磷酸化位點分析實驗磷酸肽的分離——IMAC分離/富集磷酸肽
實驗材料蛋白樣品儀器、耗材質譜儀實驗步驟磷酸肽分析的常見困難是由磷酸化的低化學計量值導致的,樣品中相同序列肽段的磷酸肽的含量要比非磷酸化肽段含量少得多,這種情況下即使 32p標記的 2D-PP 上的點,經全蛋白質水解及 HPLC 組分收集,已經確定磷酸肽存在,用質譜技術也難以鑒定磷酸肽。數據依賴的 MS/MS 方法不能鑒定樣品中含量少的成分,因為 CID 優先選擇豐度高的離子進行分析,為了解決這一問題常用 IMAC 選擇性富集磷酸脫這一技術將 Fe3+ 或 Ga2+等金屬離子整合到含有亞氨基二乙酸 (iminodiacetk acid) 或次氮基三醋酸 (nitrilotriacetic acid) 的色譜固定相上。磷酸肽與固定相有高親和力,被選擇性地吸附在上面。用磷酸鹽或高 pH 溶液洗脫,洗脫組分即為富集的磷酸肽。雖然這一方法對磷酸肽有選擇性,但其他肽,特別是那些富含酸性氨基酸鏈的肽段也容易被富集。IMA......閱讀全文
方案4-離線-microIMAC-富集磷酸化蛋白實驗
實驗材料來自目標磷酸化蛋白的多肽試劑、試劑盒乙酸銨EDTA氯化鐵儀器、耗材接口和組合件氮壓縮氣體IMAC樹脂聚酷亞胺涂層熔融石英毛細管壓力管聚四氟乙烯管實驗步驟一、IMAC 微柱的構建制備二、磷酸化多肽的富集展開
方案1-用帶有-Fe(Ⅲ)-和-Ga(Ⅲ)的-IMAC-純化磷酸化多肽
實驗材料膠內或溶液分離的目標蛋白試劑、試劑盒乙酸EDTAFeCl3甲酸甲醇蛋白裂解酶溶劑儀器、耗材臺式離心機去鹽樹脂IMAC 樹脂MALDI 探針質譜儀加樣吸頭加樣器實驗步驟一、IMAC 樹脂的制備二、多肽樣品的制備三、用 NanoscaleIMAC 純化磷酸化多肽展開?
磷酸化位點分析實驗磷酸肽的分離——IMAC-分離/富集磷酸肽
實驗材料蛋白樣品儀器、耗材質譜儀實驗步驟磷酸肽分析的常見困難是由磷酸化的低化學計量值導致的,樣品中相同序列肽段的磷酸肽的含量要比非磷酸化肽段含量少得多,這種情況下即使?32p標記的 2D-PP 上的點,經全蛋白質水解及 HPLC 組分收集,已經確定磷酸肽存在,用質譜技術也難以鑒定磷酸肽。數據依賴的
用蛋白質組學方法繪制磷酸化位點圖譜
方案1 用帶有 Fe(Ⅲ) 和 Ga(Ⅲ)的 IMAC 純化磷酸化多肽 方案2 在 MALDI 分析之前或之后對磷酸化多肽進行堿性磷酸酶處理 方案3 結合固定化金屬離子親和介質和 MALDI-TOF-MS 直接分析方法對磷酸化多肽進行特征分析實驗 方
紅外顯微鏡附件
ATR 物鏡布魯克公司專門設計的ATR物鏡,確保用戶即可獲得最清晰的樣品可見光圖像又不損失紅外光通量。ATR內置的壓力傳感器可以保證在數據采集過程中,晶體和樣品之間的接觸效果最佳,可重復性最好。 ?掠角物鏡布魯克公司ZL設計的GAO掠角物鏡專門用于金屬襯底上超薄膜的顯微分析,在保證紅外光偏振性的同時
磷酸化蛋白組學需要多少蛋白
蛋白質磷酸化發揮作用的途徑:(信號傳導)2. 真核細胞蛋白質磷酸化位點一般位于(絲氨酸)、(蘇氨酸)、(賴氨酸)3. 蛋白激酶在細胞信號轉導途徑主要作用:(調節細胞活性)、(放大傳導信號)4. 目前常用的磷酸肽富集方式(TiO2)、(IMAC)5. 磷酸化蛋白組定性分析包括(單一磷酸化位點鑒定)、(
AMBERLITE-XAD2高交聯非極性樹脂
AMBERLITE XAD-2高交聯非極性樹脂;高交聯樹脂是一種吸附樹脂,又稱為聚合物吸附劑,是一大類不含離子交換基團,具有大且多孔的網狀結構、內部結構復雜、高交聯度的高分子聚合物。上世紀70年代初利用后交聯聚合法合成了一種新型的超高交聯樹脂。作為一種吸附劑,它具有較大的比表面積,適宜的孔結構和
蛋白純化的首選標簽Histag的優勢及應用
His標簽蛋白純化工具-蛋白純化必備在大腸桿菌和別的原核系統中表達的多組氨酸標簽重組蛋白一般運用固定的金屬離子親和色譜來純化或稱為 IMAC. 在這個進程中,支撐物 (一般是珠狀瓊脂糖凝膠或磁珠顆粒) 用適宜的耦合試劑來進行衍生,比方氨三乙酸 nitrilotriacetic acid (NTA
常見蛋白標簽6xHis標簽
