實驗材料 樣本 DNA試劑、試劑盒 NaOH對苯二酚重亞硫酸鈉礦物油DNA Wizard cleanup kit (Promega) 或等同物異丙醇 糖苷配糖基乙酸胺乙醇10 X PCR 擴增緩沖液4dNTP 混合物Taq DNA 聚合酶儀器、耗材 水浴設備Vacuum manifold帶控制管溫度顯示和適合管的熱循環儀實驗步驟 1.把樣品 DNA(達 1ug) 稀釋到 1.5 ml 微離心管中的 50ul 水中。如果使用的 DNA 更少(包括從石蠟包被的樣品提取的 DAN),預期的產量少(如很微弱的條帶)或者增加循環次數提高產量。準備好陽性和陰性對照 DNA 的稀釋液和樣品平行進行以下步驟。2.加入 5.5ul 2mol/L NaOH。37°C,孵育 lOmin。加入 3u1 新鮮配置的 l0mmol/L 對苯二酚和 520ul 新鮮配置的 3mol/L 重亞硫酸鈉。混勻并加入足量的礦物油(約 50ul) 用以......閱讀全文
簡介:什么是PCR芯片?實時定量PCR是檢測基因表達zui靈敏,zui可靠的方法。通過在試驗過程中,實時監測熒光染料的信號變化,反映樣品中的基因拷貝數。實時定量PCR線性范圍廣(能達到5個數量級),因此可以檢測同一樣品中表達量極低的基因和表達量很高的基因。但是,由于實時定量PCR需要制備
PCR實驗代測,熒光定量PCR代測主要這幾點很關鍵! 南京信帆生物技術有限公司提供實驗室代測服務,包括放免實驗代做,免疫組化,PCR,WB實驗代測等到,的設備加上技術嫻熟的實驗操作人員,讓您的每一份實驗結果均真實可靠,咨詢!PCR技術服務,Q-,RT-PCR實驗代做。 南京信帆生物提
中國 河北(2011年9月21日) 9月14日,全球領先的生物技術公司Eppendorf 在河北農業大學成功舉辦了主題為“如何提高PCR實驗成功率”的系列講座。共有來自生科院的50余名師生參加了本次活動,并現場操作體驗了Eppendorf 公司的PCR 儀、定量PCR
熒光定量PCR 因操作方便、運行速度快、實驗結果準確,受到越來越多的分子生物學研究者青睞。在實驗技術成熟的今天,也許對你來說,最難得不是實驗技術上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀——你要征詢實驗室成員的意見、分析實驗室目前乃至將來的需求、平衡實驗室的預算,更要詳細研究各種極富誘惑力的宣傳
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光定量PCR 因操作方便、運行速度快、實驗結果準確,受到越來越多的分子生物學研究者青睞。在實驗技術成熟的今天,也許對你來說,最難得不是實驗技術上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀——你要征詢實驗室成員的意見、分析實驗室目前乃至將來的需求、平衡實驗室的預算,更要詳細研究各種極富誘惑力的宣傳資
實時熒光定量PCR以其精確、快速、方便,越來越多的應用在科研、臨床及檢驗檢疫的各個領域。但是定量PCR是對精確性要求很高的實驗,不僅要求在實驗前有比較完整的實驗設計方案,而且實驗的條件對實驗結果的影響也非常大。這些都是很多老師與學生非常關心的問題,下面分別從這兩個方面來對定量PCR實驗做一些闡述。&
熒光定量PCR 因操作方便、運行速度快、實驗結果準確,受到越來越多的分子生物學研究者青睞。在實驗技術成熟的今天,也許對你來說,最難得不是實驗技術上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀——你要征詢實驗室成員的意見、分析實驗室目前乃至將來的需求、平衡實驗室的預算,更要詳細研究各種極富誘惑力的宣傳資料
