高效毛細管電泳(HPLC)的特點
高效毛細管電泳(HPLC)亦即毛細管電泳(CE),是一種發展迅猛的新型的分離分析技術,與常用的高效液相色譜法(HPLC)相比,具有分析時間短,分離效率高,適應性廣,檢測限低,進樣量小,溶劑消耗少,自動化程度高等優點,近十多年來已廣泛應用于蛋白質、氨基酸、無機離子、有機化合物、藥物的分離分析,在生物醫藥學領域倍受青睞。與傳統的電泳相比,毛細管電泳主要特點有四個:一是高效,二是快速,三是微量,四是可以自動化。在毛細管區帶電泳中,柱效一般為每米幾十萬理論板數,高的可達每米100萬以上,而在凝膠電泳中這一指標竟能達到幾百萬甚至上千萬,通常的分析時間不超過30min,在采用電流檢測器,毛細管電泳的最低檢測極限可達10-19,即使是一般的紫外檢測器,大體也在10-13-10-15mol之間,因此樣品用量僅為納升而已,商品儀器的操作已可全部自動化。毛細管電泳和高效液相色譜(HPCE)一樣,同是液相分離技術,因此在很大程度上HPCE與HPLC可......閱讀全文
高效毛細管電泳(HPLC)的特點
高效毛細管電泳(HPLC)亦即毛細管電泳(CE),是一種發展迅猛的新型的分離分析技術,與常用的高效液相色譜法(HPLC)相比,具有分析時間短,分離效率高,適應性廣,檢測限低,進樣量小,溶劑消耗少,自動化程度高等優點,近十多年來已廣泛應用于蛋白質、氨基酸、無機離子、有機化合物、藥物的分離分析,在生物醫
高效毛細管電泳(HPLC)的基本原理
高效毛細管電泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE)是近年來發展起來的一種分離、分析技術,它是凝膠電泳技術的發展,是高效液相色譜分析的補充。該技術可分析的成分小至有機離子、大至生物大分子如蛋白質、核酸等。可用于分析多種體液樣本如血清或血漿、
高效毛細管電泳法的毛細管電泳的特點
柱效高,可達105~106/m分離速度快,幾十秒~幾十分鐘溶劑和試樣消耗極少沒有高壓泵,儀器成本比HPLC更低選擇性強
高效毛細管電泳儀有哪些特點
分離效率高,分析速度快,檢測靈敏度高? 試劑用量少,樣品預處理簡單? 微處理器控制,波長重復性高? 檢測范圍寬? 可變波長選擇,190~700nm連續可調? 液晶屏幕顯示,輕觸面板,程控找波長,自動調零? 獨特的氘燈溫度控制方式,氘燈使用壽命不少于2000小時? 進樣方式:電進樣 0~30KV可調
高效毛細管電泳色譜儀性能特點歸納
高效毛細管電泳色譜儀(CE)是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,是分析科學繼高效液相色譜儀之后的又一重大進展,使分析科學從微升級進入到了納升級水平,不僅使單細胞乃至單分子分析成為可能,也使蛋白質和核酸等生物大分子分析有了新的轉機。 C
高效液相色譜儀(HPLC)的保養
HPLC的日常操作條件:溫度:10~30℃;相對濕度
高效毛細管電泳法的缺點
毛細管電泳具備如下優點: (1) 高效 塔板數目在105-106 片/m 間,當采用CGE 時 毛細管電泳色譜圖,塔板數目可達107 片/m 以上; (2) 快速 一般在十幾分鐘內完成分離; (3) 微量 進樣所需的樣品體積為nL 級; (4) 多模式 可根據需要選用不同的分離模式且
高效液相色譜技術(HPLC)的技術原理
盡管二維凝膠電泳(2-DE)是常用的對全蛋白組的分析方法,但其存在分離能力有限、存在歧視效應、操作程序復雜等缺陷。對于分析動態范圍大、低豐度以及疏水性蛋白質的研究往往很難得到滿意的結果。Chong等使用HPLC/質譜比較分析惡性腫瘤前和癌癥兩種蛋白質差異表達。利用HPLC分離蛋白質,并用MALDI-
高效液相色譜技術(HPLC)的技術原理
盡管二維凝膠電泳(2-DE)是常用的對全蛋白組的分析方法,但其存在分離能力有限、存在歧視效應、操作程序復雜等缺陷。對于分析動態范圍大、低豐度以及疏水性蛋白質的研究往往很難得到滿意的結果。Chong 等使用HPLC/ 質譜比較分析惡性腫瘤前和癌癥兩種蛋白質差異表達。利用HPLC 分離蛋白質,并用MAL
關于高效毛細管電泳法的簡介
