世界首例利用鋅指核酸酶技術培育的內源性基因敲除豬誕生
中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院賴良學教授領導的研究團隊與美國密歇根大學心血管研究中心陳育慶教授領導的研究團隊合作，首次將鋅指核酸酶基因打靶技術應用于豬內源性基因敲除研究，成功敲除了豬內源性PPARγ基因。此研究在世界上首次建立了對糖尿病和心血管并發癥的研究有重要應用價值的PPARγ基因敲除豬模型。 目前，敲除大動物的內源性基因只有通過體細胞基因敲除結合克隆技術才能夠實現。由于體細胞基因敲除效率極低，導致通過克隆技術獲得敲除基因的大動物模型難度極大、效率極低。鋅指核酸酶是一種可在DNA特定位置產生雙鏈斷裂的工程蛋白。此前，在一些低等動物的研究證明，鋅指核酸酶技術可極大地提高基因敲除效率，曾被美國《科學》雜志評為2009年生命科學領域十大創新技術之一。但在大動物中，該技術途徑一直沒有成功。 此次研究中，研究者將鋅指核酸酶技術應用于豬體細胞的基因敲除，使體細胞基因敲除的效率由原來的10-6提高到大于4%，并結合克隆......閱讀全文
世界首例利用鋅指核酸酶技術培育的內源性基因敲除豬誕生
中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院賴良學教授領導的研究團隊與美國密歇根大學心血管研究中心陳育慶教授領導的研究團隊合作，首次將鋅指核酸酶基因打靶技術應用于豬內源性基因敲除研究，成功敲除了豬內源性PPARγ基因。此研究在世界上首次建立了對糖尿病和心血管并發癥的研究有重要應用價值的PPARγ基因敲除豬
如何選擇基因敲除動物模型制備技術？
動物模型是現代生命科學研究的重要工具，特別是基因工程小鼠和大鼠，在基因功能研究、人類生理病理機制研究及新藥研發中起著不可替代的作用。近幾年來，制 備動物模型的基因修飾技術層出不窮，這不僅包括傳統ES打靶、TALEN、CRISPR/Cas9，?還有TetraOne基因敲除新技術。如此繁 多的技
Nature方法：大型單基因敲除人類單倍體細胞庫
由奧地利科學院和維也納Haplogen的研究人員領導的一個研究小組，利用一種稱之為“基因捕獲”( gene trap)的技術構建出了一個人類單倍體細胞庫，該細胞庫中包括有3000多種細胞系，每個細胞系都具有一種不同的突變基因。這項研究工作發布在8月25日的《自然方法》(Nature Me
科學家創建世界首例生物節律紊亂體細胞克隆猴模型
自然界中大部分生物都擁有按時間節奏調節自身活動的本領，即“生物節律”。生物節律是生物體內在的時間控制系統，是生物體內多種生理學和生物化學過程波動的基礎。生物節律系統在維持機體內在的生理功能（如睡眠/覺醒系統、體溫、代謝和器官功能等）、適應環境的變化等方面扮演著重要角色。生物節律紊亂與睡眠障礙、神
GDNF的生物學效應GDNF的基因敲除動物模型
gdnf-、gfmα1-或vet-knockout小鼠表現出相同的表型，即腎臟發育不全和胃腸道神經支配缺失，出生后不久全部死亡。gdnf-knockout大鼠中腦DA能神經元無明顯改變，可能有其他NT代償GDNF的作用。腰部脊髓運動神經元僅減少21%，頸上交感神經節中減少23%的神經元，睫狀節神經元
中科院發布世界首例生物節律紊亂體細胞克隆猴模型
自然界中大部分生物，從簡單的單細胞生物，到復雜的哺乳動物，都擁有按時間節奏調節自身活動的本領，稱之為生物節律。生物節律是生物體內在的時間控制系統，是生物體內多種生理學和生物化學過程波動的基礎。生物節律系統在維持機體內在的生理功能（如睡眠/覺醒系統、體溫、代謝和器官功能等）、適應環境的變化等方面
中國科學家創建世界首例生物節律紊亂體細胞克隆猴模型
自然界中大部分生物，從簡單的單細胞生物，到復雜的哺乳動物，都擁有按時間節奏調節自身活動的本領，稱之為生物節律。生物節律是生物體內在的時間控制系統，是生物體內多種生理學和生物化學過程波動的基礎。生物節律系統在維持機體內在的生理功能（如睡眠/覺醒系統、體溫、代謝和器官功能等）、適應環境的變化等方面扮
我國學者構建世界首個基因敲除體細胞克隆狗模型
