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  • 兔多克隆抗血清的制備實驗——肌肉內注射免疫法

    實驗材料抗原試劑、試劑盒PBS乙醇儀器、耗材注射針頭注射器培養箱實驗步驟1. 取2 ml 的弗氏完全佐劑加到2 ml 的溶于PBS的純化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射針頭,排出注射器中的氣泡。 2. 將兔子敢在固定架上,用一只手抓住兔的頸背部毛皮,另一只手托住兔的后腿及臀部,將兔束緊固定以使后肢不能伸張,用70%乙醇對所要注射的區域進行清潔消毒,在后肢大腿肌肉內進針約1 cm 深,毎條大腿肌肉內最多注射0.5 ml 乳化液。 3. 四周后,用1 mg 的混溶干弗氏不完全佐劑的抗原乳化液(1:1)對兔進行肌肉內加強免疫注射,操作步驟同1和2,初次加強免疫后2周再次進行加強免疫注射。4. 第二次加強免疫注射10天后,從兔的耳緣靜脈處放血。(1)先將兔固定在固定架上(固定緊),使其耳朵伸出,用70%乙醇洗潔消毒一側耳朵。(2)將兔耳置......閱讀全文

    兔多克隆抗血清的制備實驗——肌肉內注射免疫法

    實驗材料抗原試劑、試劑盒PBS乙醇儀器、耗材注射針頭注射器培養箱實驗步驟1. ?取2 ml 的弗氏完全佐劑加到2 ml 的溶于PBS的純化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射針頭,排出注射器中的氣泡。?2. ?將兔子敢在固定架上,用一只手抓住兔的頸背部毛皮,另一只手托住兔

    兔多克隆抗血清的制備實驗——皮內注射免疫法

    實驗材料抗原試劑、試劑盒PBS乙醇儀器、耗材注射針頭注射器培養箱實驗步驟1. ?按基本方案中步驟1制備免疫兔用的抗原。?2. ?牢牢地抓住兔子,剃除其背毛,用70%乙酵消毒其暴露的皮膚。用拇指和食指將需要免疫注射的區域的皮膚張開,用3 ml 注射器帶24G注射針頭以相對皮膚30。的角度進針(針尖的斜

    兔多克隆抗血清的制備實驗——皮下組織注射免疫法

    實驗材料抗原試劑、試劑盒PBS乙醇儀器、耗材注射針頭注射器培養箱實驗步驟1. ?準備用于注射家兔的抗原,并準備用于皮下注射免疫的家兔(方法同皮內注射)。2. ?將家兔背部皮膚捏出,以遠離其下的肌肉,用24G注射針頭全程穿剌,進入皮下,小心勿刺入肌肉組織中,在4個不同的部位各注射0.5 ml 抗原。?

    兔多克隆抗血清的制備實驗

    實驗材料 抗原試劑、試劑盒 PBS乙醇儀器、耗材 注射針頭注射器培養箱實驗步驟 1. ?取2 ml 的弗氏完全佐劑加到2 ml 的溶于PBS的純化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射針頭,排出注射器中的氣泡。?2. ?將兔子敢在固定架上,用一只手抓住兔的頸背部毛皮,另一只

    兔多克隆抗血清的制備實驗——耳動脈放血

    實驗材料抗原試劑、試劑盒PBS乙醇儀器、耗材注射針頭注射器培養箱實驗步驟1. ?準備用于放血的家兔(見基本方案)?2. ?將靠近家兔頭部的半只耳朵托在梅指和食指上,用中指和無名指彎曲剩余的半只耳朵使之下垂,以便使血液隨重力下流,用一個18G注射用針頭(不帶注射器)沿著兔耳中動脈進針,針尖指向兔耳根部

    多克隆抗血清的制備

    材 料(帶 V 項 目 見 附 錄 1)家兔、大鼠、小鼠或合適品系的倉鼠弗 氏 完 全 佐 劑(CFA; Sigma)含 1?2 mg/m l 純化蛋白抗原的 PBS 溶液:吸取其中 10?20 Mg,在考馬斯亮藍染色的 SDS-聚丙烯酰胺凝膠上分析未見有污染的條帶VPBS弗 氏 不 完 全 佐 劑

    多克隆抗血清的制備1

    首要的問題是需要制備多克隆抗體還是單克隆抗體。多克隆抗體的優勢在于可在多種不同生物種系中制備,花費精力較少。另外 ,多克隆抗體特別適用于分析變性蛋白質以及免疫沉淀法和免疫印跡法。作者:J.E.科利跟等,譯者:曹雪濤等,本實驗來自「精編免疫學實驗指南」—使用弗氏佐劑制備多克隆抗體的免疫接種法實驗步驟材

