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1 冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后， 須立即放入37 °C 水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。2 細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO?除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外， 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞)， 在解凍之后， 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。3 可否使用與原先培養條件不同之培養基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基， 若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基， 細胞大都無法立即適應， 造成細胞無法存活。4 可否使用與原先培養條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源， 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影......閱讀全文
無血清培養基的出現是培養基發展歷程上的一個里程碑，其一般是在合成培養基的基礎上，引入成分完全明確的或部分明確的血清替代成分，使培養基能滿足動物細胞培養的要求，又可有效的克服因使用血清所引發的問題。進入20世紀80年代后，新的無血清培養基不斷問世，人們經過研究發現，只要在培養基中增加某些適于細胞生長的
實驗概要 經歷了天然培養基、合成培養基后，無血清培養基和無血清培養成為當今細胞培養領域的一大趨勢。采用無血清培養可降低生產成本，簡化分離純化步驟，避免病毒污染造成的危害。 實驗原理 無血清培養基(serum free medi
細胞培養環境 1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受 其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響， 要求工作環境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌 操作區設在室內較少走動的內側，常規操作
一.細胞培養的基本原理 細胞培養是用酶消化法將組織碎塊分離成單個細胞，用培養基制成細胞懸液，在體外適宜條件下，使細胞生長繁殖，并保留其一定的結構和功能特性。細胞培養與組織培養、器官培養主要不同點在于原始培養的對象不同。細胞培養使用的是單個細胞懸液，組織培養使用的是組織塊(0．5～1立方毫米)或薄片
一、概述1 當前細胞培養和觀察的常用方法十九世紀起，當顯微鏡出現后，人們就開始嘗試對細胞結構進行觀察，并在二十世紀發展出細胞的培養技術。單層細胞的培養相對方便，而且商業化的顯微鏡非常適合于平面的、薄樣品的觀察，所以，在二十世紀的中后期，人們普遍采用 2D 的細胞培養方法，進行生物學的研究，以及進
1.基本原理體外細胞共培養（co-culture)是將兩種細胞（可以來自同一種組織，也可以來自不同的組織）混合共同培養，從而使其中一種細胞的形態和功能穩定表達，并維持較長時間。該技術能模擬體內生成的微環境，便于更好地觀察細胞與細胞、細胞與培養環境之間的相互作用以及探討藥物的作用機制和可能作用的靶點，
很多小伙伴在養細胞的時候，總是會出現這樣或那樣的問題，很多時候，那是因為你沒有注意以下的細節問題，現在我們一起來看看：細胞培養前的準備在您帶上手套開始細胞培養之前, 先檢查一下移液管和瓶子的數量是否充足, 以免在開始實驗后再次出入操作臺，這樣可以降低細胞污染的風險。細胞培養基也應先預熱, 選擇只預熱
一、體內、外細胞的差異和分化1、差異：細胞離體后，失去了神經體液的調節和細胞間的相互影響，生活在缺乏動態平衡的相對穩定環境中，日久天長，易發生如下變化：分化現象減弱；形態功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡；或發生轉化獲得不死性，變成可無限生長的連續細胞系或惡性細胞系。因此，培養中的細胞可視為一種
研究復雜的細胞和組織，及其信號傳導與調控可不是件容易事。而模擬細胞或組織環境，建立最接近體內天然條件的實驗系統同樣困難。這就是3D細胞培養所面臨的挑戰，3D培養系統旨在更好的模擬細胞的體內生長環境，為其創造更天然的家。近來越來越多的證據表明，3D細胞培養系統比傳統2
（一）細胞培養實驗室的設置 組織細胞培養技術與其他一般實驗室工作的主要區別在于要求保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。目前，超凈工作臺的廣泛使用，很大程度上方便了組織細胞培養工作，并使一些常規實驗室有可能用于進行細胞培養。 &n
下面為美國標準細胞庫或細胞銀行（ATCC）入庫細胞的基本要求： （1）培養簡歷 組織來源日期、物種、組織來源、性別、年齡、供體正常或異常健康狀態，細胞已傳代數等。 （2）凍存液 培養基和保護劑名稱。 &
大規模培養常用方法（貼壁培養、懸浮培養與固定化培養）-1根據動物細胞的類型，可采用貼壁培養、懸浮培養和固定化培養等三種培養方法進行大規模培養。 一、動物細胞生長特性及培養溫度 1. 細胞生長緩慢，易污染，培養需用抗生素 2.細胞大，無細胞壁，機械強度低，環境適應性差 3.需氧少，不耐
（一）細胞培養實驗室的設置 組織細胞培養技術與其他一般實驗室工作的主要區別在于要求保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。目前超凈工作臺的廣泛使用，很大程度上方便了組織細胞培養工作，并使一些常規實驗室有可能用于進行細胞培養。 細胞培養實驗室應能進行六方面的工作：無菌操作、孵
