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實驗步驟 ##一、 cDNA 宏陣列的樣品制備培養基： I : 2 (V7 V ) Gamborg B5 培 養 基（GibcoBRL， Rockville, MD), I : 1000(V /V ) Hyponex肥 料（Hyponex 10 : 5 : 10; Hyponex Japan, Osaka， Japan), 1 % 鹿糖 ； pH調 至 5. 7。##二、 cDNA宏陣列探針制備（見注釋 1?4)1.4 mol/L 硫 氫 酸 胍（guanidium thiocyanate) 溶 液 ： 4 mol/L 硫氧酸胍， 0 ?1mol/LTris-HCl, p H 7. 5， l0mmol/L E D TA , 0 . 5 % 十二焼基肌氨酸鈉， 0.1%β-疏 基 乙 醇2.酸 -氯 仿（Phenol-chloroform): 50%......閱讀全文
實驗概要植物生物學研究數據庫實驗步驟http://bioinf.scri.sari.ac.uk/cgi-bin/plant_snorna/home 英國 Top 植物種的snoRNA基因數據庫。 綜合 http://bioinformatics.psb.ugent.be/webt
11.用 mRNA 純 化 試 劑 盒（Amersham Biosciences, Piscataway, NJ) 將 Poly.(A )+ RNA從總R N A 中分離出來（見注釋5)。####（2） c D N A 文 庫 的 構 建1.取1. 5 ?7. 5 μg poly (A )<
注意事項1.所有的試劑必須用電阻高于 17. 6 的雙蒸水配制。2.提取 RNA 所用的玻璃器具必須于 180°C 烘烤至少 8 h 以滅活 RNase。除緩沖液外的所有溶液都要用 0 ?1 % DEPC水 配 制（見注釋 3)。 RNase 的污染主要來源于實驗人員的手，所以進行 RN A 實驗時
實驗材料：異丙基-β-D-硫代半乳糖苷試劑、試劑盒：PP 緩沖液
實驗材料異丙基-β-D-硫代半乳糖苷試劑、試劑盒PP 緩沖液變性裂解緩沖液儀器、耗材微量滴定板實驗步驟3.1 高通量蛋白的表達和純化我們用在 PQE30 表達載體里構建的，可表達帶 N 端 RGS-His6 標記的大腸桿菌 cDNA 表達克隆來生產重組植物蛋白。由于超出本章節的范圍，我們不
實驗材料 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷試劑、試劑盒 PP 緩沖液變性裂解緩沖液儀器、耗材 微量滴定板實驗步驟 3.1 高通量蛋白的表達和純化我們用在 PQE30 表達載體里構建的，可表達帶 N 端 RGS-His6 標記的大腸桿菌 cDNA 表達克隆來生產重組植物蛋白。由于超出本章節的范圍，
基因組中表觀遺傳變化是能遺傳的，近期來自Salk生物學研究所等處的一組研究人員完成了一項野生植物表觀基因組學全范圍內的研究分析，從中發現了這種修飾與遺傳信息相互作用的共同模式。這一成果公布在3月7日Nature雜志在線版上。 文章通訊作者是Salk研究所的著名教授Joseph R. E
酵母雙雜交技術，它是通過利用轉錄激活因子GAL4的特性而建立的。GAL4由兩個結構域組成，一個為N端的DNA結合域（DNAbinding domain，DBD），另一個是C端的轉錄激活域（active domain，AD），二者可以從核酸一級結構上分開而獨立表達出有功能的結構域；當二者在物理空
