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    華東理工大學甲醇酵母合成生物學研究獲新進展

    華東理工大學教授張元興團隊蔡孟浩研究組,在甲醇酵母合成生物學方面的最新研究進展日前在線發表于《代謝工程》。 甲醇是當前化工產業的大宗副產物,廉價易得,且可通過甲烷氧化、二氧化碳還原實現可再生制備,作為一種潛在的優質碳源已引起廣泛關注。 研究人員通過在甲基營養型酵母——畢赤酵母中,異源重構并優化降血脂藥物洛伐他汀、降血脂藥物辛伐他汀關鍵中間體莫納可林J的生物合成途徑,使得以廉價、可再生的甲醇成為底物生產大宗或高附加值藥用化合物的酵母細胞工廠概念得以實現。同時,研究人員對不同代謝途徑節點進行了代謝途徑的模塊化設計及分配組裝,采用不同熒光標記裝載不同模塊的酵母細胞實現菌群精確測量,最終通過多細胞共培養策略在反應器上實現了洛伐他汀及莫納可林J的高效生物合成。 專家認為,該研究極大拓展了畢赤酵母作為傳統重組蛋白表達系統的應用范疇,構建了一個高效、穩定、低成本、少污染的綠色細胞工廠,為他汀類藥物的異源生物合成提供了一種新思路、新方......閱讀全文

    真核細胞表達系統的類型與常用真核細胞表達載體

    原核表達系統是常被用來研究基因功能的成熟系統,由于原核表達系統具有包涵體蛋白不易純化、蛋白修飾不完整等缺陷,人們也開始利用真核細胞表達系統來研究基因。自上世紀70年代基因工程 技術誕生以來,基因表達技術已滲透到生命科學研究的各個領域。并隨著人類基因組計劃實施的進行,在技術方法上得到了很大發展,時至今

    甲醇酵母系統表達的影響因素-1

    酵母菌是單細胞真核生物,具有生長快、易于遺傳操作、能對外源蛋白進行翻譯后加工和修飾、不產生有毒產物等特點,被認為是表達外源蛋白的合適宿主。幾種工業酵母尤其是巴氏畢赤酵母(pichia pastoris, Pp),因具有旺盛的生長力以及其它一些獨特的性質,已發展成為較成熟的蛋白生產的表達系統。

    幾種蛋白表達系統優缺點分析

    蛋白表達是指用模式生物如細菌、酵母、動物細胞或者植物細胞表達外源基因蛋白的一種分子生物學技術。蛋白表達系統是指由宿主、外源基因、載體和輔助成分組成的體系,通過這個體系可以實現外源基因在宿主中表達的目的。1、宿主。表達蛋白的生物體。可以為細菌、酵母、植物細胞、動物細胞等。由于各種生物的特性不同,適合表

    幾種蛋白表達系統優缺點分析

      蛋白表達是指用模式生物如細菌、酵母、動物細胞或者植物細胞表達外源基因蛋白的一種分子生物學技術。蛋白表達系統是指由宿主、外源基因、載體和輔助成分組成的體系,通過這個體系可以實現外源基因在宿主中表達的目的。   1、宿主。表達蛋白的生物體。可以為細菌、酵母、植物細胞、動物細胞等。由于各種生物的特性

    酵母表達外源蛋白(foreign protein)(3)

    12、蛋白降解分泌表達的目標蛋白比胞內蛋白確實容易被降解。可以嘗試以下幾種辦法:1、盡可能降低培養液的pH值減少酶活,酵母生長pH值比較廣,4~7都可以試一下;2、多試幾種蛋白添加劑,充當酶解底物(比如酵母酸);3、摸索最適下罐(搖瓶也一樣),寧可少表達點也別給降解光了。實在沒辦法,只好換菌株或做p

    異養菌轉化自養菌獲突破,這種菌將以CO2作為唯一碳源

      巴斯德畢赤酵母廣泛用于工業酶和藥物的生產。像大多數生物技術生產宿主一樣,巴斯德畢赤酵母是異養的,生長在有機原料上,這些原料在食品和動物飼料的生產中具有競爭性用途。如果將二氧化碳用作碳原料,生物技術制造業將變得更具可持續性,因為它不會消耗有機原料,并且會消耗大氣中的二氧化碳。  2019年12月1

    甲醇酵母系統表達的影響因素-2

    2、表達框的染色體整合位點和方式雖然相對于自主復制載體來講,整合性載體的轉化率較低,但由于Pp沒有天然質粒,所以設計表達載體偏向于染色體整合,通過同源重組,載體整合到細胞染色體中間。整合性載體具有表達框穩定和可控制整合位點等優越性,并且能夠發生多位點整合而獲得多拷貝。AOX1和組氨酸脫氫酶(hist

    2017年中國科學十大進展在京發布

      該項活動旨在加強對我國重大基礎研究進展的宣傳,激勵廣大科技工作者的科學熱情和奉獻精神,促進公眾更加理解、關心和支持科學,在全社會營造良好的科學氛圍。該項活動已成為我國基礎研究傳播工作的一個品牌,在科技界產生了良好反響。  1、實現星地千公里級量子糾纏和密鑰分發及隱形傳態“墨子號”衛星實現千公里級