6xHis標簽,也稱為多組氨酸標簽(polyhistidine ),His6標簽或hexa組氨酸標簽,這是一種在轉染的細胞中目標蛋白的C端或N端上由至少6個組氨酸殘基鏈接上所組成的氨基酸序列,它的序列如下所示:相對小的分子量,低的免疫原性,親水性和在去污劑和其他添加劑存在的情況下的易變性,因此在天然
蘋果史上最短發布會:3納米M3芯片亮相,可用于研發AI軟件
不到一年時間,蘋果自研的M芯片再度迎來更新。 北京時間10月31日8點,蘋果舉辦名為“Scary Fast(快得嚇人)”線上發布會,發布了全新的M3芯片系列,包括M3、M3 PRO和M3 MAX,以及搭載M3芯片的14英寸和16英寸筆記本電腦以及24英寸iMac。本次發布會僅持續了半個小時,
見所未見:OptiMS拓展您的質譜潛能
鑒定翻譯后修飾的位點 奧地利Innsbruck醫學院生物中心臨床生物化學部的Bettina Sarg博士 題目:Application of CESI-MS for the Analysis of Site-specific Protein Modifications Betti
分子生物學蛋白質磷酸化分析技術
在所 有 的 翻譯后修飾中,可逆的磷酸化,幾乎調節著生命活動的整個過程,包括細胞的增殖、發育和分化,神經活動,肌肉收縮,新陳代謝,腫瘤發生等。據統計,哺乳動物細胞內有三分之一以上的蛋白質可以被磷酸化川,蛋白質的可逆磷酸化使得蛋白質組學研究更為復雜。 真核 生 物 細胞蛋白質中主要的磷酸化氨基酸為絲氨
分子生物學蛋白質磷酸化分析技術
在所 有 的 翻譯后修飾中,可逆的磷酸化,幾乎調節著生命活動的整個過程,包括細胞的增殖、發育和分化,神經活動,肌肉收縮,新陳代謝,腫瘤發生等。據統計,哺乳動物細胞內有三分之一以上的蛋白質可以被磷酸化川,蛋白質的可逆磷酸化使得蛋白質組學研究更為復雜。 真核 生 物 細胞蛋白質中主要的磷酸化氨基酸為絲氨
日本電子在APMC10發布ipad遙控掃描電鏡
在澳大利亞珀斯 (Perth) 召開的第十屆亞太電鏡(APMC10)大會上,日本電子發布了可以用ipad、iphone、iMac遙控的場發射掃描電鏡程序界面,適用于日本電子生產的全部場發射掃描電鏡。這是繼日本電子的鎢燈絲掃描電鏡JSM-6010掃描電鏡后,日本電子推出的更加方便、有趣的控制系
科學家建立規模化抗腫瘤基因工程巨噬細胞技術
近日,中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院研究員潘光錦團隊在人多能干細胞來源基因工程化巨噬細胞抗腫瘤研發中取得新進展,研究提供了一種大規模生產用于實體瘤治療的基因工程化巨噬細胞策略,并開發出一種功能增強型抗腫瘤基因工程化巨噬細胞。相關成果發表于《分子治療—方法與臨床開發》。人多能干細胞來源的分泌IL1
科學家建立規模化抗腫瘤基因工程巨噬細胞技術
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/3/519324.shtm近日,中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院研究員潘光錦團隊在人多能干細胞來源基因工程化巨噬細胞抗腫瘤研發中取得新進展,研究提供了一種大規模生產用于實體瘤治療的基因工程化巨噬細胞策略,并開
方案3-固定化金屬離子親和介質對磷酸化多肽進行分析
實驗材料牛小腸堿性磷酸酶羧肽酶Y目標磷酸化蛋白TPCK 修飾的膜蛋白酶試劑、試劑盒乙酸EDTAFeCl3NH4HCO3MALDI 基質鎳-次氨基三乙酸(Ni-NTA)樹脂檸檬酸鈉儀器、耗材致密的反應柱子(CRC)過濾器孵育器MALDI 質譜儀MALDI 靶板微量離心管實驗步驟一、固定化金屬離子親和柱
工業常用的生物分離技術有哪幾種
常用到得分離方法:鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、氯化鈉、硫酸鈉等,但以硫酸銨為最多。得到的蛋白質一般不失活,一定條件下又可重新溶解,故這種沉淀蛋白質的方法在分離、濃縮,貯存、純化蛋白質的工作中應用極廣。萃取分離法(包括溶劑萃取、膠團萃取、雙水相萃取、超臨界流體萃取、固相萃取、固相微萃取、溶劑微萃取等)
利用基于磁珠的人類血清蛋白質表達譜從非病樣中區分...
