蛋白質和多肽MALDIMS分析的一般方法實驗
HeLa 細胞核提取物的制備實驗 試劑、試劑盒 甘油 液氮 MgCl2?6 H2O 硫酸銨 HeLa 細胞磷酸緩沖鹽溶液(PBS) 緩沖液 G 緩沖液 H 緩沖液 D TM 緩沖液+0.1 ml L KCl 實驗步驟 材料HeLa 細胞(培養和保存條件見下文。我們也成功地使用過 CellexBiosciences 公司制備并冷凍的 HeLa 細胞)甘油......閱讀全文
HeLa-細胞核提取物的制備實驗
在本實驗中,基本上是按Dignam等(1983)所述的方法從HeLa細胞制備核提取物的。這一基本方法大概是制備體外轉錄和DNA結合實驗用因子的最常用的方法。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒甘油液氮MgCl2?6 H2O硫酸銨HeLa 細胞磷酸緩沖鹽溶液(PBS)緩沖液
HeLa-細胞核提取物的制備實驗
試劑、試劑盒?甘油液氮MgCl2?6 H2O硫酸銨HeLa 細胞磷酸緩沖鹽溶液(PBS) 緩沖液 G緩沖液 H 緩沖液 DTM 緩沖液+0.1 ml L KCl實驗步驟 材料HeLa 細胞(培養和保存條件見下文。我們也成功地使用過 CellexBiosciences 公司制備并冷凍的 HeLa 細胞
HeLa-細胞核提取物的-Sephacryl-S300-HR-柱層析實驗
HeLa 細胞核提取物Sephacryl S-300 HR液氮TM 緩沖液+0.1mol LKCl儀器、耗材XK26 40 柱實驗步驟材料與設備HeLa 細胞核提取物(從 12L 細胞培養物制得,見 pp.9l~93)(5-ml 樣品)XK26/40 柱(PharmaciaBiotech,Inc.)
HeLa-細胞核提取物的-Sephacryl-S300-HR-柱層析實驗
試劑、試劑盒?HeLa 細胞核提取物Sephacryl S-300 HR液氮TM 緩沖液+0.1mol LKCl儀器、耗材?XK26 40 柱實驗步驟 材料與設備HeLa 細胞核提取物(從 12L 細胞培養物制得,見 pp.9l~93)(5-ml 樣品)XK26/40 柱(PharmaciaBiot
HeLa-細胞核提取物的-Sephacryl-S300-HR-柱
HeLa 細胞核提取物的 Sephacryl S-300 HR 柱層析實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 HeLa 細胞核提取物
制備體外剪接反應用HeLa細胞核和胞質S100提取物實驗
胞核提取物可以用于前體 mRNA 的剪接,S100 提取物中雖然包括許多剪接因子,但它不具有剪接活性,因為它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白,不過該提取物中補充一種或多種 SR 蛋白后就可以進行有效的剪接。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法原理胞核提取物可以用于前體 mRNA
制備體外剪接反應用HeLa細胞核和胞質S100提取物實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 胞核提取物可以用于前體 mRNA 的剪接,S100 提取物中雖然包括許多剪接因子,但它不具有剪接活性,因為它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白,不過該提取物中補充一種或多種 SR 蛋白后就可以進行有效的剪接。
制備體外剪接反應用HeLa細胞核和胞質S100提取物實驗
實驗方法原理 胞核提取物可以用于前體 mRNA 的剪接,S100 提取物中雖然包括許多剪接因子,但它不具有剪接活性,因為它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白,不過該提取物中補充一種或多種 SR 蛋白后就可以進行有效的剪接。實驗材料 HeLa 細胞試劑、試劑盒 DTT苯甲基磺酰氟PBS緩沖液儀器、耗材
分離核仁實驗——HeLa細胞細胞核或核仁的制備
實驗材料HeLa細胞試劑、試劑盒PBS儀器、耗材Teflon-玻璃勻漿器實驗步驟1. 準備溶液:PBSRSB-8 10 mmol/L Tris;10 mmoI/L NaCl,8 mmoI/L 乙酸鎂,pH 7.4RSB 10 mmol/L Tris;10 mmol/L NaCl,1.5 mmol/L
核提取物的制備實驗
實驗材料?哺乳動物試劑、試劑盒?PBS低滲緩沖液低鹽緩沖液透析緩沖液儀器、耗材?轉子離心機電導計透析膜勻漿機離心管實驗步驟 1a.? 收集轉瓶培養的細胞:將濃度為5~10×108細胞/l 的培養液用1 L 的塑料瓶1 850 g 離心20 min,將細胞收入50 ml 錐形離心管中(每管收2~3 L
核提取物的制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過向某些蛋白質溶液中加入某些無機鹽溶液后,可以降低蛋白質的溶解度,使蛋白質凝聚而從溶液中析出,這種作用叫作鹽析,是物理變化,可復原。對于特定的蛋白質,影響蛋白質鹽析的主要因素:無機鹽的種類、濃度、溫度和PH值。
核提取物的制備實驗(二)
從培養細胞中分離的細胞核制備成的提取物在體外轉錄和mRNA加工中具有精確的功能,(1)純化蛋白質(2)核提取物。 實驗材料 細胞核 試劑、試劑盒 KCl高鹽緩沖液 儀器、耗材 透析膜離心機 實驗步驟 1. ?按基本方案中歩驟1~7操作。 ?