高效毛細管電泳法,是近年來發展最快的分析方法之一。是以高壓電場為驅動力,以毛細管為分離通道,依據樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現分離分析的液相分離方法。 高效毛細管電泳法的產品特點: 1、柱效高,可達105~106/m 2、分離速度快,數十秒~數十分鐘即可完成一個試樣的分析
高效液相色譜比高效毛細管電泳優勢的地方
高效液相和高效毛細管電泳是完全不同的兩種分析方法,分離機制和對分離物的要求完全不同。不能比 的。毛細管電泳主要用于蛋白質等帶電生物大分子的分離,而高效液相分離的成分化學結構要簡單,也沒有帶電要求。
高效液相色譜(HPLC)常見問題
1、HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法?樣品量不足:解決辦法為增加樣品量樣品未從柱子中流出:可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子樣品與檢測器不匹配:根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器檢測器衰減太多:調整衰減即可。檢測器時間常數太大:解決辦法為降低時間參數檢測器池窗污染:解決辦法為清洗池窗。檢測
高效液相色譜法(HPLC)復核細則
一、對起草單位的要求:1.HPLC法用于藥品的有關物質檢查或含量測定時,需提供建立HPLC法的依據及參考文獻。2.應對建立的方法進行論證,按照中國藥典2000年版第二部凡例與附錄收載的藥品質量標準分析方法驗證項下所列的要求進行試驗。3.建立方法時,應考慮下列事項:①首選填料為十八烷基鍵合硅膠
高效液相色譜(HPLC)常見問題
1、HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法樣品量不足:解決辦法為增加樣品量樣品未從柱子中流出:可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子樣品與檢測器不匹配:根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器檢測器衰減太多:調整衰減即可。檢測器時間常數太大:解決辦法為降低時間參數檢測器池窗污染:解決辦法為清洗池窗。檢測池
高效毛細管電泳儀的優勢
???????? 傳統電泳儀的局限性在于兩端電壓達到一定值時,會在電解質離子流中產生自熱,引起粘度和速度的梯度,導致區帶較寬,分離效率降低。高效毛細管電泳儀(HPCE)是在散熱效率極高的毛細管內進行樣品分離,操作簡單,分析速度快,進樣較其它分離方法少,僅需幾微升,靈敏度高,成本相對低,可反復使用毛細
高效毛細管電泳的分離原理總結
1 毛細管區帶電泳(Capillary Zone Electroporesis,CZE) 分離原理:毛細管區帶電泳出稱為自由溶液毛細管電泳,是毛細管電泳是最簡單的一種形式。其分離機理是基于各被物質的凈電荷與質量之間比值的差異,不同離子按照各自表面電荷密度的差異,以不同的速度在中解質中移動而
高效毛細管電泳的分離原理總結
1 毛細管區帶電泳(Capillary Zone Electroporesis,CZE)分離原理:毛細管區帶電泳出稱為自由溶液毛細管電泳,是毛細管電泳是最簡單的一種形式。其分離機理是基于各被物質的凈電荷與質量之間比值的差異,不同離子按照各自表面電荷密度的差異,以不同的速度在中解質中移動而導致分離,它
高效毛細管電泳分離模式
分離類型八種分離類型,介紹常用的幾種;根據試樣性質不同,采用不同的分離類型;每種機理的選擇性不同;一,毛細管區帶電泳capillary zone electrophoresis ,CZE帶電粒子的遷移速度=電泳和電滲流速度的矢量和.正離子:兩種效應的運動方向一致,在負極最先流出;中性粒子:無電泳現象
高效毛細管電泳儀分類
?高效毛細管電泳儀分類有多種。1、按分離目的可分:高效毛細管實驗室電泳儀和高效毛細管工業電泳儀。2、按分離原理可分:高效毛細管色譜電泳儀、高效毛細管區帶電泳儀、高效毛細管凝膠電泳儀和高效毛細管等電聚焦電泳儀等。3、按分離特征可分:高選擇性高效毛細管電泳儀、高靈敏度高效毛細管電泳儀和高分離度高效毛細管