利用基于磁珠的人類血清蛋白質表達譜從非病樣中區分急性淋巴性白血病布魯克·道爾頓公司(Bruker Daltonics)新研究出的CLINPROT?解決方案適于復雜蛋白質組表達譜模式的樣品制備和模式獲得以及比較分析。在一項先導性的研究中,利用CLINPROT系統,對37名急性淋巴性白血病(ALL)
磷酸化蛋白鑒定實驗
實驗材料測序級膜蛋白酶試劑、試劑盒二硫蘇糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯儀器、耗材螯合瓊脂糖凝膠層析介質實驗步驟這里所述的方法概括為下列幾個步驟:胰蛋白酶水解消化膜和可溶性組分中的蛋白質(見 24. 3.1 );固相金屬螯合親和層析(IMAC) 富集磷酸肽(見 24. 3. 2 );用串聯質譜對磷酸
磷酸化蛋白鑒定實驗
實驗材料測序級膜蛋白酶 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒二硫蘇糖醇 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?碘代乙酰
磷酸化蛋白鑒定實驗
實驗材料 測序級膜蛋白酶試劑、試劑盒 二硫蘇糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯儀器、耗材 螯合瓊脂糖凝膠層析介質實驗步驟 這里所述的方法概括為下列幾個步驟:胰蛋白酶水解消化膜和可溶性組分中的蛋白質(見 24. 3.1 );固相金屬螯合親和層析(IMAC) 富集磷酸肽(見 24. 3. 2 );用串
新品來襲,蘋果春季特別活動下月召開
彭博社Mark?Gurman透露的最新消息稱,蘋果計劃在3月8日舉辦春季特別活動。? 由 太平洋電腦網 提供 從外媒的爆料來看,此次的蘋果蘋果將會推出?5?款新?Mac,包括?2?臺筆記本和?3?臺桌面設備: ??●?重新設計的?MacBook?Air,配備?M2?芯片和多種顏色選擇 ??●?
蛋白翻譯后修飾的基金申請解析與研究注意點(一)
每年三月初,都是科研界的“高考”倒計時,因為距離國自然基金申請的截止日期已不到半月。縱觀歷年國自然申請情況,蛋白的翻譯后修飾都是申請中重大研究方向之一。2018年國自然統計表明,磷酸化、泛素化、乙酰化等修飾的相關基金項目,總研究資助金額超過2億。 繼上周的腸道微生物研究方案解析
蛋白翻譯后修飾的基金申請解析與研究注意點(一)
每年三月初,都是科研界的“高考”倒計時,因為距離國自然基金申請的截止日期已不到半月。縱觀歷年國自然申請情況,蛋白的翻譯后修飾都是申請中重大研究方向之一。2018年國自然統計表明,磷酸化、泛素化、乙酰化等修飾的相關基金項目,總研究資助金額超過2億。繼上周的腸道微生物研究方案解析后(國自然沖刺:打通菌群
蛋白質組學分離分析方法進展
分析測試百科網訊 2015年10月17日,第二屆全國質譜分析學術報告會(質譜大會)在浙江大學紫荊港校區體育館盛大開幕。中國科學院大連化學物理研究所 張玉奎 來自中國科學院大連化學物理研究所的張玉奎院士帶來了題為《蛋白質組學分離分析方法進展》的報告。 張玉奎主要介紹了蛋白質樣品預處理、蛋白質組
液液分離,液固分離采用的設備原理和方法?
液液分離,應該是兩種互不相溶的(如氯仿和水溶液)就用分液漏斗,靜置分層后分離即可。原理是兩種溶液不相溶和密度不同,復就會出現分層現象。 ? ? ?液固分離,簡單的就是用適當的濾器過濾,分別收集處理。另外就是使用離心機,原理分子或顆粒的重量不同。 常用的分離方法 分離方法開始主要用于制化工行業中
重組G蛋白偶聯受體的純化實驗(一)
一、引言天然的整合膜蛋白的量并不充足。因此對其的結構測定和功能分析需要:①重組膜蛋白的生產系統;②能分離得到有活性的膜蛋白(而不是沒有功能、折疊錯誤的膜蛋白)的純化策略。表達并純化原核和真核的膜蛋白在文獻中都有報道。讀者可以參考如Grisshammer 和Tate(1995;2003) 及Gri
磷酸化位點分析實驗磷酸肽的分離
2D-PP 分離磷酸肽 RP-HPLC 分離磷酸肽 高分辨凝膠電泳分離磷酸肽 IMAC 分離/富集磷酸肽 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理
PALL蛋白純化填料試用申請活動即將開始
PALL蛋白純化填料試用申請活動即將開始 蛋白純化新選擇:多一次嘗試,多一種選擇,不同的結果。PALL蛋白純化填料試用申請活動即將開始申請有效期2011年5月4號-2011年6月4號???您是否為蛋白純化結果不理想而煩惱?試試PALL的層析填料吧,提供與傳統填料不同的層析選擇性!你是否為