選擇最佳固定液標準是: (1)最好地保持細胞和組織的形態結構; (2)最大限度地保存抗原的免疫活性。一些含重金屬的固定液在免疫組化和細胞化學技術中是禁用的; (3)不要用可能帶有自發熒光的固定劑,如帶有苦味酸的固定劑,還有甲醛升汞固定液,會使上皮細胞產生非特異性熒光; (4)固定劑的選擇、固定時間、溫度和PH值都會影響實驗結果。 單純固定液(1)4%中性甲醛固定液:最常用的固定液,能滿足常規HE及免疫組化、PCR等工作(Job)。中性甲醛是以PH7.2-7.4的磷酸緩沖液為溶劑配制的,其固定效果及對組織抗原性的保存均優于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后應密封并保存在陰涼處,保存時間不超過一個月。 甲醛(40%) 100ml 無水磷酸氫二鈉 6.5g 磷酸二氫鈉 4.0g 蒸餾水 900ml (2)乙醇固定液:使用時以80%-95%的濃度為宜,具有硬化、固定、脫水等作用,對組織滲透力較弱,因此很少單獨使用,但其保存組織中的核酸......閱讀全文
免疫熒光技術是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。它是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光基團,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。利用熒光顯微鏡可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質和定位,以及
取 材 取材是制作切片程序中的首要步驟,取材不當,將直接影響病理診斷和科研工作的效果。組織標本的選用非常重要,不能隨意的切取組織來制作組織切片,否則病理檢驗的結果是不會令人滿意的。 一、取材工具:取材刀具必須鋒利。切取標本不應該擠壓和揉擦,不應使用有鉤鑷子或血管鉗等
細胞分布 我們之前比較了iCELLis Nano生物反應器高壓縮固定床(4m2)和低壓縮固定床(2.67m2)中的細胞分布,發現在低壓縮中,細胞分布更加均衡。在高壓縮固定床中,細胞分布有較大的差異,取決于計數的細胞來自哪一層(相比頂部,底部的細胞量要高3到4倍)。盡管在低壓
取 材 取材是制作切片程序中的首要步驟,取材不當,將直接影響病理診斷和科研工作的效果。組織標本的選用非常重要,不能隨意的切取組織來制作組織切片,否則病理檢驗的結果是不會令人滿意的。一、取材工具:取材刀具必須鋒利。切取標本不應該擠壓和揉擦,不應使用有鉤鑷子或血管鉗等手術
流式細胞儀技術,主要是測量群體中單個細胞經適當染色后其成分所發出的散射光和熒光,經染色的細胞在懸液中以單行流過高強度光源的焦點,當每個細胞經過焦點時,發出一束散射光/或熒光。它們經過過濾及光鏡系統收集到達一個光電檢測器(光電倍增管或一個固態裝置),光檢測器把散射光定量轉化成電
IHC/ICC實驗中使用的所有樣本必須經過固定,以維持組織形態,并保留目的分子的抗原性。固定改變了組織的化學組成,因此往往需要在維持組織結構和保留表位之間進行折衷。細胞或組織的不完全固定(固定不足)可能造成組織內目的蛋白的快速水解,并降低了特異的免疫反應性。然而,過度的固定(固定過度)可能導致表
IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚?它們都是用于定位檢測抗原表達的免疫檢測技術,由于技術相對簡單且直觀,在科研和臨床上都得到了大量使用。但是影響最終檢測效果的變量非常多;每一個具體的檢測都會遇到多個需要調整的變量。具體到選擇何種方法來保存組織樣本;固定標本該用醇還是醛;如何選擇最合適的一抗;抗
IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚?它們都是用于定位檢測抗原表達的免疫檢測技術,由于技術相對簡單且直觀,在科研和臨床上都得到了大量使用。但是影響最終檢測效果的變量非常多;每一個具體的檢測都會遇到多個需要調整的變量。具體到選擇何種方法來保存組織樣本;固定標本該用醇還是醛;如何選擇最合適的一抗;抗原修
Alex Chatel 和 Jean-Christophe Drugmand本文將探討從實驗室到臨床的傳統路徑,以及scale-X 固定床技術如何提供一種替代解決方案,以滿足商業化需求。有報告依此預計,到2023年,基因治療市場將達到30億美元,復合年增長率 (CAGR) 達34%,這使其成為生
一、固定劑大多數神經激素、肽類物質為水溶性,在用于免疫細胞化學研究之前,常需固定。但肽類和蛋白質的物理、化學性質不同,因而對不同的固定方法或固定劑的反應也不盡相同。某些固定劑甚至可同時破壞和/或保護同一抗原的不同抗原決定簇。因此,在進行免疫細胞化學研究之前,很有必要了解所要研究的物質(蛋白質或肽類)
當純凈甲醛在水溶液中溶解時,會自動聚合成長鏈的多聚甲醛。其長度不一,在水中同時進行聚合與解聚反應。甲醛易溶于脂類物質,因此能穿過細胞膜進入細胞內。用多聚甲醛固定細胞時,能使細胞內的
一、固定劑 大多數神經激素、肽類物質為水溶性,在用于免疫細胞化學研究之前,常需固定。但肽類和蛋白質的物理、化學性質不同,因而對不同的固定方法或固定劑的反應也不盡相同。某些固定劑甚至可同時破壞和/或保護同一抗原的不同抗原決定簇。因此,在進行免疫細胞化學研究之前,很有必要了解所要研究的物質(蛋白質或肽
一、固定劑 大多數神經激素、肽類物質為水溶性,在用于免疫細胞化學研究之前,常需固定。但肽類和蛋白質的物理、化學性質不同,因而對不同的固定方法或固定劑的反應也不盡相同。某些固定劑甚至可同時破壞和/或保護同一抗原的不同抗原決定簇。因此,在進行免疫細胞化學研究之前,很有必要了解所要研究的物質(蛋白質或肽