核提取物的制備實驗(一)
從培養細胞中分離的細胞核制備成的提取物在體外轉錄和mRNA加工中具有精確的功能,(1)純化蛋白質(2)核提取物。實驗方法原理通過向某些蛋白質溶液中加入某些無機鹽溶液后,可以降低蛋白質的溶解度,使蛋白質凝聚而從溶液中析出,這種作用叫作鹽析,是物理變化,可復原。對于特定的蛋白質,影響蛋白質鹽析的主要因素
哺乳動物細胞制備核和細胞質提取物—核提取物制備優化
實驗材料 轉瓶或單層培養的哺乳動物細胞(如HeLa細胞) 試劑、試劑盒 高鹽緩沖液分別含 0.8、1.0、1.2、1.4 及 1.6 mol L KCl 儀器、耗材 貝克曼 JS4. 2 轉子或相當的轉子50 mL 圓錐形刻度聚丙烯離心管(對較小體積的提取物也可用
從哺乳動物細胞中制備核和細胞質提取物—核提取物制備
實驗材料轉瓶或單層培養的哺乳動物細胞(如HeLa細胞)試劑、試劑盒PBS低滲緩沖液高鹽緩沖液含1. 2 mol L KCl透析緩沖液液氮儀器、耗材貝克曼 JS4. 2 轉子或相當的轉子50 mL 圓錐形刻度聚丙烯離心管(對較小體積的提取物也可用 15 mL 的離心管)Dounce 氏玻璃勻漿器(B
Hela細胞的特點
· 可以連續傳代; · 細胞株不會衰老致死,并可以無限分裂下去; · 此細胞系跟其它 癌細胞相比,增殖異常迅速; · 感染性極強。
Hela細胞的應用
Hela細胞系被George Gey分送給眾研究單位(并未通知拉克斯本人也未得到她的許可),并用作癌癥模式細胞(model cancer cells)研究。HeLa細胞系也被用作研究細胞信號傳導(cellular signal transduction)。 · 1952年研究人員用各種從 腮腺
hela細胞有幾種
海拉細胞系是源自一位美國黑人婦女海瑞塔?拉克斯(Henrietta Lacks)的宮頸癌細胞的細胞系。HeLa取于原患者海瑞塔·拉克斯的姓名前兩字母。1951年由G.O.Gey等人從她的腫瘤上取下組織樣本,并在實驗室中進行培養,至今仍被不間斷的培養。不同于其他一般的人類細胞,此細胞株不會衰老致死,并
Hela細胞的介紹
是生物學與醫學研究中使用的一種細胞,源自一位美國婦女海莉耶塔?拉克斯(Henrietta Lacks)的子宮頸癌細胞的細胞系。在醫學界海拉細胞被廣泛應用于腫瘤研究、生物實驗或者細胞培養,已經成為醫學研究中非常重要的工具。
hela細胞有幾種
海拉細胞系是源自一位美國黑人婦女海瑞塔?拉克斯(Henrietta Lacks)的宮頸癌細胞的細胞系。HeLa取于原患者海瑞塔·拉克斯的姓名前兩字母。1951年由G.O.Gey等人從她的腫瘤上取下組織樣本,并在實驗室中進行培養,至今仍被不間斷的培養。不同于其他一般的人類細胞,此細胞株不會衰老致死,并
蛋白質和多肽MALDIMS分析的一般方法實驗
HeLa 細胞核提取物的制備實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 甘油 液氮 MgCl2?6 H2O
通過高等真核生物無細胞提取物分析mRNA的降解實驗
