血液及組織樣品的制備分析組織中某種物質的含量、探索物質代謝的過程和規律,經常使用動物的肝、腎、腦、粘膜和肌肉等組織,也選用全血、血漿、血清或者無蛋白血濾液等血液樣品,有時也采用尿液、胃液等完成各種生化實驗。掌握以上各種實驗樣品的正確處理和制備方法是保證生化實驗順利進行的關鍵。一、血液樣品(一)采血測定用的血液,多由靜脈采集。一般在飼喂前空腹采取,因此時血液中化學成分含量比較穩定,采血時所用的針頭、注射器,盛血容器要清潔干凈;接血時應讓血液沿著容器壁慢慢注入,以防溶血和產生泡沫。(二)血清、全血及血漿的制備1.血清的制備血清是全血不加抗凝劑自然凝固后析出的淡黃清亮液體。制備方法是:將剛采集的血液直接注入試管或離心管中。將試管放成斜面,讓其自然凝固,一般經3h 血塊自然收縮而析出血清;也可將血樣放入37 ℃ 恒溫箱內,促使血塊收縮,能較快約析出血清。為了縮短時間,也可用離心機分離(未凝或凝固的均可離心),分離出的血青,用吸管......閱讀全文
實驗概要實驗室中常用硫酸銨沉淀后過DEAE 纖維素柱,比較簡便可獲較純的抗體。下面以此方法為例介紹IgG的分離與提純。實驗原理以抗原免疫動物來制備的抗血清是一個非常復雜的混合物,包括血清的全部成分。但是同抗原特異性結合的抗體則主要是血清中的免疫球蛋白組分。通常用于制備酶標抗體或熒光抗體的免疫球蛋白必
以抗原免疫動物來制備的抗血清是一個非常復雜的混合物,包括血清的全部成分。但是同抗原特異性結合的抗體則主要是血清中的免疫球蛋白組分。通常用于制備酶標抗體或熒光抗體的免疫球蛋白必須高度純化并具有特異性,不應含有非抗體的血清蛋白。因此,為了濃縮和提高抗體的效價,或為制備免疫球蛋白特異性抗體時,通常也需要分
實驗概要實驗室中常用硫酸銨沉淀后過DEAE 纖維素柱,比較簡便可獲較純的抗體。下面以此方法為例介紹IgG的分離與提純。實驗原理以抗原免疫動物來制備的抗血清是一個非常復雜的混合物,包括血清的全部成分。但是同抗原特異性結合的抗體則主要是血清中的免疫球蛋白組分。通常用于制備酶標抗體或熒光抗體的免疫球蛋白必
以抗原免疫動物來制備的抗血清是一個非常復雜的混合物,包括血清的全部成分。但是同抗原特異性結合的抗體則主要是血清中的免疫球蛋白組分。通常用于制備酶標抗體或熒光抗體的免疫球蛋白必須高度純化并具有特異性,不應含有非抗體的血清蛋白。因此,為了濃縮和提高抗體的效價,或為制備免疫球蛋白特異性抗體時,通常也需要分
免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表著機體體液免疫的水平,并進一步代表著B細胞的功能,因此測定血清Ig含量可以推知機體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。 隨著免疫學的發展和需要,免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很
免疫球蛋白提取技術 實驗方法原理 隨著免疫學的發展和需要,免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可
免疫球蛋白提取技術可應用于:(1)推知機體的體液免疫功能;(2)診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。實驗方法原理隨著免疫學的發展和需要,免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多,有單一法,但大多數采用二步法以上相結合的方法,特別是以硫酸銨提純為基礎,再經過層析柱的方法來提高免
免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表著機體體液免疫的水平,并進一步代表著B細胞的功能,因此測定血清Ig含量可以推知機體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。隨著免疫學的發展和需要,免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多,有單一法,但大多數
免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表著機體體液免疫的水平,并進一步代表著B細胞的功能,因此測定血清Ig含量可以推知機體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。隨著免疫學的發展和需要,免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多,有單一法,但大多數
免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表著機體體液免疫的水平,并進一步代表著B細胞的功能,因此測定血清Ig含量可以推知機體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。隨著免疫學的發展和需要,免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多,有單一法,但大多數