我們之前在Pall iCELLis?固定床生物反應器中,以小規模和商品化規模,進行了病毒載體(慢病毒、腺病毒以及腺相關病毒)的生產。最近,一家名為Univercells的比利時公司推出了一種新型固定床生物反應器,其具有相同的細胞生長表面基質材料,但固定床結構與iCELLis生物反應器所使用的結構
rVSV-ZEBOV疫苗無血清生產:一次性使用固定床生物反應器 vs 微載體攪拌罐摘要 埃博拉病毒病(EVD)是一種致命性疾病,近年來偶發于非洲大陸,并導致嚴重的疫情。rVSV-ZEBOV是一種重組水泡口炎病毒結構,其中的天然病毒糖蛋白替換為埃博拉病毒(Zaire)糖蛋白。免疫被認為是預防
現代的經濟在發展、科研技術也在發展,我們的生活水平質量在提高,我們對實驗技術的視野也是同樣的在不斷開拓。elisa試劑盒為您細說免疫熒光實驗的具體方法步驟,上海勁馬精益求精,力求銷售的高質量試劑產品能夠為科研事業做出貢獻。今天,我們要給朋友們講說的也是相關實驗方法,免疫熒光技術是在免疫學、生物化學和
實驗方法原理 實驗步驟 1. 取材 對一般的動物組織取材的要求如下:(1) 標本材料要新鮮,取材速度要快:由于生物組織離體后,細胞將會立即釋放出各種水解酶而引起細胞自溶,使其微細結構發生改變而產生假象,故要盡量保持材料的新鮮,經解剖、手術或活檢取材后迅速投入固定液內,以盡量保持細
實驗步驟1. 取材 對一般的動物組織取材的要求如下:(1) 標本材料要新鮮,取材速度要快:由于生物組織離體后,細胞將會立即釋放出各種水解酶而引起細胞自溶,使其微細結構發生改變而產生假象,故要盡量保持材料的新鮮,經解剖、手術或活檢取材后迅速投入固定液內,以盡量保持細胞在活體狀態的結構。(2) 取材小,
實驗步驟1. 取材 對一般的動物組織取材的要求如下:(1) 標本材料要新鮮,取材速度要快:由于生物組織離體后,細胞將會立即釋放出各種水解酶而引起細胞自溶,使其微細結構發生改變而產生假象,故要盡量保持材料的新鮮,經解剖、手術或活檢取材后迅速投入固定液內,以盡量保持細胞在活體狀態的結構。(2) 取材小,
二、透射電子顯微鏡觀察方法培養細胞的取材和固定1、常規收集帖壁和懸浮細胞,置離心管中離心, 800 ~ 1000r/min , 10min 。2、用 0.01mol/L PBS 5ml 重懸細胞。3、將細胞懸液吸入有瓊脂空槽的離心管中。4、離心, 2000r/min , 15 ~ 20min ,使細
封閉式試管培養 開放式蓋玻片培養 實驗方法原理 在標準培養箱(37°C ) 中用 Lei
封閉式試管培養 開放式蓋玻片培養 實驗方法原理 在標準培養箱(37°C ) 中用 Lei
摘要scale-X 生物反應器是一種新型固定床系統,可用于貼壁和懸浮細胞系的培養。設備單元占地小,而具有相當大的表面積,從而可獲得極高細胞密度。本研究比較了在scale-X hydro生物反應器和標準微載體培養體系中進行的貼壁Vero細胞培養。兩種系統可獲得相似的單位面積細胞濃度。隨后,
一、基本原理經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞,而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色,且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據
基本原理經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞,而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色,且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據細胞
一、基本原理經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞,而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色,且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據
基本原理 經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞,而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色,且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據
基本原理 經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞,而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色,且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據
基本原理經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞,而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色,且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據細胞
流式細胞儀是檢測懸浮的單細胞或微粒的信號分析技術,被譽為實驗室的“CT”,可用于細胞凋亡檢測 、細胞分選、單細胞內細胞因子表達分析等。這里簡單介紹下流式細胞儀檢測細胞凋亡的兩種方法。第一部分 流式細胞儀 檢測細胞凋亡:Heochst 33342/PI雙染色法一、基本原理