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    羊水細胞培養實驗

    實驗方法原理 羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞,可在體外培養用以檢驗胎兒核型。試劑、試劑盒 碘酒酒精營養液血清秋水仙素醋酸甲醇儀器、耗材 棉簽棉球鑷子穿針培養瓶實驗步驟 1. 抽取羊水無菌抽取羊水10~20 ml,立即注入無菌離心管中;2. 離心分離1000 轉/分,離心10 分鐘,去上清,留0.5 ml;3. 培養加培養液4 ml(含小牛血清1 ml),用NaHCO3調pH至6.8,置37 ℃培養,在溫箱中培養7~10 天后,可見大量成纖維細胞或上皮樣細胞生長;加秋水仙素0.02~0.8 μg/ml營養液,作用10~12 小時;4. 其余步驟與傳代細胞培養染色體制備法相同......閱讀全文

    細胞培養技術

    實驗概要細胞培養是指從體內組織取出細胞摹擬體內出現環境,在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下,使期生長繁殖,并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物為單個細胞或細胞群。主要設備細胞培養設施和基本條件  1、實驗室設計  細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染

    羊膜細胞的培養

    封閉式試管培養 開放式蓋玻片培養             實驗方法原理 在標準培養箱(37°C ) 中用 Lei

    方案27.5 羊膜細胞的培養

    封閉式試管培養 開放式蓋玻片培養             實驗方法原理 在標準培養箱(37°C ) 中用 Lei

    羊膜細胞的培養——封閉式試管培養

    實驗方法原理在標準培養箱(37°C ) 中用 Leighton 塑料管培養細胞,然后用胰蛋白酶懸浮法收集細胞。實驗材料羊水標本D-PBSA秋水仙酰胺胸腺嘧啶核苷溴脫氧尿核苷胰蛋白酶EDTAHistopaque-l077試劑、試劑盒完全培養液胰蛋白酶和EDTA混合液消毒劑如Virkon氯化鉀低滲溶液固

    實用哺乳動物細胞培養手冊(中)

    細胞培養環境1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受 其它有害因素的影響。細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響, 要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。細胞培養室的設計原則一般是無菌 操作區設在室內較少走動的內側,常規

    細胞培養基的種類與應用!

      細胞培養基的種類與應用!   經典的培養基有很多種,其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是應用最廣泛的培養基。其他如M199 、 IMDM 、 L15培養基等也用于某些細胞的培養。其具體的特征及應用如下:   1、BME細胞培養基   基礎Eagl

    羊膜細胞的培養(一)

    實驗方法原理 在標準培養箱(37°C ) 中用 Leighton 塑料管培養細胞,然后用胰蛋白酶懸浮法收集細胞。實驗材料 羊水標本D-PBSA秋水仙酰胺胸腺嘧啶核苷溴脫氧尿核苷胰蛋白酶EDTA Histopaque-l077試劑、試劑盒 完全培養液胰蛋白酶和EDTA混合

    絨毛染色體制備方法

    絨毛來源于胚胎的中胚層,最早的初級干絨毛出現于孕三周初,孕8周左右是絨毛發育最旺盛時期。目前國內外絨毛取材多選于8-9周。研究資料表明,絨毛取樣不影響胚胎的發育及胎盤的功能。但取樣的失敗可導致胚胎丟失而終止妊娠。絨毛取樣前者首先要檢查陰道分泌物以判別陰道的潔凈度,防止取樣導致宮內感染。其次需做B超檢

    原代細胞的培養與建系-1

                          原代細胞的培養與建系   細胞的來源多樣,培養方法也各不相同,凡是來源于胚胎、組織器官及外周血,經特殊分離

    組織學研究方法

    (一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡(簡稱光鏡)觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊,先用固定劑(fixative)固定(fixation),使組織中的蛋白質迅速凝固,防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等,一般常將幾種固定劑配制成混

    羊膜細胞的培養(二)

    胸腺嘧啶核苷同步化收集1. 在收集細胞的前一天早上,用添加胸腺嘧啶核苷(用 D-PBSA 制備 15 mg/ml 儲備液,過濾除菌。將 0.1 ml 胸腺嘧啶核苷儲備液加入到 10 ml 培養液中。在收集細胞前更換使用胸腺嘧啶核苷培養液。在培養液中的終濃度應為 0.15 mg/ml)的培養液

