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融合抗體 近二十年來，抗體生成技術有了飛速發展，已經從細胞工程抗體（雜交瘤技術一單克隆抗體）發展到了第三代抗體：基因工程抗體，尤其是噬菌體抗體庫技術的出現，解決了人源抗體的研制問題，促進了各種性能優良抗體以及具有多種功能的抗體融合蛋白的開發。單鏈抗體（Single-chain variable fragment，ScFv）是研究得較多的一種小分子抗體，其優越性在于可在宿主細胞內大量表達，易于基因工程操作，尤其易于構建抗體融合蛋白。近年來，關于綠色熒光蛋白融合單鏈抗體的報道很多，國內也有相關報道，如程虹等報道將抗肝癌單鏈雙功能抗體融合GFP真核表達載體并導人小鼠成纖維細胞NIH3T3表達并獲得成功。因融合抗體具有與抗原結合及發射熒光兩種特性，故這一人工分子可用做免疫染色的檢測試劑，直接應用于流式細胞儀和免疫熒光的標記及腫瘤的檢測等等。 由于技術上的的原因，一般融合抗體均置于原核表達系統如E.coli中表達。為便于表達蛋白的......閱讀全文
一提到蛋白研究，首先跳入腦海的當然是抗體。的確，很多蛋白實驗都離不開抗體。然而，即使抗體公司時不時推出新產品，但許多蛋白還是沒有相應的抗體，我們只能望電腦興嘆。而且，也有很多抗體無能為力的情況，比如觀察蛋白在細胞內的運輸。所幸，各種各樣的蛋白標簽讓我們能夠從容應對這些挑戰。 遺傳標簽
重組蛋白表達技術現已經廣泛應用于生物學各個具體領域。特別是體內功能研究和蛋白質的大規模生產都需要應用重組蛋白表達載體。本文將簡要介紹幾個常用的蛋白標簽及其功能和優點。 一. GST標簽 GST(谷胱甘肽巰基轉移酶) 標簽蛋白本身是一個在解毒過程中起到重要作用的轉移酶，它的天然大小為26KD。
自噬是真核細胞降解長壽蛋白、錯誤折疊蛋白和受損細胞器的重要生物學過程。細胞自噬由多個步驟組成, 其中包括: ① 吞噬泡的形成； ② 自噬體的形成； ③ 自噬體與溶酶體融合形成自噬溶酶體； ④ 自噬溶酶體的降解。自噬流是這些步驟在細胞內連續出現的動態過程, 自噬流中的任一環節出現障礙自噬將無法完成
GFP蛋白曾經為蛋白質定位等相關研究帶來革命性的進展，而隨著具有和GFP類似遺傳學特征的光學指示劑蛋白的出現，蛋白質相關的動態研究也將獲得更多的手段和技術，本文詳細介紹了激光誘導熒光系統在蛋白質研究中的應用。 近年來隨著蛋白質學研究的進展，研究人員相繼發現和特異克隆了一些特殊蛋白質。這些蛋
綠色熒光融合蛋白表達載體的構建 綠色熒光蛋白(green fluorescent protein，GFP) 及其突變體能在各種不同的生物系統中表達，這對細胞生物學的研究具有重要意義。而熒光蛋白的折疊能力及其同細胞內蛋白的融合能力，使研究 者能直接在細胞體內觀察到蛋白質的
德國科學家日前發現，一些不尋常的微小抗體，即所謂的納米抗體，能以意想不到的精度改變綠色熒光蛋白(GFP)的特性。這些免疫系統抗體與蛋白質結合后可改變蛋白質的構造，進而影響其功能。 抗體是免疫系統用來鑒別和抑制外源物質（例如細菌和病毒）的一種蛋白質復合體，可以為免
27. 翻轉擴散(transverse diffusion)又稱為翻轉(flip-flop)。它是指脂分子從脂雙層的一個層面翻轉至另一個層面的運動。磷脂發生翻轉運動時,磷脂的親水頭部基團必須克服內部疏水區的阻力,這在熱力學上是不利的。但是有些細胞含有翻轉酶(flipase)能夠促使某些磷脂從膜脂的一
光學顯微成像的衍射極限 生物醫學成像技術是基礎生物學研究和臨床醫學最重要的工具之一。回顧歷史，已有多位科學家憑借在成像技術方面的突破獲得諾貝爾獎。其中，Ｒoentgen 因發現 X 射線獲得 1901 年諾貝爾物理學獎; Zernike 因發明相襯顯微鏡獲得 1953 年諾貝爾
光學顯微成像的衍射極限生物醫學成像技術是基礎生物學研究和臨床醫學最重要的工具之一。回顧歷史，已有多位科學家憑借在成像技術方面的突破獲得諾貝爾獎。其中，Ｒoentgen 因發現 X 射線獲得 1901 年諾貝爾物理學獎; Zernike 因發明相襯顯微鏡獲得 1953 年諾貝爾物理學獎; Ｒuska
