常用單抗的標記技術

RAPD標記技術

實驗概要運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(randomly ?amplifiled polymorphic ?DNA,隨機擴增的多態性DNA.)該RAPD技術建立于PCR基礎上，它是利用一系列(通常數百個)不同的隨機排列堿基順序的寡聚核苷酸單鏈(通常為十聚體)

RFLP標記技術

實驗概要DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。RFLP(Restriction ?Fragment Length ?Polymorphism,限制片段長度多態性)已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種（個體）基因組的限制性內切酶的酶

AFLP標記技術

實驗概要AFLP也是通過限制性內切酶片段的不同長度檢測DNA多態性的一種DNA分子標記技術。但AFLP是通過PCR反應先把酶切片段擴增,然后把擴增的酶切片段在高分辨率的順序分析膠上進行電泳,多態性即以擴增片段的長度不同被檢測出來(附圖)。實驗中酶切片段首先與含有與其共同粘末端的人工接頭連接,連接后的

脈沖標記技術介紹

免疫標記技術介紹

免疫標記技術是指將抗原抗體反應與標記技術相結合，將已知的抗體或抗原標記上示蹤物質，通過檢測標記物，間接測定抗原-抗體復合物的一類實驗方法。常用的標記物有酶，熒光素，放射性核素，化學發光物質及膠體金等。

PCR－SSCP標記技術

實驗概要日本Orita等研究發現，單鏈DNA片段呈復雜的空間折疊構象，這種立體結構主要是由其內部堿基配對等分子內相互作用力來維持的，當有一個堿基發生改變時，會或多或少地影響其空間構象，使構象發生改變，空間構象有差異的單鏈DNA分子在聚丙烯酰胺凝膠中受排阻大小不同.因此，通過非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(

親和標記技術的應用

有人用親和標記技術直接鑒別結合部位的氨基酸殘基。其做法是將一化學性質活躍的側鏈連接到半抗原上，當此帶有側鏈的半抗原與相應抗體結合后，側鏈即與鄰近的氨基酸形成共價鍵，也就是說，結合部位鄰近的氨基酸殘基被標記了。也有人用疊氮基作側鏈連接到半抗原上，并與相應抗體結合，經紫外線照射后，疊氮基轉變成活化的硝基

常用單抗的標記技術

目前動物用單抗，在動物疫病診斷和檢疫、妊娠檢測、性別鑒定等方面有廣泛的應用，大多以診斷試劑(盒)的形式提供，其中核心試劑為標記的單抗。下面將介紹最常用的幾種標記技術。1．酶標記(1)辣根過氧化物酶(HRP)標記辣根過氧化物酶(HRP)標記單抗和多克隆抗體的常用方法是過碘酸鈉法。其原理是HRP的糖基用

免疫金標記技術原理

免疫金標記技術原理：膠體金顆粒表面負電荷與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。膠體金對蛋白質有很強的吸附功能，蛋白質等高分子被吸附到膠體金顆粒表面，無共價鍵形成，標記后大分子物質活性不發生改變。金顆粒具有高電子密度的特性。金標蛋白在相應的配體處大量聚集時，在顯微鏡下可見黑褐色顆粒或肉眼可見紅

RAPD標記技術的原理

RAPD標記（Random amplifiedpolymorphim DNA , RAPD）是由美國人Williams和Welsh等于1990年利用PCR技術發展起來的一種DNA多態性標記。它是利用隨機引物對目的基因組DNA進行PCR擴增，產物經電泳分離后顯色，分析擴增產物DNA片段的多態性，此即反