    實用哺乳動物細胞培養手冊(四)

    細胞培養無菌操作基本技術無菌操作技術分為三個部分:工作環境及表面的處理,細胞培養所用玻璃及塑料制品的處理及培養液與培養細胞的處理。工作環境的處理 使用層流超凈工作臺是最經濟有效的手段。超凈工作臺正常工作時,向下的氣流可阻擋外界空氣污染物進入超凈臺。(1)實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射 30-

    羊水細胞染色體標本的制備

    一、原理    人的羊水細胞能長成單層并可連續進行傳代培養,但它們的一些特征與一般成纖維細胞不同。在羊水中存在著各種不同類型的胎兒細胞,依據其外形和生長特征可區分為以下三類:上皮細胞(E)、成纖維細胞(F)和羊水細胞(AF)。E細胞在胰酶消化的連續培養中不再生

    原代細胞培養之——取材技術

    細胞的來源多樣,培養方法也各不相同,凡是來源于胚胎、組織器官及外周血,經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。原代細胞經分散接種之手段稱為傳代。凡能經傳代方式進行再次培養的細胞稱為傳代細胞。若能穩定生長傳至10~20代以上的細胞可確立為細胞系。若有條件能開展單細胞克隆、純化,經大量擴增

    染色體制備儀

      培養細胞的染色體核型分析技術在產前診斷,腫瘤預后,不孕不育查因,科學研究等方面應用廣泛,也是細胞遺傳的一項基本檢測技術。  通過體外培養獲得大量的分裂細胞之后,加入秋水仙素,使分裂中的細胞停止于分裂中期,再經過染色體制備,將染色體的條帶染色顯示出來,顯微鏡下計數細胞核型、染色體數目及條帶,分析后

    一種風靡全球的新型血清替代物――UltroserG

      美國公司Pall推出了一種創新性的血清替代物Ultroser G,這款產品可以完全替代胎牛血清,從而讓細胞培養結果實現更好的重復性和穩定性。   如今,大部分實驗室都還在用血清來培養細胞,但是隨著血源的減少以及血清價格的不斷上漲,以及來自動物保護組織的壓力,很多實驗室尤其是干細胞實驗室開始嘗試

    范可尼貧血(先天性骨髓發育不全)的診斷

    二氧橋丁烷(雙環氧丁烷)檢測實驗實驗材料外周血試劑、試劑盒RPMI 15% FBS 完全培養基二氧橋丁烷秋水仙胺KCl固定劑儀器、耗材注射器組織培養瓶離心管離心機倒置顯微鏡實驗步驟1.從配有 18 1/2 G 針頭的 10ml 注射器中滴入外周血(18~25 滴;0.4~0.5 ml) 至已盛有 1

    羊水細胞培養基在體外培養制備方法

    羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞,可在體外培養用以分析胎兒染色體核型。目前國內外大都采用腹腔羊膜穿刺術,妊娠12-30周的羊水細胞均可培養基成功。羊膜腔穿刺取羊水行染色體分析,最佳孕周為16周左右。因此時羊水增長快,羊水中細胞較多,細胞培養易于生長,而且不易損傷胎兒。國內多數選擇的穿刺時間在妊娠的第16

    4大基因測序技術在無創性產前檢測中的應用

      近年來,通過高通量測序技術檢測孕婦外周血中游離胎兒DNA(cfDNA)篩查胎兒染色體多倍體異常的無創性產前檢測( noninvasive prenatal testing, NIPT)技術正越來越多地用于臨床,其具有安全性、高效性及準確率高的特點,正在給產前診斷技術帶來革命性的變化。NIPT技術

    妊娠產物及其他固體組織來源樣本的培養及制備實驗

    實驗材料組織樣本試劑、試劑盒含標準抗生素的 HBSS 溶液儀器、耗材完全培養基培養皿解剖器械塑料組織培養瓶實驗步驟基本方案1.用無菌解剖器械將組織標本放入含有5 mlHBSS及5倍濃度抗生素的35 mm 培養皿中。室溫下放置>30 min。2.將組織標本轉移至一個新的含有約 2 ml 完全培養

