細胞培養常見問題解答(一)
1 冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后, 須立即放入37 °C 水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。2 細胞冷凍管解凍培養時, 是否應馬上去除DMSO?除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。3 可否使用與原先培養條件不同之培養基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基, 若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。4 可否使用與原先培養條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源, 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影......閱讀全文
細胞培養實驗——懸浮細胞培養
實驗材料凍存 HeLa S3 細胞試劑、試劑盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA儀器、耗材旋轉瓶完全培養基-525 cm2 組織培養瓶C02 培養箱Sorvall H-6000A 轉子100 ml 或 200 ml 通氣旋轉瓶和帶濾膜的瓶蓋實驗步驟1. 將含有凍存 HeLa S3 細胞的安
細胞培養技術的細胞培養方式
高等生物是由多細胞構成的整體,在整體條件下要研究單個細胞或某一群細胞在體內(in vivo)的功能活動是十分困難的。但是如果把活細胞拿到體外(in vitro)培養進行觀察和研究,則要方便得多。活細胞離體后要在一定的生理條件下才能存活和進行生理活動,特別是高等動植物細胞要求的生存條件極其嚴格,稍有不
細胞培養實驗——貼壁細胞培養
實驗材料凍存細胞試劑、試劑盒70% 乙醇PBS胰酶/EDTA儀器、耗材25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒,打開安瓿,用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起始培養基的 25 cm
動物細胞培養——細胞培養介紹
實驗方法原理目的細胞培養的評判性檢查。應用檢查常規維持的一致性;在復蘇、傳代、凍存前培養狀況的評估;對新的或實驗性情形反應的評估;確認明顯的污染物。訓練目標熟悉不同類型和不同密度的細胞培養的外觀;數碼或膠片相機的使用;滅菌物品和污染物間的區別,健康的和不健康的培養物間的區別;培養物生長階段的評估。監
細胞培養
細胞培養是一種常用的實驗室技術,其中原核或真核細胞在受控條件下生長。大規模哺乳動物細胞培養被廣泛用于生物技術中,特別是用于生產疫苗,蛋白質,酶,抗體和激素。細胞培養還用于許多研究**域,特別是在制藥**域,其中將細胞用作研究許多疾病(例如癌癥或心臟病)的模型。細胞用于靶標鑒定和驗證,基于細胞的測定法
巨噬細胞培養常用細胞培養器皿介紹
常用細胞培養器皿有培養瓶、培養板、培養皿等。常準備量是使用量的三倍。器皿應選擇透明度好,無毒,利于細胞粘附和生長的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面幾種。巨噬細胞1、液體儲存瓶:用于儲存各種配制好的培養液、血清等液體,常用規格有500ml、250ml、100ml等幾
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步,是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
細胞培養--細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中,加入10ml預熱的DMEM完全培養基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗,棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5
豬甲狀腺細胞培養實驗_細胞培養技術
實驗方法原理由于甲狀腺富含纖維性組織,所以甲狀腺的消化分離一般采用膠原酶與胰蛋白酶聯合消化法,用單一的胰蛋白酶消化效果一般;促甲狀腺激素(TSH)是培養甲狀腺細胞必備的,它能夠起到促進甲狀腺細胞生長的作用。實驗材料豬甲狀腺試劑、試劑盒F-12培養基胎牛血清胰蛋白酶膠原酶Ⅳ牛 TSH儀器、耗材眼科剪滴
骨骼肌細胞培養和肌細胞培養
骨骼肌細胞培養 1.殺死動物,無菌取大腿肌組織,切成0.3~0.5厘米小塊。 2.用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,無菌紗網或紗布濾過,合成培養基加10%小牛血清培養,為促進分化可加1%的胎汁。 3.細胞接種量為2×106/皿,接種在膠原或明膠的底物上能促進細胞分化