DNA文庫的構建及其篩選
DNA文庫的構建和篩選可以用于:(1)將某生物的全部基因組DNA用限制性內切酶或機械力量切割成一定長度的DNA片段,再與適合的載體在體外重組并轉化相應的宿主細胞獲得的所有陽性菌落。 (2)采用“化整為零”策略,將龐大的基因分解成一段段,每段包含一個或幾個基因。實驗方法原理高等植物基因組的一個顯著特征是其內含有大量的 DNA 重復序列, 重復序列常位于異染色質區, 因此可能與染色體的結構有關 . 季靜等根據國際上 對基因組、染色體、結構蛋白的研究前沿, 提出染色體 DNA 平均每隔 30 kb 或螺線管平均 250 nm 存在 著特異重復序列, 稱為 YR DNA ( Yielding repeat DNA) 。實驗材料DNA試劑、試劑盒升汞MS培養基瓊脂糖EcoR IHind IIIBamH IBg lIIPst I儀器、耗材電泳儀尼龍膜實驗步驟1.水稻 DNA 的提取水稻 DNA 的提取參照 Dellaporta, Wood ......閱讀全文
DNA文庫的構建及其篩選
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 高等植物基因組的一個顯著特征是其內含有大量的 DNA 重復序列, 重復序列常位于異染色質區, 因此可能與染色體的結構有關 . 季靜等根據國際上 對基因組、染色體、結構蛋白的研究前沿, 提出染色體 DNA 平均每隔 30 kb
DNA文庫的構建及其篩選
DNA文庫的構建和篩選可以用于:(1)將某生物的全部基因組DNA用限制性內切酶或機械力量切割成一定長度的DNA片段,再與適合的載體在體外重組并轉化相應的宿主細胞獲得的所有陽性菌落。 (2)采用“化整為零”策略,將龐大的基因分解成一段段,每段包含一個或幾個基因。實驗方法原理高等植物基因組的一個顯著特征
DNA文庫的構建及其篩選
實驗材料?DNA試劑、試劑盒?升汞MS培養基瓊脂糖EcoR IHind IIIBamH IBg lII Pst I儀器、耗材?電泳儀尼龍膜實驗步驟 1.水稻 DNA 的提取水稻 DNA 的提取參照 Dellaporta, Wood 和 Hicks (1983) 法分離總基因組DNA并略有修改。 通過
建立隨機重疊DNA插入文庫實驗
下面的方案描述了鳥槍法測序的起始步驟,從靶 DNA 的剪切到用 M13 噬菌體載體構建 DNA 片段文庫,也包括斷裂靶 DNA 的兩種方法--超聲法和噴霧法,以及用 DNA 聚合酶修復片段末端的技術要點。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)下冊,作者:〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W.拉塞爾。試劑、
建立隨機重疊DNA插入文庫實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙酸銨 ATP 乙醇 甘油 蒸餾水 IPTG MgCl2 NaCl 酚
單鏈DNA文庫的SELEX篩選實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 SELEX 技術除了可以使用 RNA 文庫以外,還可以使用單鏈 DNA 文庫進行篩選。單鏈 DNA 形成高級結構的豐富性也足夠用于對許多靶分子的篩選,而且 DNA 文庫具有更好的穩定性,操作也相對簡便。
單鏈DNA文庫的SELEX篩選實驗
實驗方法原理 SELEX 技術除了可以使用 RNA 文庫以外,還可以使用單鏈 DNA 文庫進行篩選。單鏈 DNA 形成高級結構的豐富性也足夠用于對許多靶分子的篩選,而且 DNA 文庫具有更好的穩定性,操作也相對簡便。實驗材料 3' 引物鏈親和素磁珠儀器、耗材 電泳儀PCR 儀離心機凝膠成像儀
單鏈DNA文庫的SELEX篩選實驗
單鏈DNA文庫的SELEX篩選實驗可用于:(1)體外診斷;(2)體內治療等。實驗方法原理SELEX 技術除了可以使用 RNA 文庫以外,還可以使用單鏈 DNA 文庫進行篩選。單鏈 DNA 形成高級結構的豐富性也足夠用于對許多靶分子的篩選,而且 DNA 文庫具有更好的穩定性,操作也相對簡便。實驗材料3
基于 PCR 的 DNA 文庫篩選實驗方法
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 PCR 混合物 PCR 引物寡核苷酸 雜交寡核苷酸 PCR 正對照 PCR 主要混合物 蒸餾水
利用λ噬菌體文庫篩選 DNA 結合蛋白實驗
可利用合成雙鏈寡核苷酸篩選構建于λ噬菌體的 cDNA 表達文庫,以鑒定與特異 DNA 結合蛋白質相對應的克隆(Singhetal.1988,Vinsonetal.1988)。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)下冊,作者:〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。試劑、試劑盒ATP結合緩沖液變性溶