細胞培養實驗——貼壁細胞培養
實驗材料凍存細胞試劑、試劑盒70% 乙醇PBS胰酶／EDTA儀器、耗材25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起始培養基的 25 cm2 組織培養瓶中，輕輕搖動培養瓶，使細胞均勻分布于培養瓶中，將其放入 5% CO2 加濕培養箱中 37℃ 培養過夜。3. 吸出起始培養基，換成適當的維持培養基。將細胞放回 CO2 培養箱 37℃ 培養，每天檢查細胞是否生長至匯片。4. 如果細胞生長至匯片，吸出培養基。5. 用 PBS 或胰酶/EDTA 清洗細胞，除去細胞上殘留的血清，將洗液吸出。6. 用 37℃ 、適當體積的胰酶/EDTA 剛好覆蓋單層細胞（如對于 25 cm2 培養瓶需要 0.3 ml）。消化 30～40 s（細胞應該分開），......閱讀全文
細胞培養實驗——貼壁細胞培養
實驗材料凍存細胞試劑、試劑盒70% 乙醇PBS胰酶／EDTA儀器、耗材25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起始培養基的 25 cm
細胞培養貼壁培養的優點
●容易更換培養液；細胞緊密黏附于固相表面，可直接傾去舊培養液，清洗后直接加入新培養液。●容易采用灌注培養，從而達到提高細胞密度的目的；因細胞固定表面，不需過濾系統。●當細胞貼壁于生長基質時，很多細胞將更有效的表達一種產品。●同一設備可采用不同的培養液/細胞的比例。●適用于所有類型細胞。3. 貼壁培養
細胞培養貼壁培養的基本特性
貼壁依賴型細胞在培養時要貼附于培養（瓶）器皿壁上，細胞一經貼壁就迅速鋪展，然后開始有絲分裂，并很快進入對數生長期。一般數天后就鋪滿培養表面，并形成致密的細胞單層。
細胞培養實驗——懸浮細胞培養
實驗材料凍存 HeLa S3 細胞試劑、試劑盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶／EDTA儀器、耗材旋轉瓶完全培養基-525 cm2 組織培養瓶C02 培養箱Sorvall H-6000A 轉子100 ml 或 200 ml 通氣旋轉瓶和帶濾膜的瓶蓋實驗步驟1. 將含有凍存 HeLa S3 細胞的安
細胞培養中的不貼壁解決辦法
細胞培養中的不貼壁及分化的解決辦法 如果細胞呈現不貼壁現象，且細胞根本就不能錨定的解決辦法:1、可以在鋪有瓊脂和瓊脂糖的培養皿上克隆細胞，也可在襯有瓊脂的甲基纖維素的非組織培養用平皿制備細胞克隆。2、在這些支持物中應適當添加生長因子及添加物。3、如使用組織培養用平皿克隆細胞，應在灌制瓊脂等支持物前
特殊細胞培養實驗_球體細胞培養實驗
實驗方法原理大多數培養細胞都具有貼附在底物上生長成單層細胞的性質，如細胞長成片之后，讓細胞片與底物脫離，更換到使細胞不易貼附的底物上繼續生長時，則細胞片能卷聚成球體形，成為球體培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1. ?瓊脂鋪底的培養瓶30 ml無菌培養瓶，每
細胞培養實驗
實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞試劑、試劑盒 70% 乙醇PBS胰酶／EDTA儀器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟 1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起
細胞培養實驗
貼壁細胞培養 懸浮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞
細胞培養實驗
貼壁細胞培養 懸浮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞
動物細胞培養，為什么要細胞貼壁生長
培養細胞有3種狀態：貼壁、半貼壁、懸浮。對于貼壁生長的細胞來說，如果培養過程中發現細胞懸浮，則說明細胞生長不好或者死亡。對于另兩類細胞來說，懸浮沒什么不可以。 細胞貼壁生長時細胞生長的屬性，貼壁生長的細胞還會抑制其增殖和活性，所以人們還要通過用稀釋，分離，蛋白酶處理等方法使它們繼續生長繁殖
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步，是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
結締組織類細胞培養實驗——巨噬細胞培養實驗
實驗方法原理巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞容易獲得，便于培養，并可進行純化。但屬不繁殖型細胞群，難以長期生存，好的條件下僅能生活2~3 周，因之多用作初代培養。巨噬細胞也能建成無限細胞系；大多來自小鼠，如P388D-1、J774A.1、RAW
大鼠肝星狀細胞培養實驗——細胞培養技術
大鼠肝星狀細胞原代培養可以：（1）用于細胞保種；（2）用于分子生物學研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料雄性 SD 大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM
豬甲狀腺細胞培養實驗_細胞培養技術
實驗方法原理由于甲狀腺富含纖維性組織，所以甲狀腺的消化分離一般采用膠原酶與胰蛋白酶聯合消化法，用單一的胰蛋白酶消化效果一般；促甲狀腺激素(TSH)是培養甲狀腺細胞必備的，它能夠起到促進甲狀腺細胞生長的作用。實驗材料豬甲狀腺試劑、試劑盒F-12培養基胎牛血清胰蛋白酶膠原酶Ⅳ牛 TSH儀器、耗材眼科剪滴
腫瘤細胞培養實驗
腫瘤細胞培養實驗可用于：（1）研究腫瘤的發生機理；（2）研究生物學行為；（3）研究抗腫瘤藥物。實驗方法原理腫瘤組織及細胞在模擬體內生長環境的條件下、與一般組織細胞一樣、也能夠生長發育乃至繁殖、為研究癌變機理、抗癌藥檢測、腫瘤分子生物學提供大量的實驗材料。實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒培養液Hanks胰
傳代細胞培養實驗
實驗方法原理當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一方面細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面培養基內的營養物不足和代謝物積累不利于細胞生長甚至發生中毒，如果不及時的減少細胞密度，細胞將逐漸衰老死亡。因此需要將培養物按照比例重新接種到新的培養器皿（瓶）內進行
特殊細胞培養實驗
實驗方法原理 二倍體細胞來源體內二倍體細胞，也即正常細胞的初代培養。初代培養細胞成功后能始終保持二倍體細胞性狀，便成為二倍體細胞培養。二倍體細胞雖不難培養，但欲求長期呈旺盛地增殖生長、并保持二倍體細胞性狀，亦非易事。為此必須采取一些有效的措施，一是低溫凍存，二是妥善的培養方法。用反復傳代的方法以求獲
傳代細胞培養實驗
實驗方法原理 當初代培養成功，細胞生長增殖形成單層細胞后，進而擴展匯合，占滿一切空間，此時需要進行分離培養。這一操作稱傳代或再培養。如拖延傳代，細胞會因增殖過度，培養基營養枯竭和代謝產物積累而發生中毒。80%匯合或剛匯合細胞是理想傳代階段。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 Hanks胰蛋白酶EDTA培養液
特殊細胞培養實驗
一、二倍體細胞培養法 加支持物培養法 單細胞分離培養法 多孔塑料培養板單細胞克隆法 球體細胞培養實驗 微載體細胞培養法 懸浮培養法 ? ? ? ? ? ?