近日，中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院、北京希諾谷生物科技有限公司與中國農業大學合作，將CRISPR/Cas9與體細胞核移植技術相結合，成功構建出世界首個基因敲除體細胞克隆狗模型。該研究成果以封面文章發表在Journal of Genetics and Genomics雜志上。基因敲除體細胞克
基因敲除簡介
基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較成功的有基因
基因敲除技術
一．概述：基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA 同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較
基因敲除技術
一．概述：基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA?同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較
生物物理所利用體細胞TALEN技術實現線蟲條件性基因敲除
模式動物線蟲擁有豐富的遺傳資源。利用線蟲為模型的研究在過去的四十多年為生物醫學的諸多領域作出了重要貢獻。然而，不能在特定位點對線蟲野生型基因組進行條件性突變一直是線蟲實驗系統的技術瓶頸。2013年8月，Nature Biotechnology雜志發表中國科學院生物物理研究所歐光朔課題組利用T
心血管系疾病的動物模型
心血系系疾病的動物模型 （一）動脈粥樣硬代模型 常選用兔、豬、大鼠、雞、鴿、猴和犬等動物。常用的復制方法有下面幾種（包括高血脂模型）： 1．高膽固醇、高脂肪飼料喂養法：是目前比較常用的方法，特點是死亡率低，可長期觀察，但費時久。一般在家兔、鴿、雞等，經數周喂養就可產生明顯的高脂血癥，經數月就能
基因靶向的基因敲除
實驗步驟構建重組基因載體絕大多數的基因敲除策略都是基于同源重組的機制，其基因載體包括載體骨架、靶基因同源序列和突變序列及選擇性標記基因等非同源序列，其中同源序列是影響同源重組效率的關鍵因素。用電穿孔顯微注射方法把重組DNA轉入受體細胞（一般是胚胎干細胞）核內。同源重組基因重組時以載體的同源序列取代染
敲除這個基因位點，我們就不會患上心血管疾病？
在過去的十年中，科學家們在數十億人的DNA中發現了一種神秘的“基因幽靈”，無論采用什么飲食，增加運動或者醫療手段，都會增加人體患上心臟病，動脈瘤或中風的風險。 近期，來自Scripps研究所的研究人員通過精確切割基因組中的DNA罪魁禍首，揭開了這一醫學之謎，取得了重大突破，防止與這些破壞性疾病
克隆猴“五兄弟”失眠了！
節律紊亂克隆猴寶寶。中科院神經所供圖 還記得去年萌翻了全世界的世界首批體細胞克隆猴“中中”和“華華”嗎？最近，兩個姐妹有了五個“小兄弟”。 不過，跟它們的“姐姐”不同，這五只小克隆猴身上所肩負的使命要更加特殊一些，它們將為揭開人類健康的未解之謎作出貢獻。 1月24日，中國科學院腦科學與智能技術
基因敲除技術簡介
動物實驗和實驗動物都要求達到實驗室操作規范（good laboratory practice, GLP）和標準操作程序（standard operating procedure, SOP）這些規范和操作對實驗動物和實驗室條件，工作人員素質，技術水平和操作方法都要求標準化。所有藥物的安全評價試
控制基因敲除法
【探針技術用于檢測由siRNA介導的基因調制】 為了研究基因功能，科學家們常常會有針對性地關斷某些特定的基因。 而要驗證這種基因沉默的有效性, 就需要運用適當的具特異性的檢測方法。理想的檢測方法不僅要測量準確, 而且還要能讓細胞保持完好無損。 ? 利用諸如RNA(核糖核酸)技
基因敲除技術簡介
基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較成功的有基因
基因敲除技術簡介
