菌種保存方法匯總
甘油冷凍保藏法 本方法適合于中、長期菌種保藏,保藏時間一般為2-4年左右. (1)用火焰滅菌的接種環取斜面菌種在平皿上劃線分離單菌落. (2)平皿倒置于30℃或37℃恒溫培養箱,培養24-48小時,至單菌落的大小為3mm左右. (3)挑取一個單菌落,接種于一個裝50mL的300mL三角瓶中30℃或37℃振蕩培養10-15小時,至菌密度OD600為1.0-1.5. (4)用火焰滅菌的接種環取少量種子液,涂片后,作革蘭氏染色,在顯微鏡下觀察菌體的形態,及是否有雜菌. (5)按30%甘油:種子液為1:1(V/V)的量加入無菌甘油, 混合后分裝至事先滅菌的菌種保存管(1-2mL/管),-70℃或液氮保存. 冷凍干燥保藏法 (1)準備安瓿管用于冷凍干燥菌種保藏的安瓿管宜采用中性玻璃制造,形狀可用長頸球形底的,亦稱淚滴型安瓿管,大小要求外徑6-7.5mm,長105mm,球部直徑9-1......閱讀全文
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甘油冷凍保藏法 本方法適合于中、長期菌種保藏,保藏時間一般為2-4年左右. (1)用火焰滅菌的接種環取斜面菌種在平皿上劃線分離單菌落. (2)平皿倒置于30℃或37℃恒溫培養箱,培養24-48小時,至單菌落的大小為3mm左右. (3)挑取一個單菌落,接種于一個裝50mL
菌種保存常見問題問答匯總
1.菌株保存的是第三代,-80℃保存,再取出來活化的話屬于第幾代?答:保存的是第三代復活出來后,如果采用平板或肉湯活化相當于轉接了一代,就是第四代了,如果還在瓷珠里的話就還是原來的代數。如果是保存在斜面上,這一支斜面一直就是第三代,如果轉接到另一支斜面就是第四代了。傳代原則,菌株活化復蘇不論以任何形
菌種保存常見問題答問匯總
1.菌株保存的是第三代,-80℃保存,再取出來活化的話屬于第幾代?答:保存的是第三代復活出來后,如果采用平板或肉湯活化相當于轉接了一代,就是第四代了,如果還在瓷珠里的話就還是原來的代數。如果是保存在斜面上,這一支斜面一直就是第三代,如果轉接到另一支斜面就是第四代了。傳代原則,菌株活化復蘇不論以任何形
菌種保存方法
?甘油冷凍保藏法? ? 本方法適合于中、長期菌種保藏,保藏時間一般為2-4年左右.(1)用火焰滅菌的接種環取斜面菌種在平皿上劃線分離單菌落.(2)平皿倒置于30℃或37℃恒溫培養箱,培養24-48小時,至單菌落的大小為3mm左右.(3)挑取一個單菌落,接種于一個裝50mL的300mL三角瓶中30℃或
菌種保存方法
微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。 低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個因素而設計的。 保藏方法大致可分為以下幾種: 1.傳代
菌種保存方法
微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。 低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個因素而設計的。 保藏方法大致可分為以下幾種: 1.傳代
菌種保存方法
菌種保存方法? ? 微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。 低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個因素而設計的。 保藏方法大致可分為以
專家解答:菌種保存常見問題答網友問匯總!