酵母雙雜交技術，它是通過利用轉錄激活因子GAL4的特性而建立的。GAL4由兩個結構域組成，一個為N端的DNA結合域（DNAbinding domain，DBD），另一個是C端的轉錄激活域（active domain，AD），二者可以從核酸一級結構上分開而獨立表達出有功能的結構域；當二者在物理空
本章主要介紹如何通過制備和使用 cDNA 宏陣列來檢測環境毒物對基因表達的影響，同時具體介紹實驗所用到的材料與方法。由于一些非傳統模式的物種研究購買不到商業化的芯片，應用本章講述的方法，研究人員可以自行設計和使用適合自己實驗目的的芯片。我們有意略去了實驗中統計分析方面的內容，因為統計分析的方法仍有待
實驗步驟 一.材料 1.擴增和制備克隆 （1）甘 油 保 存 的E.coli, 質 粒 含 有 目 標 cDNA 插入片段。 （2）Tag 聚合酶和緩沖液（New Englang Biolabs cat. no. M0267
2016年12月10日，國際學術權威刊物Cell出版集團旗下子刊《Molecular Plant》在線發表了浙江大學和清華大學合作的一項最新研究成果，題為“Turnip yellow mosaic virus P69 interacts with and suppresses GLK transcr
NISC文獻編號：C2017-029植物天然抗性巨噬細胞蛋白（Nramp）家族在重金屬脅迫中起著重要的作用。然而，現有研究幾乎沒有發現Nramps在重金屬富集植物 東南景天中的功能特征。2017年，中國林科院亞熱帶林業研究所卓仁英研究員課題組在Scientific Reports上發表了題目為“Se
生物芯片技術是隨著"人類基因組計劃"(human genome project, HGP)的進展而發展起來的，它是90年代中期以來影響最深遠的重大科技進展之一，它融微電子學、生物學、物理學、化學、計算機科學為一體的高度交叉的新技術，具有重大的基礎研究價值，又具有
摘要：基因芯片技術是90年代中期以來快速發展起來的分子生物學高新技術，是各學科交叉綜合的嶄新科學。其原理是采用光導原位合成或顯微印刷等方法，將大量DNA探針片段有序地固化予支持物的表面，然后與已標記的生物樣品中DNA分子雜交，再對雜交信號進行檢測分析，就可得出該樣品的遺傳信息。基因芯片技術目前國內
基因芯片技術及其研究現狀和應用前景生物芯片技術是隨著“人類基因組計劃”（human genome project，HGP）的進展而發展起來的，它是90年代中期以來影響最深遠的重大科技進展之一，它融微電子學、生物學、物理學、化學、計算機科學為一體的高度交叉的新技術，具有重大的基礎研究價值，又具
摘要：基因芯片技術是90年代中期以來快速發展起來的分子生物學高新技術，是各學科交叉綜合的嶄新科學。其原理是采用光導原位合成或顯微印刷等方法，將大量DNA探針片段有序地固化予支持物的表面，然后與已標記的生物樣品中DNA分子雜交，再對雜交信號進行檢測分析，就可得出該樣品的遺傳信息。基因芯片技術目前國
生物芯片（biochip）是指采用光導原位合成或微量點樣等方法，將大量生物大分子比如核酸片段、多肽分子甚至組織切片、細胞等等生物樣品有序地固化于支持物（如玻片、硅片、聚丙烯酰胺凝膠、尼龍膜等載體）的表面，組成密集二維分子排列，然后與已標記的待測生物樣品中靶分子雜交，通過特定的儀器比如激光共聚焦掃描或
1月18日，中國科學院遺傳與發育生物學研究所謝旗研究員到版納植物園進行學術交流，并作了題為A mobile C2-domain protein confers salt tolerance in plant 的報告。 謝旗研究員介紹了以小鹽芥為材料開展的相關研究工作。從小鹽芥