基因敲除是一種遺傳工程技術，是指通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。基因敲除針對某個序列已知但功能未知的序列，改變生物的遺傳基因，令特定的基因功能喪失作用，從而使部分功能被屏蔽，并可進一步對生物體造成影響，進而推測出該基因的生物學功能。基因敲除技術克服了隨機整合的盲目性和偶然性，是一種理
基因敲除的定義
基因敲除(geneknockout),是指對一個結構已知但功能未知的基因,從分子水平上設計實驗,將該基因去除,或用其它順序相近基因取代,然后從整體觀察實驗動物,推測相應基因的功能。這與早期生理學研究中常用的切除部分-觀察整體-推測功能的三部曲思想相似。基因敲除可中止某一基因的表達外,還包括引入新基因
什么是基因敲除？
基因敲除(gene knock-out)是利用細胞染色體DNA可與外源性DNA同源序列發生同源重組的性質，使特定靶基因失活，以研究該基因的功能.基因敲入(gene knock-in)是通過同源重組用一種基因替換另一種基因，以便在體內測定它們是否具有相同的功能，或將正常基因引入基因組中置換突變基因以達
II型糖尿病研究需要使用的動物模型介紹
今天師兄告訴我，如果我們實驗室要研究糖尿病，應該主要研究2型糖尿病，這讓我聽到之后愣在了那里，原來在研究糖尿病上面我還年輕著呢（暗自說道）。那，2型糖尿病是不是也需要相對應的動物模型來支持研究呢？師兄能幫忙講講嘛？（我厚著臉皮問道）。當然了，研究2型糖尿病怎么能少得了其相關的動物模型呢？你上周已經掌
動物所利用CRISPR技術建立血管性血友病小型豬模型
由中國科學院動物研究所研究員周琪領導的研究團隊，首次利用CRISPR/Cas9技術獲得了vWF基因敲除豬，從而建立了血管性血友病的小型豬模型，相關研究成果于1月31號在線發表在Cell Research雜志上。 豬是我國最重要的家畜品種，同時也是生物醫學研究中重要的模式動物。豬在心血管
推開GPCR靶點與代謝性疾病研究的敲門磚動物模型
基因編輯技術最具代表性的就是在人類疾病動物模型制備方面的應用。隨著經濟發展，代謝性疾病的發病率逐年增高，其中心血管疾病導致的死亡占我國居民全部死因的40%以上，死亡率居于首位[1]。通過構建包括心血管疾病、糖尿病等代謝領域基因編輯小鼠模型，并進行多種深入研究，可以找到相關疾病的潛在治療靶點，研
2型糖尿病大鼠動物模型
1. 高脂＋STZ法：ＳＤ大鼠購進后,適應環境2周。隨機分為3組:正常對照組、高脂飲食組和高脂飲食+ＳＴＺ組,每組10只。正常對照組:喂以普通飲食,其中碳水化合物60%,蛋白質22%,脂肪10%,其他8%。高脂飲食組及糖尿病組:喂以高脂飲食,其中碳水化合物40%,蛋白質13%,脂肪40%,其他7%。
糖尿病動物模型原理及方法
StzSTZ?誘發糖尿病動物模型原理如下:STZ對一定種屬動物的胰島β細胞有選擇性破壞作用，能誘發許多動物產生糖尿病，一般采用大鼠和小鼠制造動物模型。國外有學者報道選用雄性大鼠制造模型的成模率明顯高于雌性大鼠。1型糖尿病與2型糖尿病動物模型的制備與STZ注射的劑量有關系：大劑量注射時，由于直接引起胰
糖尿病動物模型原理及方法
STZ?誘發糖尿病動物模型原理如下:STZ對一定種屬動物的胰島β細胞有選擇性破壞作用，能誘發許多動物產生糖尿病，一般采用大鼠和小鼠制造動物模型。國外有學者報道選用雄性大鼠制造模型的成模率明顯高于雌性大鼠。1型糖尿病與2型糖尿病動物模型的制備與STZ注射的劑量有關系：大劑量注射時，由于直接引起胰島β細
基因敲除的技術應用
基因敲除技術主要應用于動物模型的建立，而最成熟的實驗動物是小鼠，對于大型哺乳動物的基因敲除模型還處于探索階段。近年來，牛、羊、豬、猴等大型哺乳動物實現了基因敲除。但由于狗的生殖生理較為特殊，基因敲除狗的培育難度大為增加，狗基因組的定點修飾一直未獲成功。針對這一問題，研究團隊設計了一個自體移植的策略，
條件基因敲除的定義
中文名稱條件基因敲除英文名稱conditional gene knockout定 義使靶基因在特定細胞類型或者特定發育階段完全喪失功能的實驗技術。應用學科遺傳學（一級學科），發育遺傳學（二級學科）