1.菌株保存的是第三代,-80℃保存,再取出來活化的話屬于第幾代?答:保存的是第三代復活出來后,如果采用平板或肉湯活化相當于轉接了一代,就是第四代了,如果還在瓷珠里的話就還是原來的代數。如果是保存在斜面上,這一支斜面一直就是第三代,如果轉接到另一支斜面就是第四代了。傳代原則,菌株活化復蘇不論以任何形
微生物菌種保存方法
一、傳代保存法:有些微生物當遇到冷凍或干燥等處理時,會很快死亡,因此在這種情況下,只能求助于傳代培養保存法。傳代培養就是要定期地進行菌種轉接、培養后再保存,它是最基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生產菌種的保存。傳代保存時,培養基的濃度不宜過高,營養成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的
菌種保存的幾種常用方法
微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于zui不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。 低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個因素而設計的。 保藏方法大致可分為以下幾種:
保存菌種技巧
保存菌種或長時間放置的培養板應先劃板活化菌種,挑取分隔良好的單 克隆接種于2-10 ml LB中(如菌種含質粒則應加抗生素)37攝氏度快搖 8小時,按0.1%-0.5% 比例轉種,培養基的量不應超過錐瓶的0.25容量,以 保證足夠的通氣。用O.D.600 測菌密度時,讀數值在0.1-0.5
常用的菌種保存方法有哪些
菌種保藏是食用菌產業的一項基礎工作,是確保野生種質資源基因留存和現有生產用種遺傳性能相對穩定的必要手段。菌種保藏的方法多種多樣,有的雖然保藏效果好,但投資高或操作繁雜。在生產實踐中,更需要設備投入少,能保障菌種不死亡、不污染、最大限度地保持優良種性的簡便方法,如斜面低溫短期保藏和自然基質較長期保藏相
常用實驗室菌種保存方法
微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據這三個因素而設計的。保藏方法大致可分為以下幾種:1.傳代培養保藏法又
菌種保存的原理
菌種保存的原理是預防或減緩DNA 復制時自發突變導致菌種退化,因此要創造代謝不活潑的狀態,而菌種保存時使菌種進入休眠態(孢子、芽孢),并創造干燥、低溫、缺氧、缺營養的環境,創造的環境越接近此狀態,所保存的菌種的時間就越長,所以從原理上講,所有菌種都可用這種方法保存, 但需要注意的是,苛刻菌(如流感嗜
幾種菌種的保存及復蘇方法
定期移植法亦稱傳代培養保藏法,包括斜面培養、穿刺培養、液體培養等。是指將菌種接種于適宜的培養基中,最適條件下培養,待生長充分后,于4~6℃進行保存并間隔一定時間進行移植培養的菌種保藏方法。操作步驟如下:1.培養基制備1.1器皿準備培養基制備過程中所用的一些玻璃器皿,如,三角瓶、試管、培養皿、燒杯、吸
能用菌種保存管永久保存菌株嗎?
溫度越低,保藏效果越好。從目前的試驗數據及實際保存效果來看,-20℃可保存1-5 年,-80℃或液氮中可保存5-10 年,不同菌種及不同的保存溫度保存時間會有所不同(例如:大腸、沙門等常規細菌-20℃我們目前可以保存到6年)。但需要注意的是所保存的菌種需每年抽檢進行生化特征的鑒定,確定菌株無變異。
瓷珠菌種保存流程
1.從培養18h以上的平板上刮去新鮮純培養物于菌種保存管中,配成大約3-4麥氏比濁度的菌懸液。2.擰緊保存管,來回顛倒幾次使細菌乳化,不能旋搖。3.用無菌移液器將菌種保存管內的液體吸取干凈,妥善放置被吸出的液體。4.擰緊保存管,迅速將其置于-20℃或-70℃冰箱中。
瓷珠菌種保存法
?傳統的菌種保存方式簡介??? 斜面保存法:微生物保存最基本的方法,可廣泛用于細菌、真菌等,保存期限非常短,斜面容易干裂。??? 液體石蠟保存法:可用于保存霉菌、酵母菌、放線菌及需氧菌,方法簡便,可防止斜面干燥和氧氣進入,但一些固氮菌、分枝桿菌、毛霉、厭氧菌等不適宜用此法。??? 甘油冷凍保存法:用
生物菌種凍干保存步驟
凍干機適用于大多數細菌、放線菌、病毒、噬菌體、立克次體、霉菌和酵母等的真空冷凍干燥保藏,但不適于霉菌的菌絲型、菇類、藻類和原蟲等。生物菌種凍干保存步驟,其操作流程如下: 1、安瓿管準備 安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時,先用2%鹽酸浸泡過夜,自來水沖洗干凈后,用蒸餾水浸泡至pH
生物菌種凍干保存步驟
凍干機適用于大多數細菌、放線菌、病毒、噬菌體、立克次體、霉菌和酵母等的真空冷凍干燥保藏,但不適于霉菌的菌絲型、菇類、藻類和原蟲等。生物菌種凍干保存步驟,其操作流程如下: 1、安瓿管準備 安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時,先用2%鹽酸浸泡過夜,自來水沖洗干凈后,用蒸餾水浸泡至pH
傳統的菌種保存方式簡介
斜面保存法:微生物保存最基本的方法,可廣泛用于細菌、真菌等,保存期限非常短,斜面容易干裂。液體石蠟保存法:可用于保存霉菌、酵母菌、放線菌及需氧菌,方法簡便,可防止斜面干燥和氧氣進入,但一些固氮菌、分枝桿菌、毛霉、厭氧菌等不適宜用此法。甘油冷凍保存法:用于一般細菌的保存,需使甘油終濃度為20%左右,然
菌種保藏實驗_核酸的保存
實驗步驟1. 以溶液形式置低溫保存DNA 溶于無菌 TE 緩沖液(10 mmol/L Tris ? HCl,1 mmol/L EDTA,pH 8.0)中,其中 EDTA 的作用是整合溶液中二價金屬離子,從而抑制 DNA 酶的活性(Mg2+?是 DNA 酶的激活劑)。 TE 的 pH 為 8.0 是為
分享丨幾種菌種的保存及復蘇方法!