    中科院發布2017年中國科學十大進展

      “中國科學十大進展”遴選活動由科技部高技術研究發展中心舉辦,截至2018年已舉辦13屆。研究進展由《中國基礎科學》《科技導報》《中國科學院院刊》《中國科學基金》和《科學通報》五家編輯部推薦,由兩院院士、973計劃顧問組和咨詢組專家、973計劃項目首席科學家、國家重點實驗室主任等專家學者經過初選和

    科學大咖帶你看懂2017年度中國科學十大進展

      科技部2月27日在北京公布了“2017年度中國科學十大進展”:實現星地千公里級量子糾纏和密鑰分發及隱形傳態;將病毒直接轉化為活疫苗及治療性藥物;首次探測到雙粲重子;實驗發現三重簡并費米子;實現氫氣的低溫制備和存儲;研發出基于共格納米析出強化的新一代超高強鋼;利用量子相變確定性制備出多粒子糾纏態;

    國家基金委發文:131項優選10項,每項約200萬元!

      關于2020年度國家自然科學基金委員會與巴基斯坦科學基金會合作研究項目初審結果的補充通知  2020年度,國家自然科學基金委員會(NSFC)與巴基斯坦科學基金會(PSF)繼續共同資助合作研究項目,經過公開征集,共收到項目申請149份。雙方分別初審并核對后,已發布初審通知。現接到巴方信函勘誤,最終

    甲醇酵母基因表達系統

     1 甲醇酵母表達系統的特點  1.1 宿主  七十年代巴斯德畢赤酵母曾被用于生產單細胞蛋白(SCP),有很好的發酵基礎,菌體密度可達100g/L干重。其生長培養液的組分包括無機鹽、微量元素、生物素、氮源和碳源,廉價而無毒。它能在以甲醇為唯一碳源的培養基中快速生長,其中醇氧化酶AOX——甲醇代謝途徑

    微生物所在酵母中開發CRISPR-Cas9介導多重基因組編輯技術

      漢遜酵母(Ogataea polymorpha)是一種重要的工業微生物,常被用于研究甲醇利用、自噬、過氧化物酶體生物合成和硝酸鹽同化等。除此之外,它有一個重要的特性,就是能夠通過NHEJ將多達100個拷貝的靶基因整合到基因組上,這一特性可用于過表達外源基因合成多種產物。雖然CRISPR/Cas9

    盧冠達博士開發按需生產藥物的便攜設備

      對于世界偏遠地區或發展中國家的醫生以及戰場上的醫務人員來說,要快速獲取治療患者所需要的藥物,可能是具有挑戰性的。  生物制劑藥物被用于各種各樣的治療,包括糖尿病和癌癥的疫苗與治療,通常是在大型、集中的發酵工廠內生產的。這意味著,它們必須被運送到治療地點,這可能是昂貴、耗時的,對于在供應鏈較差的地

    酵母表達外源蛋白(foreign protein)(1)

    1、 菌株用GS115表達不出蛋白,換KM71H后,大部分克隆能表達。2、溫度: 在28度和室溫下誘導表達,表達水平可能都不低。3、pH手冊上用6.0,pH提高到6.8,不表達的蛋白可能就表達出來。BMMY的pH7.0-7.5比較合適。國內外做的最好的rHSA,最適pH大概 5-6左右。pH3的時候

    羧肽酶的分離純化方法

    實驗概要本實驗以面包酵母為初始材料,制備了高純度羧肽酶Y,并對羧肽酶Y的生化性質進行了檢測。實驗原理羧肽酶Y(Carboxypeptidase   Y)是由面包酵母中分離得到的一種蛋白水解酶,它對肽和蛋白質羧基末端的各種氨基酸(包括脯氨酸)具有廣泛的水解能力,因此該酶已成為C末端分析中常用

    G418

    G418通過干擾核糖體的功能而阻斷細胞的蛋白合成G418          G418是一種氨基糖苷類抗生素 ,這種氨基糖類抗生素的結構和新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似,在分子遺傳試驗中,是穩定轉染最常用的抗性篩選試劑。它通過抑制轉座子Tn6

    1000篇氣相色譜應用文獻匯總(八)

    701 SCTB9606 0 油脂選擇性氫化催化劑的研制及氫化工藝條件的研究 702 SCTB9606 0 鹽蒿精油化學成分和殺蟲活性初探 703 SCTB9606 0 芝麻油、花生油中葵花

    氣質聯用法同時測定肉制品中的抗氧化劑和防腐劑

      在食品中加入防腐劑可以延長保存期,防止腐爛變質,而食物中的油脂極易氧化發生酸敗,并產生有毒物質,加入抗氧化劑可以預防這一過程的發生。山梨酸、苯甲酸、脫氫乙酸和對羥基苯甲酸酯類物質是國家批準可以在食品中限量添加的防腐劑[1],應用廣泛,其對細菌、真菌、霉菌、酵母等有不同程度的抑制作用。丁基茴香醚(

    白酒專用氣相色譜儀分析白酒中的化學成分

    白酒專用氣相色譜儀分析該方法采用大口徑毛細管柱(白酒專用柱),氫火焰離子化檢測器檢測。測定組分:C2~C6 脂肪酸多種組分特點:和填充柱相比,具有較高的分離能力、較快的分離速度和較好的惰性;與小口徑毛細管相比,其柱容量較大,對進樣技術要求不苛求,可避免了分流造成的歧視效應。分析時間短約為18min.