    細胞凍存方法及目的

    把細胞消化下來(同5)并離心。用配好的凍存液把細胞懸浮起來,分裝到滅菌的凍存管里,4℃冰箱30min,-20℃30min,-80℃過夜,寫明細胞種類,凍存日期。然后放到液氮灌中保存。 凍存液的配制:50%的完全培養基+40%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。 培養細

    原代細胞基本實驗技術小結(一)

    A 原代細胞分離技術 取人或動物體內(或胚胎)的組織,將其剪碎至1mm3的組織塊,再采用的如下方法進行分離培養: 一、懸浮細胞的分離方法 1、將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中,1000rpm/分鐘離心5分鐘。 2、去掉上清,離心沉淀用無鈣、鎂的PBS清洗后1000rpm/分鐘

    中科院Nature子刊iPS細胞理想來源

      來自中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院的研究人員提出人類尿液中的腎上皮細胞是誘導多能干細胞(iPSCs)的理想來源之一。這一方法相比其他方法更簡單,重現性好,所產生的誘導多能干細胞表現出很好的分化能力。在11月8日發表于《自然實驗手冊》(Nature Protocols)的論文中,研究人員詳

    微陣列—比較基因組雜交技術檢測染色體異常

    【摘要】近年微陣列一比較基因組雜交(microarraycomparativegenomichybirdization,microarray.CGH)技術被應用到臨床細胞遺傳學領域。該技術是選擇DNA特殊片段作為靶,固化在載體上,形成密集、有序的分子微陣列。然后,從測試標本中提取DNA,將測試DNA

    懸浮細胞的分離方法

    組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,zui簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘,若懸液量大,可適當延長離心時間,但速度不能太高,延時也不能太長,以避免擠壓或機械損傷細胞,離心沉淀用無鈣、鎂PBS洗兩次,用培養基洗一次后,調整適當細胞濃度后再分瓶培養,若選用懸液中某些細胞,

    Cell雜志最受關注十篇文章(11月)

      Cell創刊于1976年,現已成為世界自然科學研究領域最著名的期刊之一,并陸續發行了十幾種姊妹刊,在各自專業領域里均占據著舉足輕重的地位。 Cell以發表具有重要意義的原創性科研報告為主,許多生命科學領域最重要的發現都發表在Cell上。本月《Cell》前十名下載論文為:   1. Revi

    Cell直擊諾獎成果:羊水細胞轉分化

      來自美國康奈爾大學Weill醫學院的研究人員研發出一種新方法,能從羊水細胞(ACs)獲取大量的循環系統細胞――血管內皮細胞(VECs),這一研究成果公布在10月18日Cell雜志在線版上,這項在小鼠上完成的研究成果,將為建立器官再生和各種血管疾病治療所需的龐大 VECs庫存打開一條新途徑。

    唐篩、無創、羊穿,我該怎么選?

    生一個健康聰明可愛的小寶寶是各位準爸爸準媽媽的心愿。如何才能生一個健康聰明可愛的小寶寶,產前篩查特別重要。這其中最讓媽媽們糾結的一關就是唐氏綜合征的篩查,作為評估和診斷唐氏兒的項目, 唐篩、無創、羊穿有什么區別,孕媽到底該怎么選擇?唐氏綜合征,又稱先天愚型或Down綜合征,是由于染色體異常(多了一條

    原代細胞培養之——細胞分離技術(一)

    原代細胞的分離和制作人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密,不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖,即使采用1mm3的組織塊,也只有少量處于周邊的細胞可能生存和生長,若需獲取大量細胞,必須將現有的組織塊充分散開,使細胞解離出來,常采用的方法如下: 一、懸浮細胞的分離方法 組織材料若來自血液、羊水

    你被醫生建議做無創DNA了?孕媽必看!

      近年來,國家開放二胎政策,大齡孕婦的比例增加,傳統的唐氏篩查的準確性不高以及二代測序技術的提升,越來越多的孕媽選擇了做無創產前DNA檢測,那到底什么是無創產前DNA檢測(NIPT,Non-invasive Prenatal Testing),接下來小編就為大家好好介紹下無創產前DNA檢測是怎么一

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