定期移植法亦稱傳代培養保藏法,包括斜面培養、穿刺培養、液體培養等。是指將菌種接種于適宜的培養基中,最適條件下培養,待生長充分后,于4~6℃進行保存并間隔一定時間進行移植培養的菌種保藏方法。操作步驟如下:1.培養基制備1.1器皿準備培養基制備過程中所用的一些玻璃器皿,如,三角瓶、試管、培養皿、燒杯、吸
在使用后,菌種保存管的保存環境要求
菌種保存管采用的是低溫冷凍保存法,因此,使用后,需放置低溫環境,如-20℃、-80℃或液氮中保存,而且溫度越低,保存效果越好。用戶需根據菌種的保存要求選擇具體保存溫度。
不可不學的微生物菌種保存方法
一、傳代保存法:有些微生物當遇到冷凍或干燥等處理時,會很快死亡,因此在這種情況下,只能求助于傳代培養保存法。傳代培養就是要定期地進行菌種轉接、培養后再保存,它是最基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生產菌種的保存。傳代保存時,培養基的濃度不宜過高,營養成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的
生化培養箱能否保存菌種?
生化培養箱是植物、、微、遺傳、病毒、醫學、環保等科研,教育部門不可缺少的一種實驗室設備,廣泛應用于低溫恒溫試驗、培養試驗、環境試驗以及低溫微、植物細胞、嗜熱細菌等的培養等。在食用菌上主要用于菌種的生長培養,特別是母種和少量原種的培養,如果在開空調控溫沒有必要的情況下,用生化培養箱控制的溫度培養菌
生化培養箱能否保存菌種
一、什么是生化培養箱生化培養箱是植物、、微、遺傳、病毒、醫學、環保等科研,教育部門不可缺少的一種實驗室設備,廣泛應用于低溫恒溫試驗、培養試驗、環境試驗以及低溫微、植物細胞、嗜熱細菌等的培養等。在食用菌上主要用于菌種的生長培養,特別是母種和少量原種的培養,如果在開空調控溫沒有必要的情況下,用生化培養
生化培養箱能否保存菌種
生化培養箱能否保存菌種 一、什么是生化培養箱 生化培養箱是植物、、微、遺傳、病毒、醫學、環保等科研,教育部門不可缺少的一種實驗室設備,廣泛應用于低溫恒溫試驗、培養試驗、環境試驗以及低溫微、植物細胞、嗜熱細菌等的培養等。在食用菌上主要用于菌種的生長培養,特別是母種和少量原種的培養,如果在開空調
菌種保存和微生物常識
菌種保存和微生物常識1、常用培養基的制備、滅菌與消毒?營養:從外部環境攝取其生命活動所必需的能量和物質,滿足生長和繁殖需要的一種生理過程。是生命活動的物質基礎,是生命活動的起點。?營養物:具有營養功能的物質。也包括光能。提供生物的結構物質、能量、代謝調節物質和良好的生理環境。?營養要素:碳源、氮源、
菌種保存和微生物常識
菌種保存和微生物常識1、常用培養基的制備、滅菌與消毒?營養:從外部環境攝取其生命活動所必需的能量和物質,滿足生長和繁殖需要的一種生理過程。是生命活動的物質基礎,是生命活動的起點。?營養物:具有營養功能的物質。也包括光能。提供生物的結構物質、能量、代謝調節物質和良好的生理環境。?營養要素:碳源、氮源、