超純水對高效液相(HPLC)實驗的影響
隨著時代和科技的發展,高效液相等精密分析儀器已普及至與分析測試有關的行業,對實驗水質要求也愈來愈高。現今高效液相(HPLC) 都要求用戶使用超純水定出平坦而沒有波峰的基線以保證分析測試的靈敏度,但有部分HPLC用戶因資金或習慣等原因仍沿用瓶裝飲用純凈水或蒸餾水進行實驗,效果往往不很理想。瓶裝純凈
高效液相色譜儀(HPLC)的品牌都有哪些
惠普公司的液相就是我們所熟悉的安捷倫(Agilent)液相,安捷倫公司99年從惠普中單獨分離出來,所以我們現在看見的安捷倫液相型號都是HP1100、HP1200、HP1260等等其它用得比較多的品牌有:日本島津(SHIMADZU)液相,美國沃特世(Waters)液相,其中以Waters液相最好,價錢
高效液相HPLC溶劑的選擇及使用(二)
2、溶劑的處理和更換 液相色譜溶劑應盡量使用HPLC級溶劑。HPLC級試劑是用特殊方法生產的含有最少的微粒和最低的紫外吸收物質。水也應達到HPLC級。液相色譜實驗室應配有純水發生器。非色譜純溶劑可通過蒸餾方法進行提純,除掉大部分有紫外吸收的雜質。另外,用氧化鋁或硅膠柱可除去極性強的化合物。
土霉素的高效液相色譜HPLC檢測方案
簡介:高效液相色譜HPLC檢測土霉素的方法,首頁要了解土霉素是什么和分子式等,然后通過制定高效液相色譜檢測方案,最后通過儀器與試劑等硬性條件進行土霉素檢測。【土霉素】土霉素:抗菌譜和應用與四環素相同。本品對腸道感染,立克次體病,包括流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、落基山熱、恙蟲病和Q熱,支原體屬感染
高效液相HPLC溶劑的選擇及使用(三)
3、溶劑與檢測器的匹配 在使用紫外可見光檢測器時,需選用無紫外吸收特性的溶劑作流動相。樣品測定波長應當在溶劑紫外吸收波長上限以上,噪聲降至10-4?~?10-5AU,才能保證檢測的靈敏度,才能用于梯度洗脫。流動相溶劑在整個梯度范圍內互溶性要好,盡量減少溶劑折光指數對溶劑組成梯度的影響。溶劑
高效液相色譜法HPLC實驗結果的分析
高效液相色譜和氣相色譜法(包括測定方法和計算方法)的定性和定量分析是相同的。定性分析采用純物質控制的色譜鑒別方法,非色譜鑒別方法結合化學分析或其他儀器分析方法采集組分;定量分析采用峰高或峰面積內標法、外標法或歸一化法進行定量,并與計算機結合作為現代分析方法對。定性分析色譜方法的定性分析的目的是確定每
高效液相色譜(HPLC)柱子的清洗和再生
1. 柱子的清洗 即使樣品和流動相已做過前處理,也仍難以完成避免柱子受到污染,因此必須對柱子行清洗。清洗應定期進行,如果在短期內分析許多樣品,則以每日清洗一次為宜,至少也應一周一次,防止有太多的雜質在柱上堆積。 反相柱的常規洗滌辦法是:分別取甲醇、三氯甲烷、甲醇-水各20倍柱體積(既對于一根4
高效液相HPLC溶劑的選擇及使用(一)
高效液相色譜法又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現對
毛細管電泳法的特點
1、電泳柱效更高,可達105m-1~106m-1,分離速度更快,在幾十秒至幾十分鐘內即可完成一個試樣的分析。2、溶劑和試樣消耗極少,試樣用量僅為納升級。3、沒有高壓泵輸液,因此儀器成本更低。4、通過改變操作模式和緩沖溶液的成分,毛細管電泳有很大的選擇性,可以對性質不同的各種分離對象進行有效的分離。
毛細管電泳法的特點
1、電泳柱效更高,可達105m-1~106m-1,分離速度更快,在幾十秒至幾十分鐘內即可完成一個試樣的分析。2、溶劑和試樣消耗極少,試樣用量僅為納升級。3、沒有高壓泵輸液,因此儀器成本更低。4、通過改變操作模式和緩沖溶液的成分,毛細管電泳有很大的選擇性,可以對性質不同的各種分離對象進行有效的分離。
毛細管電泳法的特點
1、電泳柱效更高,可達105m-1~106m-1,分離速度更快,在幾十秒至幾十分鐘內即可完成一個試樣的分析。2、溶劑和試樣消耗極少,試樣用量僅為納升級。3、沒有高壓泵輸液,因此儀器成本更低。4、通過改變操作模式和緩沖溶液的成分,毛細管電泳有很大的選擇性,可以對性質不同的各種分離對象進行有效的分離。毛