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最近年來在枯草桿菌，鼠傷寒沙門氏桿菌等細胞及噬菌體T4、T5、T7中分離到DNA聚合酶，這里只介紹T4DNA聚合酶。T4DNA聚合酶與大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ相似，也是一條多肽鏈，分子量亦相近，但 氨基酸組成不同，它至少含有15個半胱氨酸殘基。但是，它在作用上與大腸桿菌DNApol不同；[1]它無5'→3'外切酶活性；[2]它需要一條有 引物的單鏈DNA作模板。在有缺口的雙鏈DNA作模板時，需要有 基因32蛋白的輔助（基因32蛋白在T4DNA復制中的作用和大腸桿菌 單鏈結合蛋白的作用相似，基因32蛋白在 復制叉處和單鏈DNA結合后可以促進雙鏈的進一步打開，并保持其單鏈狀態有利于新生鏈的合成）；它利用單鏈DNA為模板進，可同時利用它作為引物，即此單鏈DNA的3'端能環繞其本身的某一順序形成 氫鍵配對，3'端的未雜交部分即被T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性切去，然后在其作用下從......閱讀全文
最近年來在枯草桿菌，鼠傷寒沙門氏桿菌等細胞及噬菌體T4、T5、T7中分離到DNA聚合酶，這里只介紹T4DNA聚合酶。T4DNA聚合酶與大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ相似，也是一條多肽鏈，分子量亦相近，但 氨基酸組成不同，它至少含有15個半胱氨酸殘基。但是，它在作用上與大腸桿菌DNApol不同；[1]它無
在50年代的中期，A. Kornberg和他的同事們就想到DNA的復制必然是一種酶的催化作用，于是決心分離出這種酶并研究其結構和作用機制。為了達到這個目的，他們分離的蛋白，然后加到體外合成系統中即 同位素標記的dNTP、Mg2+及模板DNA，經過大量的工作，于1956年終于發現了DNA聚合酶Ⅰ（
PCR技術是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。 它具有特異、敏感、產率高、 快速、 簡便、重復性好、易自動化等突出優點。 PCR技術最早由美國Cetus公司人類遺傳研究室Kary Mullis及同事于1985年發現并研制成功的；最早的應用報道是Saiki等1985年將PCR技術應用
單、雙鏈DNA或RNA都可以作為PCR的樣品。若起始材料是RNA，須先通過逆轉錄得到第一條cDNA。雖然PCR可以僅用極微量的樣品，甚至是來自單一細胞的DNA，但為了保證反應的特異性，還應用ng級的克隆DNA，μg水平的單拷貝染色體DNA或104拷貝的待擴增片段作為起始材料，模板可以是粗品，但不
（一）引物的量 引物在PCR反應中的濃度一般在0.1～1μmol/L之間。濃度過高易形成引物二聚體且產生非特異性產物。一般來說用低濃度引物經濟、特異，但濃度過低，不足以完成30個循環的擴增反應，則會降低PCR的產率。 （二）TaqDNA聚合酶的量 典型PCR反應混合物中，所用酶濃度為2.5
真核生物的DNA聚合酶：真核生物中也具有幾種DNA聚合酶，但這些聚合酶都沒有3'→5'或5'→3'外切酶活性。其聚合反應機制與原核生物的聚合一樣。DNA聚合酶α主要負責合成引物，既能合成前導鏈的又能合成后隨鏈的，它與引發酶（primase）形成復合體，因其有引發、
在引物RNA'-OH末端，以dNTP為底物，按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個將核苷酸加上去，就是DNApolⅠ的聚合作用。 酶的專一性主要表現為新進入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對時才有 催化作用。dNTP進入結合位點后，可能使酶的 構象發生變化，促進3'-OH與5&#
核酸檢測革命：可替代PCR的犀利技術——RPA重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。RPA技術主要依賴于三種酶：能結合單鏈核酸（寡核苷酸引物）的重組酶、單鏈DNA結合蛋白（SSB）和鏈置換DNA
電子鼻又稱氣味掃描儀，是20 世紀90 年代發展起來的一種快速檢測食品的新穎儀器。它以特定的傳感器和模式識別系統快速提供被測樣品的整體信息，指示樣品的隱含特征。 電子鼻是模擬動物嗅覺器官開發出一種高科技產品，目前科學家還沒有全部搞清楚動物的嗅覺原理。但是隨著科技的發展，目前世界上較為權威
鐵架臺用于固定和支持各種儀器，鐵圈可代替漏斗架使用。一般常用于過濾、加熱、滴定等實驗操作。是物理、化學實驗中使用最廣泛的儀器之一。常與 酒精燈配合使用。 使用時要注意順序是“由下至上”。鐵架臺使用時要放在水平的桌面上，鐵夾要夾穩。 酸堿試劑滴到鐵架臺上時要立刻用水沖洗。