2014 年 7 月,央視日前報道了湖南、湖北、安徽、福建等4省存在轉基因大米的新聞,引發社會極大關注。記者在武漢市一家大型超市,隨機購買5種大米。經檢測后發現,這 5 種大米中,有 3 種含轉基因成分:Bt63。Bt63 是一種抗蟲害的基因,它是蘇云金芽孢桿菌基因中的殺蟲晶體蛋白基因,可以有效防止
熒光定量PCR 因操作方便、運行速度快、實驗結果準確,受到越來越多的分子生物學研究者青睞。在實驗技術成熟的今天,也許對你來說,zui難得不是實驗技術上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀,面對各種不同性能的產品,您又該如何選擇呢?今天巴玖小編為您講解一下熒光定量PCR儀選擇要點及誤區
熒光定量PCR 因操作方便、運行速度快、實驗結果準確,受到越來越多的分子生物學研究者青睞。在實驗技術成熟的今天,也許對你來說,zui難得不是實驗技術上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀——你要征詢實驗室成員的意見、分析實驗室目前乃至將來的需求、平衡實驗室的預算,更要詳細研究各種極富誘惑力的宣傳
熒光定量PCR 因操作方便、運行速度快、實驗結果準確,受到越來越多的分子生物學研究者青睞。在實驗技術成熟的今天,也許對你來說,zui難得不是實驗技術上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀——你要征詢實驗室成員的意見、分析實驗室目前乃至將來的需求、平衡實驗室的預算,更要詳細研究各種極富誘惑力的宣傳
熒光定量PCR 因操作方便、運行速度快、實驗結果準確,受到越來越多的分子生物學研究者青睞。在實驗技術成熟的今天,也許對你來說,zui難得不是實驗技術上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀,面對各種不同性能的產品,您又該如何選擇呢?今天巴玖小編為您講解一下熒光定量PCR儀選擇要點及誤區首先建議大家
熒光定量PCR實驗指南一、基本步驟:1、目的基因(DNA和mRNA)的查找和比對;2、引物、探針的設計;3、引物探針的合成;4、反應體系的配制;5、反應條件的設定;6、反應體系和條件的優化;7、熒光曲線和數據分析;8、標準品的制備;二、技術關鍵:1、 目的基因(DNA和mRNA)的查找和比
2014 年 7 月,央視日前報道了湖南、湖北、安徽、福建等4省存在轉基因大米的新聞,引發社會極大關注。記者在武漢市一家大型超市,隨機購買5種大米。經檢測后發現,這 5 種大米中,有 3 種含轉基因成分:Bt63。Bt63 是一種抗蟲害的基因,它是蘇云金芽孢桿菌基因中的殺蟲晶體蛋白基
一般來講,進行real-time qPCR MasterMix都是2×的濃縮液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高,所以每個樣品至少要做3個平行孔,以防在后面的數據分析中,由于Ct相差較多或者SD太大,無法進行統計分析。通常來講,反應體系的引物終濃度為10
簡介:什么是PCR芯片? 實時定量PCR是檢測基因表達最靈敏,最可靠的方法。通過在試驗過程中,實時監測熒光染料的信號變化,反映樣品中的基因拷貝數。實時定量PCR線性范圍廣(能達到5個數量級),因此可以檢測同一樣品中表達量極低的基因和表達量很高的基因。但是,由于實時定量PCR需要制備標準曲線和同時分析
簡介:什么是PCR芯片?實時定量PCR是檢測基因表達最靈敏,最可靠的方法。通過在試驗過程中,實時監測熒光染料的信號變化,反映樣品中的基因拷貝數。實時定量PCR線性范圍廣(能達到5個數量級),因此可以檢測同一樣品中表達量極低的基因和表達量很高的基因。但是,由于實時定量PCR需要制備標準曲線和同時分析內
