免疫印跡western實驗中內參基因的選擇和注意事項 Western Blot實驗常用于檢測蛋白表達量、蛋白表達產物的正確性等。相對于其他檢測蛋白的方法而言Western Blot實驗在蛋白的定性定量分析、與目的蛋白量的比較方面更簡單一些。 雖然,順利的時候Western blot做起來很簡單,可不順的時候也很令人心煩――做不出結果啦、假陽性啦、結果出現多條帶啦、抗體問題啦(一抗有問題還是二抗有問題啦)……畢竟,作為一種有活性的生物大分子,抗體和抗原的反應不象1+1那么明確,而用這種不確定的試劑來測定同樣知之甚少的表達產物,確實是有一定的不確定性的。所以,嚴謹的 Western Blot實驗設計中要求有良好的參照體系,對實驗結果分析是非常有用。特別是當實驗出現問題時,借助參照體系很容易就可以查出問題所在,而不必抓耳撓腮怨天尤人。 良好的參照體系通常包括分子量marker(用來確定蛋白條帶對應的分子量大小)、......閱讀全文
Western Blot實驗常用于檢測蛋白表達量、蛋白表達產物的正確性等。相對于其他檢測蛋白的方法而言Western Blot實驗在蛋白的定性定量分析、與目的蛋白量的比較方面更簡單一些。雖然,順利的時候Western blot做起來很簡單,可不順的時候也很令人心煩――做不出結果啦、假陽性啦、
免疫印跡western實驗中內參基因的選擇和注意事項 Western Blot實驗常用于檢測蛋白表達量、蛋白表達產物的正確性等。相對于其他檢測蛋白的方法而言Western Blot實驗在蛋白的定性定量分析、與目的蛋白量的比較方面更簡單一些。 雖然,順利的時候Western blot做
實驗概要Western免疫印跡(Western Blotting)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。與Southern或Northern雜交方法類似,但Western B
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理 與Southern或Northern雜交方法類
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。實驗原理與Southern或 Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電
[實驗原理]Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠
免疫印跡Western bloting 這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體(NC、PVDF膜),并以特異性抗體作為探針檢測之。抗體與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合物中的某些特異蛋白進行定性、分析。
實驗材料蛋白質樣品試劑、試劑盒裂解液PBSG 250考馬斯亮藍溶液NaClSDS上樣緩沖液電泳緩沖液轉移緩沖液麗春紅染液封閉液TBSTTBS洗脫抗體緩沖液顯影液定影液抗體化學發光試劑儀器、耗材高壓鍋玻璃勻漿器高速離心機分光光度儀-20℃低溫冰箱垂直板電泳轉移裝置恒溫水浴搖床多用脫色搖床實驗步驟一、操
這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體(NC、PVDF膜),并以特異性抗體作為探針檢測之。抗體與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合物中的某些特異蛋白進行定性、分析。材料(MATERIALS):o 試劑(R