細胞的環境、復制周期的狀態和分化狀態的改變會引起一些 mRNA 半衰期的改變。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法原理細胞的環境、復制周期的狀態和分化狀態的改變會引起一些 mRNA 半衰期的改變。實驗材料DEPC細胞多聚核糖體RNA底物試劑、試劑盒乙酸鉀乙酸鎂DTTTris-乙酸
通過高等真核生物無細胞提取物分析mRNA的降解實驗
實驗方法原理 細胞的環境、復制周期的狀態和分化狀態的改變會引起一些 mRNA 半衰期的改變。實驗材料 DEPC細胞多聚核糖體RNA底物試劑、試劑盒 乙酸鉀乙酸鎂DTTTris-乙酸組織培養液無菌去離子水磷酸肌酸ATPGTP乙酸鉀精胺RNase 抑制劑儀器、耗材 高溫烤箱勻漿器研杵低速離心機超速離心機
通過高等真核生物無細胞提取物分析mRNA的降解實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞的環境、復制周期的狀態和分化狀態的改變會引起一些 mRNA 半衰期的改變。 實驗材料 DEPC 細胞
HeLa人宮頸癌細胞
HeLa人宮頸癌細胞注意事項:??原代動物細胞培養:1、實驗材料要新鮮,從活體分離材料后要低溫保存,并盡快進行細胞分離實驗。2、無菌操作。操作時用的培養液,可加平時細胞培養液5倍含量的青鏈霉素。3、用酶法分離細胞時,注意酶液的濃度和控制消化時間。貼塊法分離細胞時,注意動作要輕柔,不要傷到細胞組織,組
hela細胞傳代后貼壁時間
4-6小時
hela細胞能隨便養么
目前已經證實HeLa細胞株難以控制。此細胞株有時會污染同一實驗室的其他細胞培養環境(cellculture),進而影響生物研究。該細胞對實驗室的安全級別沒有特別要求,能養其它細胞的話養該細胞是沒有問題的。如上說明,該細胞可能存在污染同一實驗室的其他細胞培養環境的風險,而對人的風險應該不是很大,(以前
正常單個hela細胞的大小
直徑約為10μm,重約0.001μg人體細胞一般是以微米(毫米的千分之一)為單位的,從數微米到幾十微米不等。在醫學上,顯微鏡下比較腫瘤細胞的大小是和正常細胞相比而言的,較小的腫瘤細胞如小細胞肺癌,較大的腫瘤細胞如巨細胞瘤。
用[32P]磷酸標記細胞實驗_標記懸浮培養的HeLa細胞
實驗材料細胞試劑、試劑盒磷酸儀器、耗材無磷酸培養基實驗步驟1. 培養細胞至對數期,600 g 離心 5 分鐘。2. 棄上清,用無磷酸培養基懸浮細胞。3. 培養細胞 3~4 小時以耗盡它們的磷酸儲備。4. 再次離心,棄上清,用無磷酸培養基懸浮,加?32P 磷酸鹽至 20 μCi/ml 培養液,培養 1
羊水細胞間期核細胞分析實驗
實驗材料附有羊水細胞的載玻片或蓋玻片試劑、試劑盒2X SSC乙醇變性溶液生物素或地高辛標記 DNA 探針雜交溶液甲酰胺洗滌液PN 緩沖液熒光素標記的抗生物素蛋白生物素化的抗生物素蛋白抗體操作溶液DAPI 染色液二碘化丙錠苯二胺氟安定抗退色封固劑儀器、耗材載物片加溫器水浴箱玻璃蓋玻片膠布保濕室熒光落射