一般來講,進行real-time qPCR MasterMix都是2×的濃縮液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高,所以每個樣品至少要做3個平行孔,以防在后面的數據分析中,由于Ct相差較多或者SD太大,無法進行統計分析。通常來講,反應體系的引物終濃度為10
什么是PCR實驗的靈敏度?靈敏度指的是PCR擴增反應能夠檢測到目的基因的zui小值。研究結果表明,影 響PCR擴增效率的因素,如模板的復雜程度與完整性、引物的純度及其與模板的結合效率、反應溫度、DNA聚合酶的熱穩定性與擴增性能、反應緩沖液的離子組 成(主要指陽離子)、反應優化劑等等,都決
什么是PCR實驗的靈敏度?靈敏度指的是PCR擴增反應能夠檢測到目的基因的zui小值。研究結果表明,影 響PCR擴增效率的因素,如模板的復雜程度與完整性、引物的純度及其與模板的結合效率、反應溫度、DNA聚合酶的熱穩定性與擴增性能、反應緩沖液的離子組 成(主要指陽離子)、反應優化劑等等,都決定了PCR實
什么是PCR實驗的靈敏度?靈敏度指的是PCR擴增反應能夠檢測到目的基因的zui小值。研究結果表明,影 響PCR擴增效率的因素,如模板的復雜程度與完整性、引物的純度及其與模板的結合效率、反應溫度、DNA聚合酶的熱穩定性與擴增性能、反應緩沖液的離子組 成(主要指陽離子)、反應優化劑等等,都決定了PCR實
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合
在食品安全問題日益多元化的今天,占人類食品中特殊地位的乳及乳制品的安全性一直是社會和科學研究關注的焦點。乳制品營養豐富、搭配均衡,是一種經濟實惠的優質蛋白。我國是乳制品消費大國,也是世界第三大乳制品生產國。國家統計局數據顯示,我國城鎮居民家庭鮮奶人均購買量由1996年的4.6kg上升到
一、RNA的提取(詳見RNA提取及反轉錄)不同組織樣本的RNA提取適用不同的提取方法,因為Real-Time PCR對RNA樣品的質量要求較高,所以,正式實驗前要選擇一款適合自己樣品的提取方法,在實驗過程中要防止RNA的降解,保持RNA的完整性。在總rna的提取過程中,注意避免mRNA的斷裂;取2u
PCR的假陽性問題深受重視,但PCR假陰性問題相對于臨床檢測更為嚴重。其實PCR假陽性的問題是比較單純的,一般僅涉及污染和引物的非特異性問題。而污染可以通過嚴格的實驗室管理,合理的環境設置,以及加入UNG酶抗污染基本可以解決,而引物的非特異性問題基本屬于廠家試劑質量問題。而PCR的假陰性
PCR的假陽性問題深受重視,但我個人認為PCR假陰性問題相對于臨床檢測更為嚴重。其實PCR假陽性的問題是比較單純的,一般僅涉及污染和引物的非特異性問題。而污染可以通過嚴格的實驗室管理,合理的環境設置,以及加入UNG酶抗污染基本可以解決,而引物的非特異性問題基本屬于廠家試劑質量問題。而PCR的假陰性
開展 PCR 應具有一定的條件。需要一個正規的 pCR 實驗室,采集標本、核酸提取、擴增及產物分析應在不同的房間進行;需有嚴密的防污染措施、假陽性和假陰性結果的質控等。實驗者應具有一定的分子生物學理論知識及實驗技能,能夠及時發現和糾正實驗中的問題。目前,我國在 PCR 應用中尤其是在臨床診斷
ABI作為PCR儀中最值得信賴的品牌,引領了PCR儀一系列創新性設計革命。Veriti系出名門,秉承了一貫的可靠性,并是真正意義上的梯度多重控溫(六合一)梯度PCR儀。 溫度梯度PCR儀進展 溫度梯度PCR儀最先由Eppendorf公司在1998年研發成功推向市場(Mastercyc
開展 PCR 應具有一定的條件。需要一個正規的 pCR 實驗室,采集標本、核酸提取、擴增及產物分析應在不同的房間進行;需有嚴密的防污染措施、假陽性和假陰性結果的質控等。實驗者應具有一定的分子生物學理論知識及實驗技能,能夠及時發現和糾正實驗中的問題。目前,我國在 PCR 應用中尤其是在臨床診斷