羊水細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞，可在體外培養用以檢驗胎兒核型。 試劑、試劑盒 碘酒 酒精 營養液
傳代細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一方面細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面培養基內的營養物不足和代謝物積累不利于細胞生長甚至發生中毒，如果不及時的減少細胞密度，細胞將逐漸衰老死亡
腫瘤細胞培養實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 培養液Hanks胰蛋白酶EDTA膠原酶儀器、耗材 培養瓶離心管實驗步驟 一、成纖維細胞排除法1. ?機械刮除法?是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭（用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲），或裹少許脫脂棉制成，裝入試管中高壓滅菌后備用（也可用特制電熱燒灼器刮除）。刮除程序為（1）標記鏡下
羊水細胞培養實驗
實驗方法原理 羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞，可在體外培養用以檢驗胎兒核型。試劑、試劑盒 碘酒酒精營養液血清秋水仙素醋酸甲醇儀器、耗材 棉簽棉球鑷子穿針培養瓶實驗步驟 1. ?抽取羊水無菌抽取羊水10～20 ml，立即注入無菌離心管中；2. ?離心分離1000 轉/分，離心10 分鐘，去上清，留0.5
羊水細胞培養實驗
實驗方法原理羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞，可在體外培養用以檢驗胎兒核型。試劑、試劑盒碘酒酒精營養液血清秋水仙素醋酸甲醇儀器、耗材棉簽棉球鑷子穿針培養瓶實驗步驟1. ?抽取羊水無菌抽取羊水10～20 ml，立即注入無菌離心管中；2. ?離心分離1000 轉/分，離心10 分鐘，去上清，留0.5 ml；
羊水細胞培養實驗
羊水細胞培養實驗實驗方法原理羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞，可在體外培養用以檢驗胎兒核型。 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒碘酒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?酒精 ? ?
腫瘤細胞培養實驗
腫瘤細胞培養實驗 提高腫瘤細胞培養存活率和生長率的實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤組織及細胞在模擬體內生長環境的條件下、與一般組織細胞一樣、也能夠生長發育乃
肌組織細胞培養實驗——神經組織細胞培養實驗
實驗方法原理神經組織主要由兩種神經細胞（神經元）和神經膠質細胞組成。神經元為高度分化的細胞，在組織發生晚期已失掉增殖能力，對生存條件要求高，只有在適宜情況下，如接種在膠原底層上，或在加入神經生長因子（NGF）和膠質細胞因子時，才能生存，并可能出現一定程度的分化現象，如長出突起等，但卻難使之增殖；即使
肌組織細胞培養實驗——心肌細胞培養實驗
實驗方法原理心肌組織是最早利用的培養材料，Carrel曾長期培養過雞胚心肌組織，至今心肌仍不失為好的培養物。最常用的是雞胚心肌、小鼠、大鼠以及人胎兒心肌等都可應用。心肌是比較容易培養和生長的組織，可應用多種方法進行培養，如懸滴培養、組織塊培養和消化培養法等，主要取心室肌培養，均能獲得良好的生長效果。
肌組織細胞培養實驗——骨骼肌細胞培養實驗
實驗材料肌組織試劑、試劑盒Hanks胰蛋白酶血清胎汁儀器、耗材紗布實驗步驟動物胚或幼體的大腿肌組織為最好的培養材料。取材常用生后1~2 天的乳鼠（Wistar 大鼠更好）。1. ?殺死動物，無菌取大腿肌組織，切成0.3~0.5 厘米小塊；2. ?用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25 %胰蛋白酶消
特殊細胞培養實驗_微載體細胞培養法
實驗方法原理微載體細胞培養開始于60年代末期，最早使用離子交換凝膠作為載體，輕微攪動即可懸液在培養基中，因而可增加細胞附著的面積，達到大量培養細胞的目的。后來，根據細胞附著生長的特點，對微載體進行了改良，使其帶有電荷或其它介質，更利于細胞附著和生長。這一方法亦可用于常規量的培養，也可用于大規模的培養