⑴ 區帶電泳:玻片瓊脂或醋酸纖維膜電泳均可。加樣電泳后,只在γ—球蛋白的遷移部位出現一條帶。操作時,同時可用全血清樣品,不同濃度 (NH4)2SO4鹽析樣品進行電泳,以資比較。⑵ 瓊脂雙相雙擴散鑒定:預先準備該IgG免疫異種動物所獲的抗IgG血清。將IgG與抗 IgG血清進行雙相雙擴散,如IgG提純
實驗方法原理 硫酸銨沉淀法可用于從大量粗制劑中濃縮和部分純化蛋白質。用此方法可以將主要的免疫球從樣品中分離,是免疫球蛋白分離的常用方法。高濃度的鹽離子在蛋白質溶液中可與蛋白質競爭水分子,從而破壞蛋白質表面的水化膜,降低其溶解度,使之從溶液中沉淀出來。各種蛋白質的溶解度不同,因而可利用不同濃度的鹽溶液
IgG的分離與提純實驗可以用于:制備酶標抗體或熒光抗體。實驗方法原理硫酸銨沉淀法可用于從大量粗制劑中濃縮和部分純化蛋白質。用此方法可以將主要的免疫球從樣品中分離,是免疫球蛋白分離的常用方法。高濃度的鹽離子在蛋白質溶液中可與蛋白質競爭水分子,從而破壞蛋白質表面的水化膜,降低其溶解度,使之從溶液中沉淀出
(12)IgG的純度鑒定,可采用下列方法之一鑒定。①玻片瓊脂或醋酸纖維膜電泳均可加樣電泳后,只在γ—球蛋白的遷移部位出現一條帶。操作時,同時可用全血清樣品,不同濃度(NH4)2SO4鹽析樣品進行電泳,以資比較。②瓊脂雙相雙擴散鑒定預先準備該IgG免疫異種動物所獲的抗IgG血清。將IgG與抗IgG血清
一、前沿生物技術主題 1.蛋白質測序新技術新裝備及配套試劑國產化 (1)陣列毛細管柱蛋白質分離-陣列點樣裝置 研制二維陣列毛細管分離新裝置,第一維分離柱可分離48個餾分,第二維維陣列毛細管分離柱可同時分離48個流份;開發陣列紫外檢測器; 研制多柱點樣頭并行點樣器和流份收集器;開發
一、對照實驗 1.吸收實驗 應用尚無文獻報告的抗血清/自己制備的抗血清進行ICC染色時,需用相應的抗原吸收抗血清后,再孵育標本,判斷結果的可信性(結果應為陰性)。常用的吸收實驗分固相吸收和液相吸收兩種(見本書第一章 ),對于不能形成沉淀,難以用離心沉降法分離的一些小分子多肽類抗原,以固相吸收為佳
4、禽血清IgG的分離與提純(Na2SO4法)(1)試劑①5%葡聚糖硫酸鹽②0.02Mol/L MnCl2溶液③無水硫酸鈉④pH8.2硼酸鹽緩沖液⑤0.06Mol/L pH7.4PB液(2)操作方法①取禽血清10ml加5%葡聚糖硫酸鹽液,0.40ml和0.025Mol/L MnCl21.00ml充分
快速檢測技術廣泛用于食品安全快速檢測,臨床檢驗、檢驗檢疫、毒品檢驗等公共領域。食品安全快速檢測是指對食品利用便攜式分析儀器及配套試劑快速得到檢測結果的一種檢測方式。 1、食品安全問題主要有害污染物 (1)農藥,化肥:有機磷,有機氯,硝酸鹽 
為了消滅豬瘟,需要快速而確實的診斷技術。流行病學、癥狀學和病理解剖學等方 面的資料,具有重要的參考價值,但確診必須采取病料,進行病毒的分離鑒定或作抗體 測定。 疫情調查時,除需注意流行情況,還應了解是否已經進行免疫接種, 所用疫苗有無 殘余毒力?非典型豬瘟在成年豬中大多表現為輕癥疾病
47、水溶性非食用色素的快速檢測原理: 水溶性非食用色素與脫脂羊毛染色后不易去除的原理對部分水溶性非食用色素進行檢測。 48、味精谷氨酸鈉的快速檢測原理: 利用谷氨酸鈉的兩性作用,加入甲醛一固定谷氨酸鈉的堿性,使羥基顯示出酸性,用氫氧化鈉標準溶液滴定,以指示劑顯示為終點,得出樣品中谷氨酸
一、放射免疫分析的基本試劑 (一)標準品 標準品是放射免疫分析法定量的依據,由于以標準品的量用來表示被涮物質的量,故標準品與被測物質應當化學結構一致并具有相同免疫活性。標準品作為定量的基準。應要求高度純化。標準品除含量應具有準確性外,還應具備穩定性,即在合理的貯存條件下保持原來的特性。 按實
1、流式細胞儀上的FL2-W FL2-A FL2-H 分別是做什么的?FL2-W是只檢測熒光的脈沖寬度, FL2-H是指脈沖高度。通常在做細胞周期分析時應用,用于去除粘連細胞。2、流式同型對照怎樣選擇?同型對照(Isotype Control):使用與一抗相同種屬來源、相同亞型、相同劑量和相同的免
1、流式細胞儀上的FL2-W FL2-A FL2-H 分別是做什么的?FL2-W是只檢測熒光的脈沖寬度, FL2-H是指脈沖高度。通常在做細胞周期分析時應用,用于去除粘連細胞。2、流式同型對照怎樣選擇?同型對照(Isotype Control):使用與一抗相同種屬來源、相同亞型、相同劑量和相同的免疫
蛋白質組學研究已經成為后基因組時代的研究熱點,是生命科學研究領域又一個新的突破口。本文從對疏水性強的蛋白質、極性蛋白質、高豐度蛋白的處理、低豐度蛋白的富集和對樣品溶液中干擾性物質的去除以及對不同染色后質譜前處理等方面綜述了蛋白質樣品的一般處理方法。 1. 不溶性蛋白質的處理 天然狀態的蛋白質
摘要:酶聯免疫吸附技術(ELISA)是將抗原抗體反應的高度特異性和酶的高效催化作用相結合的一種免疫分析方法,具有操作簡便、快速、有效、特異性強等特點,能批量檢測食品中的藥物殘留、病原微生物以及轉基因食品等。本文主要闡述了酶聯免疫吸附法在食品安全檢測中的應用。 食品安全問題是全球關注