酰基
硫辛酰胺還原轉乙酰基酶的基本信息
中文名稱硫辛酰胺還原轉乙酰基酶英文名稱lipoamide reductase-transacetylase定 義編號:EC 2.3.1.12。丙酮酸脫氫酶多酶復合物的一個組分,催化其輔基硫辛酰胺還原為二氫硫辛酰胺,與此同時將連接在丙酮酸脫氫酶輔基(焦磷酸硫胺素)上的羥乙基氧化為乙酰基,并將此乙酰基
二氫硫辛酰胺脫氫酶的基本信息
二氫硫辛酰胺脫氫酶(EC1.8.1.4,英語:Dihydrolipoamide dehydrogenase,縮寫DLD,又稱為線粒體二氫硫辛酸脫氫酶,dihydrolipoyl dehydrogenase, mitochondrial)是一種由人類基因DLD所編碼的黃素蛋白,其作用是將二氫硫辛酰胺脫
二氫硫辛酰胺脫氫酶的基本信息
二氫硫辛酰胺脫氫酶(EC1.8.1.4,英語:Dihydrolipoamide dehydrogenase,縮寫DLD,又稱為線粒體二氫硫辛酸脫氫酶,dihydrolipoyl dehydrogenase, mitochondrial)是一種由人類基因DLD所編碼的黃素蛋白,其作用是將二氫硫辛酰胺脫
關于二氫硫辛酸琥珀酰轉移酶的簡介
二氫硫辛酸琥珀酰轉移酶是一種酶。 二氫硫辛酰琥珀酰轉移酶蛋白定位于線粒體,參與細胞的新陳代謝。其基因定位于染色體14q24.3.,已知編碼兩種蛋白,二氫硫辛酸琥珀酰轉移酶及其截短體。目前已知DLST的可能存在的功能包括:1)構成KGDHC的核心酶;2)在脊椎動物心臟中控制ATP的產生。
二氫硫辛酸琥珀酰轉移酶與疾病關系
1996年 Sheu 等首先報道DLST基因13號內含子19117位點A-G突變和14號外顯子19183位點C-T突變導致的多態現象與SAD的遺傳易感性有關,其中13號內含子19117位點A-G突變可能影響其mRNA加工過程中內含子的剪切,導致其多態性。已有大量報道,DLST基因的多態性和老年人
硫辛酰胺的主要用途和注意事項
用途:用于制藥品和做化學原料.注意:丙酮酸脫酰氧化過程中,硫辛酰胺還原轉乙酰基酶的輔基硫辛酰胺還原為二氫硫辛酰胺,與此同時連接在丙酮酸脫氫酶輔基(焦磷酸硫胺素)上的羥乙基氧化為乙酰基,并將此乙酰基轉移至二氫硫辛酰胺,形成乙酰基硫辛酰胺,進而乙酰基轉移至輔酶A生成乙酰輔酶A,使硫辛酰胺在丙酮酸脫羧氧化
氯霉素乙酰基轉移酶(CAT)測定實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能將乙酰基從乙酰輔酶A轉移到氯霉素上。本試劑盒采用熒光測定的方法,檢測CAT活性,它的靈敏度接近同位素測定方法,而操作極
氯霉素乙酰基轉移酶(CAT)測定實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能將乙酰基從乙酰輔酶A轉移到氯霉素上。本試劑盒采用熒光測定的方法,檢測CAT活性,它的靈敏度接近同位素測定方法,而操作極
氯霉素乙酰基轉移酶(CAT)測定實驗
通過測定轉染細胞的報告基因表達,如β-gal或CAT,可以確定導人的DNA是否已被整合到宿主細胞主要用于(1)測定基因表達(2)基因整合評價(3)細胞的調控。來源于《動物細胞培養:基礎技術指南(第五版)》實驗方法原理氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransfe
關于二氫硫辛酸琥珀酰轉移酶的基本介紹
三羧酸循環(tricarboxylic acid cycle)是需氧生物體內普遍存在的代謝途徑,分布在線粒體。因為在這個循環中幾個主要的代謝產物是含有三個羧基的檸檬酸,所以叫做三羧酸循環,又稱為檸檬酸循環或者是TCA循環或TAC;其發現者為Hans Adolf Krebs(英1953年獲得諾貝爾
斑馬魚二氫硫辛酸轉乙酰基酶(DLAT)ELISA試劑盒操作說明
斑馬魚二氫硫辛酸轉乙酰基酶(DLAT)ELISA試劑盒本試劑盒僅供研究使用。使用目的:本試劑盒用于測定血清、血漿及相關液體樣本中待測物質的含量。斑馬魚二氫硫辛酸轉乙酰基酶(DLAT)ELISA試劑盒實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中待測物質水平。用純化的待測物質抗體包被微孔板,制成固相抗體,
丙酮酸脫氫酶(硫辛酰胺)的測定實驗
氰鐵酸作為電子受體 二氯酚吲哚酚作為電子受體 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 酶樣品
硫辛酸的特性和分布情況
硫辛酸作為輔酶,在兩個關鍵性的氧化脫羧反應中起作用,即在丙酮酸脫氫酶復合體和α-酮戊二酸脫氫酶復合體中,催化酰基的產生和轉移。硫辛酸可以接受酰基與丙酮酸的乙酰基,形成一個硫酯鍵,然后將乙酰基轉移到輔酶A分子的硫原子上。形成輔基的二氫硫辛酰胺可再經二氫硫辛酰胺脫氫酶(需要NAD+)氧化,重新生成氧化型
關于硫辛酸的研究介紹
硫辛酸作為輔酶,在兩個關鍵性的氧化脫羧反應中起作用,即在丙酮酸脫氫酶復合體和α-酮戊二酸脫氫酶復合體中,催化酰基的產生和轉移。硫辛酸可以接受酰基與丙酮酸的乙酰基,形成一個硫酯鍵,然后將乙酰基轉移到輔酶A分子的硫原子上。形成輔基的二氫硫辛酰胺可再經二氫硫辛酰胺脫氫酶(需要NAD+)氧化,重新生成氧
羥基和酸形成的鍵
羧基功能化PEG可以用來修飾蛋白,抗體,多肽等。羧基可以和氨基反應形成穩定的酰胺鍵,也可以和羥基形成酯鍵。羧基化PEG在生物工程領域有著顯著的應用,粒子表面改性,生物分子聚乙二醇化等。硫辛酸作為輔酶,在兩個關鍵性的氧化脫羧反應中起作用,即在丙酮酸脫氫酶復合體和α-酮戊二酸脫氫酶復合體中,催化酰基的產
關于丙酮酸脫氫酶復合體的組成介紹
對真核生物來說,組成丙酮酸去氫酶復合物的三種酶及五種輔酶皆位在線粒體中;對原核生物來說,則是位在細胞質里。這些酶除了組合在一起之外,還能夠重復地組成更大的蛋白質群。 組成丙酮酸去氫酶復合物的三種酶分別是:丙酮酸去氫酶、二氫硫辛酰基乙酰基轉基酶、二氫硫辛酰基去氫酶。五種輔酶則是:硫胺素焦磷酸、輔
硫辛酰胺的結構及作用
硫辛酰胺是硫辛酸的一種衍生物,分子式是C8H15NOS2。硫辛酰胺可以與丙酮酸作用,丙酮酸在脫羧后可以得到硫辛酰胺開環的乙酰化產物,在生物體內可起到轉移乙酰基的作用。