實驗概要本實驗對水稻小G蛋白ArfGTPase激活蛋白OsA GAP在擬南芥中的功能進行了分析，首先構建了OsAGAP在擬南芥中的正義表達載體，利用農桿菌介導的真空抽濾法轉化擬南芥，篩選擬南芥陽性苗，然后用組織PCR和 Southern雜交做了檢測。實驗材料1. 所用擬南芥((Arabidopsis
浙江林學院研究人員經過10多年研究，日前成功克隆到竹子的部分成花基因，在探究竹子開花奧秘的道路上邁出了重要一步。 竹子開花問題是竹子研究領域的世界性難題。竹子的開花周期可長達60年至120年，且難以預測，使得竹子的分類和雜交育種工作難以有效開展。另一方面，竹子一開花就意味著死亡，弄清竹子開花機理可
2014年2月，由美國FLUDIGM公司生產的C1? 單細胞全自動制備系統和BioMark? HD基因分析系統正式在清華大學基因組與合成生物學平臺啟用。 C1? 單細胞全自動制備系統基于Fluidigm創新的微流體技術，能夠讓研究者們快速可靠地分離單個細胞并進行基因組分析。前所未有
實驗材料異丙基 β-D-硫代半乳糖苷試劑、試劑盒非變性裂解液非變性洗滌液非變性洗脫液苯甲基磺酰氟儀器、耗材超聲勻漿器聚丙烯柱實驗步驟3.1 非變性條件下重組激酶的純化用于磷酸化篩選的激酶必須是可溶和有活性的，且無其他激酶參雜的純化激酶。因此，我們可以從 cDNA 表達文庫中，大量生產和純化組氨酸標記
實驗材料 異丙基 β-D-硫代半乳糖苷試劑、試劑盒 非變性裂解液非變性洗滌液非變性洗脫液苯甲基磺酰氟儀器、耗材 超聲勻漿器聚丙烯柱實驗步驟 3.1 非變性條件下重組激酶的純化用于磷酸化篩選的激酶必須是可溶和有活性的，且無其他激酶參雜的純化激酶。因此，我們可以從 cDNA
實驗材料：異丙基 β-D-硫代半乳糖苷 試劑、試劑盒：非變性裂解液
實驗概要本實驗對水稻、擬南芥及楊樹的TLP基因表達模式進行了分析，為進一步研明植物中TLP基因的功能奠定基礎。實驗步驟1. 水稻TLP基因的RT-PCR分析 1) 植物材料選取水稻的根、莖、葉、花和種子的新鮮組織用于RNA的提取。水稻材料采集后，用液氮速凍，以保證RNA不被降
RT-PCR定義：是指對組織或細胞的總RNA進行抽提，把RNA反轉錄為cDNA，然后設計目的基因引物進行PCR，瓊脂糖電泳并數碼拍照，分析電泳條帶灰度值，判斷目的基因mRNA轉錄水平的相對量的變化。 RT-PCR流程簡介 一、抽提RNA： 1、防止RNA酶污染 180℃的高溫下
除 cDNA 微陣列外，基于尼龍膜支持物的 cDNA 宏陣列方法是又一被廣泛應用的大規模基因表達數據的收集方法。從新基因的發現到基因表達譜的分析， cDNA 宏陣列被應用于分子生物學研究領域的各個方面。盡 管 cDNA 宏陣列的點陣密度低于微陣列，但由于應用靈敏度較高的同位素標記的 cDNA 探針，
一種無酚/無氯仿組織研磨從熱帶木本植物中提取核酸的方法概述：木本熱帶植物中含有大量復雜的有機化合物，這些有機化合物會抑制提取RNA或DNA所需的化學程序，從而不利于后續研究及應用，如RNA測序和基因表達分析。為了克服這個問題，研究人員必須使用CTAB / PVP緩沖液的提取方案，而不能使用市售的
DNA微陣列技術（microarray）指在固體表面（玻璃片或尼龍膜）上固定成千上萬DNA克隆片段，人工合成的寡核苷酸片段，用熒光或其他標記的mRNA,cDNA或基因組DNA探針進行雜交，從而同時快速檢測多個基因表達狀況或發現新基因，快速檢測DNA序列突變，繪制SNP遺傳連鎖圖，進行DNA序列分析等