    一文看懂白酒的化學成分

      酒是多種化學成分的混合物,水和酒精是其主要成分,除此之外,還有各種有機物。這些有機物包括:高級醇、甲醇、多元醇、醛類、羧酸、酯類、酸類等。這些決定酒的質量的成分往往含量很低,約占1%~2%,但種類很多,同時其含量的配比非常重要,對白酒的質量與風味卻有著極大的影響。  酒精  酒精的學名是乙醇,乙

    食品微生物快速檢測技術研究

    食物病原微生物是食品安全的重要內容,而對其的快速檢測(驗)一直是相關研究的熱點。近年來,微生物的快速檢測和自動化研究進展迅速。依靠培養基進行培養、分離及生化鑒定的傳統方法費時費力。快速檢測及其自動化則綜合引用微生物學、化學、分子生物學、生物物理學、免疫學以及血清學試驗技術對微生物進行分離、檢測、鑒定

    高效液相色譜法測定B1維生素的含量

      維生素B也稱作維他命B,是B族維生素的總稱,它們常常來自于相同的食物來源,如酵母等。維生素B是身體內新陳代謝必需的一環,每種維生素B都參與了關鍵的代謝反應,通常以輔酶的形式存在。   維生素B都是水溶性維生素,它們有協同作用,調節新陳代謝,維持皮膚和肌肉的健康,增進免疫系統和神經系統的功能,促進

    聚合酶鏈反應(PCR)技術的發展和應用-2

    第五節 PCR各處應用模式  一、兼并引物(Degenerate Primer)PCR  密碼子具有兼并性,如表22-4,單以氨基酸順序推測編碼的DNA序列是不精確的,但可以設計成對兼并引物,擴增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時寡核苷酸中核苷酸序列可以改變,但核苷酸的數量應相同。兼并度越低,

    PCR各處應用模式

    一、兼并引物(Degenerate Primer)PCR  密碼子具有兼并性,如表22-4,單以氨基酸順序推測編碼的DNA序列是不精確的,但可以設計成對兼并引物,擴增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時寡核苷酸中核苷酸序列可以改變,但核苷酸的數量應相同。兼并度越低,產物特異性越強,設計引物時應盡

    PCR各處應用模式

    一、兼并引物(Degenerate Primer)PCR  密碼子具有兼并性,如表22-4,單以氨基酸順序推測編碼的DNA序列是不精確的,但可以設計成對兼并引物,擴增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時寡核苷酸中核苷酸序列可以改變,但核苷酸的數量應相同。兼并度越低,產物特異性越強,設計引物時應盡

    畢赤酵母表達(pichia pastoris expression )實驗手冊(5)

    3.5 Pichia酵母表達直接PCR鑒定重組子的方法3.5.1 模板的處理:1. 平板上的菌落長到肉眼可見時(約12小時);2. 將除了模板之外的其它PCR反應液的組分準備好,并分裝。引物最好使用Kit中已有的檢測專用的引物,或者或者一條使用載體上的引物,一條使用基因的特異性引物(這樣做可以鑒定非

    噬菌體展示技術研究RNA結合蛋白實驗

    實驗方法原理噬菌體展示技術是將外源基因與噬菌體的表面蛋白基因融合,在融合了外源基因的噬菌體顆粒的表面就會表達相應的外源蛋白,即外源基因編碼的蛋白被展示在噬菌體顆粒的表面。實驗材料載體tRNA抗體寡核苷酸試劑、試劑盒抗生素儲存液BCIP葡萄糖儲存液X-Gal磁珠洗液蛋白酶抑制劑RNase 抑制劑TEN

    微生物學檢驗基本技術(1)

    第一節 微生物形態學檢查   細菌形態學檢查是細菌檢驗的重要方法之一,它是細菌分類和鑒定的基礎,可根據其形態、結構和染色反應性等,為進一步鑒定提供參考依據。 一、顯微鏡檢查   由于細菌個體微小,肉眼不能看到,必須借助顯微鏡的放大才能看到。一般形態和結構可用光學顯微鏡觀察,其內部的超微結構則需用電

    微生物學檢驗基本技術(1)

    隨著現代醫學及相關科學技術的發展,各學科相互交叉和滲透,醫學微生物學檢驗技術已深入到細胞、分子和基因水平,許多新技術、新方法已在臨床微生物實驗室得到廣泛應用。醫學微生物學實驗室的基本任務之一是利用微生物學檢驗技術,準確、快速檢驗和鑒定臨床標本中的微生物,并對引起感染的微生物進行耐藥性監測,為臨床對感

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