方案1蛋白質和多肽MALDIMS分析的一般方法
實驗材料冷凍干燥樣品試劑、試劑盒校準標準品基質溶液甲醇儀器、耗材MALDI 質譜儀MALDI 板實驗步驟1.吸取 0.5ul 的基質溶液，加到 MALDI-MS 分析所用的金屬樣品板上的樣品孔中（為了準確起見，請使用2ul 的移液器）。2.在基質干燥之前，迅速加入 0.5ul 的標準品或樣品到基質中。3.置于室溫條件或 40℃ 的烘箱內約 5 min，讓溶劑蒸發以使樣品干燥。4.把金屬板轉移到質譜儀的真空艙內。5.以恰好高于離子化閾值的激光能量來「預熱」校準標準品，從而獲得初始質量圖譜。6.然后，降低激光能量直到獲得高質量的圖譜。7.用適合的校準物來獲得線性的兩點（two—point) 外標校準（參考表 8.9 和表 8.10)8.對未知樣品重復步驟 5 和步驟 6, 并與校準值相比較以獲得精確的質量。9.使用完畢后，用水徹底沖洗 MALDI 板以除去任何可見的晶體，然后再用無棉絨薄紙（例如，Kimwipes 紙）沾甲醇擦拭。展......閱讀全文
MALDIMS分析是什么分析
MatriX AssistedLaser Desorption Ionization （MALDI），中文一般譯為基質輔助激光解吸附質譜技術，其基本原理是將分析物分散在基質分子中并形成晶體，當用激光照射晶體時，由于基質分子經輻射所 吸收的能量，導致能量蓄積并迅速產熱，從而使基質晶體升華，致使基質和分
MALDIMS分析是什么分析
MatriX AssistedLaser Desorption Ionization （MALDI），中文一般譯為基質輔助激光解吸附質譜技術，其基本原理是將分析物分散在基質分子中并形成晶體，當用激光照射晶體時，由于基質分子經輻射所 吸收的能量，導致能量蓄積并迅速產熱，從而使基質晶體升華，致使基質和分
MALDIMS分析是什么分析
中文一般譯為基質輔助激光解吸附質譜技術，其基本原理是將分析物分散在基質分子中并形成晶體，當用激光照射晶體時，由于基質分子經輻射所 吸收的能量，導致能量蓄積并迅速產熱，從而使基質晶體升華，致使基質和分析物膨脹并進入氣相。MALDAI所產生的質譜圖多為單電荷離子，因而質譜圖中的 離子與多肽和蛋白質的質量
蛋白質和多肽MALDIMS分析方法
ABSTRACTFor MALDI-TOF-MS analysis of proteins and peptides, samples are cocrystallized with an excess of organic matrix that absorbs at a specific wav
質譜成像新觀察：MALDIMS成像最新應用
基質輔助激光解吸電離技術（MALDI）的出現使得質譜成像技術（Mass spectrometry imaging，MSI）可以用于測定組織內生物大分子的位置和分布，以及疾病生物標志物的鑒定和改變等。近日布魯克成像全球應用開發經理Shannon Cornett博士討論了質譜成像技術的最新進展及其對
MALDIMS：蛋白組學研究的推動力
有如此多的蛋白質需要研究，蛋白組學專家感覺到需要加快速度了。基質輔助激光解吸質譜，或稱作MALDI- MS因此應運而生。范德比特大學（Vanderbilt University）醫學院質譜研究中心主任Richard Caprioli博士表示：“只要樣品制備順利完成，就可以很輕松地在接下來的步
方案6－MALDIMS確定酪氨酸磷酸化位點實驗
實驗材料在聚丙烯酰胺凝膠中的放射性標記的目標磷酸化蛋白試劑、試劑盒乙腈基質溶液NH4HCO3三氯乙酸KH2P04儀器、耗材超聲儀離心干燥器HPLC柱HPLC 系統MALDI 板試管UV 檢測器死體積T-分流器實驗步驟一、SDS-PAGE 分離的 Gab-I 蛋白的消化1.把通過自顯影確定的含有磷酸化
蛋白質和多肽MALDIMS分析的一般方法實驗
HeLa 細胞核提取物的制備實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 甘油 液氮 MgCl2?6 H2O