    【卡梅德生物】兔多抗制備|兔多克隆抗體制備|兔抗體

    ? 多克隆抗體是指由多種免疫細胞產生的針對特定抗原的抗體群體。與單克隆抗體相比,多克隆抗體可以識別抗原的多個表位,因此在某些應用中更為有效。兔是制備多克隆抗體的常用動物模型,因其體型適中、免疫反應良好且抗體產量高。? 兔多抗(Polyclonal antibodies)是一種多克隆抗體,由多個B細胞

    淋巴細胞雜交瘤單克隆抗體制備技術3

    抗體的制備方法與原理一、抗血清的制備  有了質量好的抗原,還必須選擇適當的免疫途徑,才能產生質量好(特異性強和效價高)的抗體。  (一)用于免疫的動物  作免疫用的動物有哺乳類和禽類,主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等,實驗室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動物種類的選擇主要根據抗原的生物學特性和所

    抗體的制備方法與原理

    一、抗血清的制備  有了質量好的抗原,還必須選擇適當的免疫途徑,才能產生質量好(特異性強和效價高)的抗體。  (一)用于免疫的動物  作免疫用的動物有哺乳類和禽類,主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等,實驗室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動物種類的選擇主要根據抗原的生物學特性和所要獲得抗血清數量,如

    抗血清制備法生化檢驗

    抗血清制備法:抗血清指含有抗體的血清。傳統的抗血清制備方法是將某種抗原通過多次注入動物,數十天后或數月后,采集動物血,立即分離出血清。此抗血清在保存或應用前必須作效價和特異性鑒定及純化。(一)免疫動物的選擇免疫動物的選擇基本要求:1.抗原與免疫動物的種屬差異越遠越好。2.動物必須適齡、健壯、無感染、

    多克隆抗體制備實驗_弗氏佐劑免疫法

    抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原所產生的抗體稱之為單克隆抗體(Monclone antibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;除了抗原決定

    多克隆抗體技術概述1

    一、多克隆抗體的概念?抗原刺激機體,產生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。?抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原所產生的抗體稱之為單克隆抗體(M

    抗體的制備有哪些

    (1)多克隆抗體的制備。①免疫方法:對多克隆抗體,免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮內免疫法、淋巴結免疫法和混合法等。一般來說,皮下或肌肉免疫法產生的抗體比較多;皮內免疫法所需的抗原量少,在抗原寶貴時特別適用,但與之相對的,它產生的抗體量也不多。混合免疫法的優點是抗原用量小,產生抗體速度快。②多克隆

    關于TH糖蛋白的抗體制備介紹

      將人尿THP作為抗原,免疫新西蘭白兔制備抗人THP抗體。方法:每只兔每次用抗原量lmg,與等量完全Ferund佐劑混合,皮下、肌肉多點注射,每2周加強免疫1次,共3次。所得抗血清先經鹽沉淀法粗提,后經離子交換層析法純化。一純化的抗血清,經雙向免疫擴散法鑒定,結果顯示與相應抗原呈高度特異性結合呈現

    TH糖蛋白的抗體制備過程

    將人尿THP作為抗原,免疫新西蘭白兔制備抗人THP抗體。方法:每只兔每次用抗原量lmg,與等量完全Ferund佐劑混合,皮下、肌肉多點注射,每2周加強免疫1次,共3次。所得抗血清先經鹽沉淀法粗提,后經離子交換層析法純化。一純化的抗血清,經雙向免疫擴散法鑒定,結果顯示與相應抗原呈高度特異性結合呈現一條

    抗血清的制備的免疫程序有哪些?

    1.免疫原的劑量:免疫原劑量過大或過小都可使動物產生免疫耐受,在一定劑量范圍內,免疫原劑量越大,產生的抗體效價越高。2.免疫途徑:有皮內、皮下、肌內、靜脈、腹腔、淋巴結等途徑。皮內或皮下免疫時一般采用多點注射。初次免疫一般選擇皮內接種,加強免疫和顆粒性抗原一般選擇靜脈注射。寶貴抗原可選擇淋巴結內微量

    免疫球蛋白抗血清制備方法

    免疫球蛋白抗血清制備方法此法用于制備間接法抗抗體。因抗原為可溶性,故多需加佐劑。(1)淋巴結注射法1)選擇體重2~3Kg的健康雄性家兔( 2只以上),編號;2)在家兔兩后腳掌共注射活卡介苗,50mg(約0.6mL.每只足庶部皮下0.1mL,皮內0.2mL)。7~10d后,鼠或國窩處淋巴結腫大如黃豆或