細胞培養是用酶消化法將組織碎塊分離成單個細胞，用培養基制成細胞懸液，在體外適宜條件下，使細胞生長繁殖，并保留其一定的結構和功能特性。細胞培養與組織培養、器官培養主要不同點在于原始培養的對象不同。細胞培養使用的是單個細胞懸液，組織培養使用的是組織塊（0.5~1立方毫米）或薄片（厚0.2毫米），而器官培
細胞培養是用酶消化法將組織碎塊分離成單個細胞，用培養基制成細胞懸液，在體外適宜條件下，使細胞生長繁殖，并保留其一定的結構和功能特性。細胞培養與組織培養、器官培養主要不同點在于原始培養的對象不同。細胞培養使用的是單個細胞懸液，組織培養使用的是組織塊（0.5~1立方毫米）或薄片（厚0.2毫米），而
細胞培養環境1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受 其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響， 要求工作環境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌 操作區設在室內較少走動的內側，常規
一、腫瘤細胞培養的概述 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用腫瘤原代細胞培養基礎培養基、5～10%血清濃度、細胞培養添加劑、抗生素等等即可。或在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添
細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底（U型和V型）；培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等；根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。（1）平底和圓底（U型和V型）培養板的區別和選擇：貼壁細胞一
一、細胞培養基本概念細胞培養是指從體內組織取出細胞摹擬體內出現環境，在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下，使期生長繁殖，并維持其結構和功能的一種培養技術。 細胞培養 的培養物為單個細胞或細胞群。在醫學遺傳學研究中應用最廣泛的是外周血淋巴細胞、皮膚或纖維細胞和各種能在體外長期生長的細胞系。外周血淋
第一章 細胞培養的基本原理與技術現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術，而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系，特別是在醫藥領域的發展，細胞培養更具有特殊的作用和價值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產過程中很多是通過細胞培養來實現的。基因工程乙肝疫苗很多是以
恒溫搖床大致可分為水浴恒溫搖床和氣浴恒溫搖床。水浴恒溫搖床可分為常溫水浴恒溫搖床（室溫~100℃）和冷凍水浴恒溫搖床（常用為0~100℃，也可定制更低溫度的如：-10℃~100℃）。在運行方式上可分為往復式、回旋式和雙功能水浴恒溫搖床。氣浴恒溫搖床也可分為常溫恒溫搖床和冷凍恒溫搖床。常溫氣浴恒溫搖床
污染是細胞培養技術中面臨的主要問題。某些污染的發生往往難以察覺檢測，而且污染源能長期共存于培養體系中，這類染事實上大部分被人們忽視了。培養的細胞作為個生物體，會對培養環境以及環境中的污染物作相應的反應，造成培養細胞生物學特性的改變，而實驗結果造成潛在的威脅，而且隨著污染時間的長而增加。培養環境中的物
無血清培養基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養基。但是它們可能包含個別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎培養基加少量血清所配制的完全培養基可以滿足大部分細胞培養的要求，但對有些實驗卻
微載體細胞培養技術是細胞培養過程中常見的一種細胞培養技術。關于微載體細胞培養技術，以動物細胞為例，具體介紹如下： 一、微載體培養技術的應用 微載體培養技術于1967年被用于動物細胞大規模培養。經過三十余年的發展，該技術目前已漸日趨完善和成熟，并廣泛應用于生產疫苗、基因工程產品等。
細胞培養需要適宜的生長環境和生長溫度，這需要選擇合適的搖床或則振蕩器進行輔助。 應用 大腸桿菌培養 哺乳動物細胞培養 植物細胞培養 酵母細胞培養 真菌培養 病毒培養（昆蟲細胞培養） 培養特點 生長迅速，高轉速條件下不易被破壞，生長期后需降溫，停止細菌生長，保持活性。 易受機械力損傷，需低轉速
細胞培養需要適宜的生長環境和生長溫度，這需要選擇合適的搖床或則振蕩器進行輔助。 應用 大腸桿菌培養 哺乳動物細胞培養 植物細胞培養 酵母細胞培養 真菌培養 病毒培養（昆蟲細胞培養） 培養特點 生長迅速，高轉速條件下不易被破壞，生長期后需降溫，停止細菌生長，保持活性。 易受機械力損傷，需低轉速
大規模培養常用方法（貼壁培養、懸浮培養與固定化培養）-2CelliGen、 CelliGen PlusTM和Bioflo3000反應器是常用的貼壁培養式生物反應器，用于細胞貼壁培養時可用籃式攪拌系統和圓盤狀載體。此載體是直徑6毫米無紡聚酯纖維圓片，具很高表面積與體積比（1200cm2/g），利于
1、RPMI-1640 Medium RPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞，雜交瘤細胞的培養，是目前應用十分廣泛的培養基。主要用于懸浮細胞培養。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以
細胞培養常用培養基及基本特性1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞，雜交瘤細胞的培養，是目前應用十分廣泛的培養基。主要用于懸浮細胞培養。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細
原代培養:即第一次培養，是指將培養物放置在體外生長環境中持續培養，中途不分割培養物的培養過程。有幾方面含義： ●培養物一經接種到培養器皿（瓶）中就不在分割，任其生長繁殖； ●原代培養中的“代”并非細胞的“代”數，因為培養過程中細胞經多次分裂已經產生多代子細胞； ●原代培養過程