MALDIMS檢測方案加速藥物研發進程——布魯克副總裁綜述
MALDI質譜檢測技術加速藥物研發進程尋找具有良好治療應用前景的新候選藥物方法Rohan Thakur, Ph.D. * 在過去的幾十年中，基質輔助激光解吸電離質譜（MALDI-MS）已經在許多應用中證明了其有效性和穩定性。最近MALDI-MS方面的創新促進了兩種檢測方案的發展，這兩種方法可以用于
方案1－蛋白質和多肽－MALDIMS－分析的一般方法
實驗材料冷凍干燥樣品試劑、試劑盒校準標準品基質溶液甲醇儀器、耗材MALDI 質譜儀MALDI 板實驗步驟1.吸取 0.5ul 的基質溶液，加到 MALDI-MS 分析所用的金屬樣品板上的樣品孔中（為了準確起見，請使用2ul 的移液器）。2.在基質干燥之前，迅速加入 0.5ul 的標準品或樣品到基質中
為什么要使用內標？
用內標做校準可以大大減少 MALDI-MS 的誤差（
基質輔助激光解吸離子化質譜儀的相關介紹
基質輔助激光解吸離子化質譜（Matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry，MALDI-MS) 是19 世紀80 年代末問世并迅速發展起來的質譜分析技術。這種離子化方式產生的離子常用飛行時間(time of flight
反向微柱的準備Preparation－of－ReversedPhase－Microcolumns
INTRODUCTIONOne versatile strategy for sample cleanup prior to MALDI-MS analysis uses microscale columns designed for direct sample elution onto the M
方案2分析之前或之后對磷酸化多肽進行堿性磷酸酶處理
實驗材料磷酸化多肽樣品在溶液中保存試劑、試劑盒乙腈堿性磷酸酶甲酸MALDI 基質三氯乙酸儀器、耗材臺式離心機去鹽樹脂MALDI 靶板質譜儀塑料盒加樣吸頭注射器實驗步驟方法 A: 在 MALDI-MS 分析之前在溶液中去磷酸化的方法1.根據方案 1 中的附加方案，準備兩個 nanoscale 去鹽柱子
MALDI質譜新方案可加速藥物研發進程
布魯克·道爾頓執行副總裁 Rohan Thakur 在過去的幾十年中，基質輔助激光解吸電離質譜（MALDI-MS）已經在許多應用中證明了其有效性和穩定性。最近MALDI-MS方面的創新促進了兩種檢測方案的發展，這兩種方法可以用于加速臨床前藥物的發現：一種用于超高通量篩選程序(uHTS)，另一種用于
MALDlMS實驗_基本方案
實驗方法原理線性 MALDI-MS：MALDI-MS質譜儀恐怕是概念上和設計上都最簡單的質譜儀，分子（分析物）經 MALDI 方式離子化，離子的質荷比 (m/z）由飛行時間質分析器檢測（見圖 5,1) 。 測量的質量精確度與m/z有關， 25ku 以下可達到約 0.01%-0.05% 的精確度，到
MALDlMS實驗
實驗方法原理 線性 MALDI-MS：MALDI-MS質譜儀恐怕是概念上和設計上都最簡單的質譜儀，分子（分析物）經 MALDI 方式離子化，離子的質荷比 (m/z）由飛行時間質分析器檢測（見圖 5,1) 。 測量的質量精確度與m/z有關， 25ku 以下可達到約 0.01%-0.05%
蛋白質分子量測定的相關介紹
隨著質譜技術的發展，分子量的測定已從傳統的有機小分子擴展到了生物大分子。MALDI-MS技術以及極高的靈敏度、精確度在蛋白質分析中得到了廣泛的應用。該技術不僅可測定各種疏水性、親水性和糖蛋白的分子量，還可以測定蛋白質混合物的分子量。這可認為是蛋白質分析領域的一項重大突破。
2015CMSSCASMS質譜網絡研討會落幕－1800余人次參會
2015年12月14-17日，由中國質譜學會與美國華人質譜學會主辦，分析測試百科網承辦的2015CMSS&CASMS質譜網絡研討會圓滿落幕，此次大會歷時三天半，邀請到了近40位頂尖的海內外知名科學家與應用專家，共同為大家帶來了一場無與倫比的質譜盛
