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直接熒光法DEFT（Direct Epifluorescent Filter Technique）是利用電離輻射對食品樣品菌落計數的方法，操作簡便，具有高通量性。將樣品通過過濾器后，吖啶橙染色，在紫外顯微鏡下活細胞能觀察到橘黃色，而死細胞染成綠色，可以統計出樣品中所有菌落的總數。原料乳用濾膜過濾后染色，計數得熒光假單胞菌相關性系數為0.91，且在25min內完成檢測。相對于傳統的平板計數方法，DEFT 大大縮短檢測時間，利用其原理，可以實現對多種食品中菌落數的快速檢測。但是 DEFT 的靈敏度不高，只能用于檢測一定范圍內菌落數，當食品中菌數含量較少時沒有良好的線性關系，且實驗儀器比較昂貴，在工業生產中不能很好的適用。......閱讀全文
直接熒光法DEFT（Direct Epifluorescent Filter Technique）是利用電離輻射對食品樣品菌落計數的方法，操作簡便，具有高通量性。將樣品通過過濾器后，吖啶橙染色，在紫外顯微鏡下活細胞能觀察到橘黃色，而死細胞染成綠色，可以統計出樣品中所有菌落的總數。原料乳用濾膜過濾
氨肽酶法通過革蘭氏陰性菌細胞壁上的氨肽酶與特定的化合物反應，檢測氨肽酶的活性。呂元等人用氨肽酶法，對杭州地區原料奶中熒光假單胞菌，阪崎腸桿菌和魯氏不動桿菌 3 種優勢嗜冷菌進行快速檢測。結果得出 3 種菌的濃度和氨肽酶活性存在顯著的相關性，且與傳統的平板計數法的結果沒有顯著差異，可以在很大程度上
ELISA 法通過抗體特異性反應檢測菌落數，具有高靈敏性，也易于同其他方法結合。PicardC 等人通過測定酪蛋白糖多肽計算原料乳中嗜冷菌含量。利用單克隆抗體，檢測出成品奶樣中嗜冷菌，與平板計數法相關性達 0.96。從脫脂奶粉中檢測6種沙門氏菌，檢出線為10 CFU/mL，檢測時間為3h。Cro
國際乳品聯合會（IDF）采用 IDF Standard 101A 和 IDF Standard 132A檢測標準，前者采用 6.5℃培養10天后平板計數，后者 21℃培養 25h后計數，132A培養時間短穩定性好，菌數較為準確。平板計數法將原料乳稀釋后，采用涂布法，傾注法，3M細菌總數試紙等方法
針對16S rRNA 保守序列設計引物，通過 PCR 擴增，可以將牛奶中嗜冷菌擴增出147bp的 DNA片段，標記后用 ELISA 檢測，得到熒光假單胞菌AH-70 的OD450和菌濃度的方程，分析得此方法和平板計數法的相關系數達到 0.94，可以檢測菌濃度范圍是103-107CFU/mL。PC
流式細胞法FCM（Flow Cytometry Method）可以檢測菌液中標記熒光信號的單細胞，對菌株實現逐一定量分析。流式細胞法檢出的菌數是平板計數法的 3.8 倍，因為能統計到總體菌落數量。利用這個方法檢測牛奶中假單胞菌，能在4 h內完成檢測，且在菌落數含量較少時靈敏度有很大的提高。此方法
熒光假單胞菌(P. fluorescens)屬于假單胞菌屬rRNA I群熒光DNA同源組，是植物根際最普遍的微生物類群，具有分布廣、數量多、營養需要簡單、繁殖快、競爭定殖力強的特點。世界許多國家均有人報道分離到抗植物病害的熒光假單胞菌，而且許多菌株能產生幾種活性物質，抗多種植物病害。其作用機制包
免疫磁珠技術可以快速的富集乳制品中低濃度的菌，通過結合 PCR、ELISA等方法可以達到快速、準確的檢測目的。呂琦等人通過對 4 中菌保守序列基因設計引物，建立多重 PCR 體系，在7-8h檢測時間內，檢測靈敏度達到 102CFU/mL，具有特異性。免疫磁珠技術檢測在各個方面都表現出一定優勢，改
熒光假單胞菌（P.Fluorescens）是一種環境污染菌。對于人類是一種罕見的機會致病菌。熒光假單胞菌屬于假單胞菌屬，是化能異養型的革蘭氏陰性菌，呈桿狀，有鞭毛。能分泌黃綠色熒光色素發出熒光，能產生抗生素、水解酶等代謝產物，在 4℃-37℃范圍內，中性環境中生長，生理生化特性顯著，是作為嗜冷菌
以原核生物16S保守序列設計引物，用PCR方法，從熒光假單胞菌基因組中擴取其16S保守序列，連接到T-載體，以設計好的限制性內切酶，分別切割表達載體（pET32a、pMAL-c2、pGEX-6p-1 ）和目的基因，然后將目的基因與表達載體連接，轉化大腸桿菌表達宿主菌（BL21、Origami），