摘要: 蛋白質組研究目的在于從蛋白水平闡明基因的功能，這對于探索生命的奧秘具有重要的意義。蛋白質芯片是近年來興起的一種強有力的高通量研究方法， 能夠一次平行分析成千上萬的蛋白樣品， 具有很高的敏感度與準確性。它將成為蛋白質組學研究中的強有力的研究方法， 并最終架起基因組學與蛋白質組學的橋梁。1 研
近期爆發的新型冠狀病毒肺炎（COVID-19，對應的病毒為SARS-CoV-2）突出了開發有效治療方法的重要性。在近期的公眾號中，我們向大家介紹了“人民的希望”瑞德西韋的工作機制[1]，在此，我們結合疫苗、血清、多肽和單抗的研究案例，向大家繼續介紹靶向病毒的大分子治療和我們的解決方案是如何推動下
現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解，并且導致了免疫新策略的產生，免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。 一、GST pull-down實驗 GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶，GST pull-down實驗是一個行之有效的驗
熒光免疫技術是標記免疫技術中發展最早的一種。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合，利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術（fluorescentantibod
第一節 免疫細胞化學技術在腎臟疾病中的應用范圍在腎臟疾病時，免疫細胞化學技術主要應用于腎臟穿刺組織的檢查，也可應用于血清或腎臟洗脫液及尿液的特殊檢查，茲分述如下：一、腎臟組織的檢查腎穿刺組織一般應切割為三小塊，分別作冰凍切片、石蠟切片及超薄切片，進行熒光顯微鏡、光學顯微鏡及透射電鏡觀察。所應用的免疫
如今,單克隆抗體藥物以其獨特的作用機制及高效性,在腫瘤和自身免疫疾病的治療中發揮了不可估量的作用,成為全球的研發熱點，目前已有2400個單克隆抗體藥物處于研發及商業化階段。 1975年雜交瘤技術問世[1]。1986年鼠源單克隆抗體藥物Muromonab的上市拉開了單克隆抗體發展的序幕。
熒光免疫技術是標記免疫技術中發展最早的一種。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合，利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術（fluorescentantib
原核表達系統是常被用來研究基因功能的成熟系統，由于原核表達系統具有包涵體蛋白不易純化、蛋白修飾不完整等缺陷，人們也開始利用真核細胞表達系統來研究基因。自上世紀70年代基因工程 技術誕生以來，基因表達技術已滲透到生命科學研究的各個領域。并隨著人類基因組計劃實施的進行，在技術方法上得到了很大發展，時至今
當今生物醫學的發展已由傳統基于癥狀的治療模式，向以信息為依據的精準診療模式轉變，醫學影像技術的發展反映并引領著臨床醫學的進步。熒光成像技術具有檢測靈敏度高、無輻射危害等優點，在生物醫學領域具有廣泛的應用。 近日，中國科學院蘇州納米技術與納米仿生研究所研究員王強斌課題組接受《美國化學學會—納
現今，科技發展的齒輪正在高速運轉，每隔2-3年就會出現一個重大的技術變革引領生命科學走向更精細、更微觀、更真實的水平，這其中也包括蛋白的研究。在疾病的致病機理、分子機制、信號通路、藥物篩選以及新型診斷標志物的發現中，傳統的蛋白研究“金標準”方法如Co-IP、Western blot、ELISA、
最近，美國猶他大學的研究人員發明出一種方法，來觀察新形成的AIDS病毒顆粒從受感染的人類細胞顯露或“出芽”，而不會干擾這個過程。利用這種方法，研究人員發現，一種稱為ALIX的蛋白質介入了病毒復制的最后階段，而不是以前認為的較早階段。 相關研究結果發表在2014年5月16日的《公共科學圖書館期刊