    動物免疫實驗

    實驗概要將某種蛋白注射新西蘭大耳兔產生免疫反應,通過ELISA檢測免疫產生的抗體。實驗原理將抗原吸附在固相載體表面,加入抗血清,抗體和抗原在載體表面形成抗原-抗體復合物,洗去未結合抗體,然后加入辣根過氧化物酶標記的二抗(抗體的抗體),二抗與抗體結合,洗去未結合二抗,加底物顯色劑顯色,在一定波長下測定

    動物免疫實驗

    實驗概要將某種蛋白注射新西蘭大耳兔產生免疫反應,通過ELISA檢測免疫產生的抗體。實驗原理將抗原吸附在固相載體表面,加入抗血清,抗體和抗原在載體表面形成抗原-抗體復合物,洗去未結合抗體,然后加入辣根過氧化物酶標記的二抗(抗體的抗體),二抗與抗體結合,洗去未結合二抗,加底物顯色劑顯色,在一定波長下測定

    抗血清的制備免疫程序知識點

    1.免疫原的劑量:免疫原劑量過大或過小都可使動物產生免疫耐受,在一定劑量范圍內,免疫原劑量越大,產生的抗體效價越高。2.免疫途徑:有皮內、皮下、肌內、靜脈、腹腔、淋巴結等途徑。皮內或皮下免疫時一般采用多點注射。初次免疫一般選擇皮內接種,加強免疫和顆粒性抗原一般選擇靜脈注射。寶貴抗原可選擇淋巴結內微量

    供免疫用的動物有哪些?如何應用?

    供免疫用的動物主要是哺乳動物和禽類,常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動物的選擇常根據抗體的用途和量來決定,也與抗原的性質有關。如要獲得大量的抗體,多采用大動物;如要是獲得直接標記診斷的抗體,則直接采用本動物;如要獲得間接的標記診斷用抗體,則必須用異源動物制備抗體;如果難以獲得的抗原,且

    關于多克隆抗體免疫動物的介紹

      供免疫用的動物主要是哺乳動物和禽類,常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動物的選擇常根據抗體的用途和量來決定,也與抗原的性質有關。如要獲得大量的抗體,多采用大動物;如要是獲得直接標記診斷的抗體,則直接采用本動物;如要獲得間接的標記診斷用抗體,則必須用異源動物制備抗體;如果難以獲得的抗原

    抗血清的制備

    1、動物的選擇羊、馬、雞、猴、豚鼠,都是常用的免疫動物,在實驗中,選擇動物時應考慮抗原與動物的種屬關系、抗原性質與動物種類、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及動物個體等因素。免疫用動物應選適齡、健壯.最好為雄性。最常用的實驗動物是家兔,一般選擇選擇年齡在6個月以上當年繁殖的♂性,體重2 ~3公斤,

    抗血清的制備

    一、目的:1、了解抗血清制備的基本過程:2、掌握抗血清的收集和保存方法。二、原理:抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清,一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。高效價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。一種抗原能否引起抗體生成反應,一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定簇(A

    制備克隆實驗

    試劑、試劑盒ATP-巰基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶連接緩沖液T4DNA 連接酶平末端插入物克隆載體培養基儀器、耗材FALCON 2059 多聚丙烯試管37°C 恒溫箱水浴箱實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑ATP(10 mmol/L)β-巰基乙醇(可選擇)IPTG(100 mmol/L

    制備克隆實驗

    試劑、試劑盒?ATP-巰基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶連接緩沖液T4DNA 連接酶平末端插入物克隆載體培養基儀器、耗材?FALCON 2059 多聚丙烯試管37°C 恒溫箱 水浴箱實驗步驟?一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑ATP(10 mmol/L)β-巰基乙醇(可選擇)IPTG(100 mm

    制備克隆實驗

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 ATP -巰基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 連接緩沖液 T4DNA 連接酶 平末

    如何正確選擇WB檢測的抗體?

    WB免疫印跡法,也稱免疫轉移技術IBT(Immunoblotting),是Towbin將1975年Southern發明的Soutnern blotting技術應用于蛋白-蛋白相互作用建立的免疫學檢測方法。其操作簡便,主要用于未知蛋白檢測及抗原組分、抗原決定簇鑒定,同時也用于未知抗體的

    如何正確選擇WB檢測的抗體?

    WB免疫印跡法,也稱免疫轉移技術IBT(Immunoblotting),是Towbin將1975年Southern發明的Soutnern blotting技術應用于蛋白-蛋白相互作用建立的免疫學檢測方法。其操作簡便,主要用于未知蛋白檢測及抗原組分、抗原決定簇鑒定,同時也用于未知抗體的檢測和單

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