質譜在蛋白質組學中的應用實驗
方案1 蛋白質和多肽 MALDI-MS 分析的一般方法 方案2 反相微型層析柱的制備實驗 方案3 固定化酶微型層析柱的制備 方案4 用于蛋白質組分析的微毛細管 HPLC 色譜及 ESI —體化裝置的制備和使用 方案5 利用 Nano-LC
MALDlMS實驗_改進方法
實驗方法原理MALDI離子化過程本身存在一個問題即離子化過程中動能有微小的分散。由單個激光脈沖產生的離子的動能的微小差別削弱了 MALDI-MS 的分辨力。多肽的質量分辨率(m/Δm) 通常為 40-800 FWHM (峰高一半處的峰寬），蛋白質的質量分辨率通常為 50-400 FWHM, 這樣的質
2014－CMSS質譜學術網上盛宴圓滿落幕－參會1200余人次
2014年9月2-4日，由中國質譜學會主辦、分析測試百科網承辦的2014質譜網絡研討會圓滿落下帷幕。此次大會歷時三天，匯聚了數十名國內頂尖科學家和應用專家與會，為大家帶來了一場高質量、高水準的學術盛宴。來自
蛋白質磷酸化位點怎么確定
鑒定了磷酸化肽后,還要進一步確定磷酸化肽中修飾了磷酸化位點的哪個殘基.用于確定磷酸化肽中磷酸化位點的質譜方法基于兩種不同原理,第一種方法取決于磷酸酯鍵的化學穩定性,如在ESI質譜儀的碰撞室或離子源中,或在MALDI-MS的PSD過程中.磷酸化肽可通過磷酸酯鍵斷裂產生的碎片離子鑒定.第二種方法基于肽段
蛋白質磷酸化位點怎么確定
鑒定了磷酸化肽后,還要進一步確定磷酸化肽中修飾了磷酸化位點的哪個殘基.用于確定磷酸化肽中磷酸化位點的質譜方法基于兩種不同原理,第一種方法取決于磷酸酯鍵的化學穩定性,如在ESI質譜儀的碰撞室或離子源中,或在MALDI-MS的PSD過程中.磷酸化肽可通過磷酸酯鍵斷裂產生的碎片離子鑒定.第二種方法基于肽段
蛋白質磷酸化位點怎么確定
鑒定了磷酸化肽后,還要進一步確定磷酸化肽中修飾了磷酸化位點的哪個殘基.用于確定磷酸化肽中磷酸化位點的質譜方法基于兩種不同原理,第一種方法取決于磷酸酯鍵的化學穩定性,如在ESI質譜儀的碰撞室或離子源中,或在MALDI-MS的PSD過程中.磷酸化肽可通過磷酸酯鍵斷裂產生的碎片離子鑒定.第二種方法基于肽段
用蛋白質組學方法繪制磷酸化位點圖譜
方案1 用帶有 Fe(Ⅲ) 和 Ga(Ⅲ)的 IMAC 純化磷酸化多肽 方案2 在 MALDI 分析之前或之后對磷酸化多肽進行堿性磷酸酶處理 方案3 結合固定化金屬離子親和介質和 MALDI-TOF-MS 直接分析方法對磷酸化多肽進行特征分析實驗 方
質譜在蛋白質組學中的應用實驗
實驗材料 冷凍干燥樣品試劑、試劑盒 校準標準品基質溶液甲醇儀器、耗材 MALDI 質譜儀MALDI 板實驗步驟 1.吸取 0.5ul 的基質溶液，加到 MALDI-MS 分析所用的金屬樣品板上的樣品孔中（為了準確起見，請使用2ul 的移液器）。2.在基質干燥之前，迅速加入 0.5ul 的標準品或樣品
用質譜數據對肽段從頭測序實驗（一）
實驗方法原理單級質譜測序是分析肽段的階梯序列，即相鄰肽段間相差一個氨基酸殘基，用質譜分析肽階梯，通常用 MALDI-TOF,MS 分析。 MS/MS 測序用的是上文所述用于數據庫檢索的 CID 譜，但碎片離子由人工完全解析。用于MS 序列分析的肽階梯是由化學或酶法降解肽段產生，由 C 未端或N未端斷
用質譜數據對肽段從頭測序實驗
實驗方法原理 單級質譜測序是分析肽段的階梯序列，即相鄰肽段間相差一個氨基酸殘基，用質譜分析肽階梯，通常用 MALDI-TOF,MS 分析。 MS/MS 測序用的是上文所述用于數據庫檢索的 CID 譜，但碎片離子由人工完全解析。用于MS 序列分析的肽階梯是由化學或酶法降解肽段產生，由 C 未端或N未端
用質譜數據對肽段從頭測序實驗
方案一 方案二 方案三 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 單級質譜測序是分析肽段的階梯序列，即相鄰肽段間相差一個氨基酸殘基，用質譜分析肽階梯，通常用 MALD