據美國物理學家組織網4月21日（北京時間）報道，美國萊斯大學和德克薩斯農工大學研究人員通過基因嵌入融合技術，將不同蛋白質與一種來自果蠅的轉錄因子結合，再拉成纖細結實的線，就能織成任何想要的紋理構造。這種材料擁有多種潛在功能，可作為化學催化劑和生物傳感器，在未來的組織工程領域前景廣闊
正常培養的細胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，必須對自噬進行人工干預和調節，經報道的工具藥有： 一、自噬誘導劑 (1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模擬內質網應激(2) Carbamazepine/ L-690，330/
單細胞測序被評為2013年年度技術 2014 年首刊，《Nature Methods》雜志將2013年度技術(Method of the Year 2013)授予了單細胞測序(single-cell sequencing)。同時，雜志還介紹了2014年值得關注的技術，包括
《Nature Methods》盤點2015年度技術，選出了最受關注的技術成果：單粒子低溫電子顯微鏡（cryo-EM）技術。 除此之外，也整理出了2016年最值得關注的幾項技術，分別為：細胞內蛋白標記（Protein labeling in cells）、細胞核結構（Unraveling nuc
正常培養的細胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，必須對自噬進行人工干預和調節，經報道的工具藥有：一、自噬誘導劑(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模擬內質網應激(2) Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Chlor
環狀RNA(circular RNA,circRNA)是一種新興的內源性非編碼RNA(noncoding RNA,ncRNA)，是繼microRNA (miRNA)以及long noncoding RNA (IncRNA)后非編碼RNA家族中極具研究潛力的新成員。越來越多的研究表明，環狀RNA具
新的基因合成方法可使蛋白質表達最優化。 在合成生物學與生物技術中，定制基因序列的可靠性和成本效益對于相關應用是至關重要的。盡管脫氧核糖核酸（DNA）微陣列對于基因合成的短寡核苷酸池也是一個劃算的來源，但是這些復雜混合物必須經過放大和正確的組裝。一項最近的研究描述了一種方法，即將30
摘要：流式細胞術(flow cytometry, FCM)是以流式細胞儀為檢測手段的一項能快速、精確的對單個細胞理化特性進行多參數定量分析和分選的新技術。是一項多學科交叉研究的結晶。流式細胞術及流式細胞儀的出現融合了醫學，計算機學，物理學等眾多學科背景。。它不僅測量速度快、準確度好、靈敏度高，而且還
（一）一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡（簡稱光鏡）觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊，先用固定劑（fixative）固定（fixation），使組織中的蛋白質迅速凝固，防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等，一般常將幾種固定劑配制成混
自噬是近年來很熱門的領域，很多人傻傻分不清自噬和死亡。今天就帶大家一起來復習一下。自噬的過程——從一張圖開始步驟 1：細胞接受自噬誘導信號后，在胞漿的某處形成一個小的類似「脂質體」樣的膜結構，然后不斷擴張，但它并不呈球形，而是扁平的，就像一個由 2 層脂雙層組成的碗，可在電鏡下觀察到，被稱為 Pha