高效液相色譜技術(HPLC)的技術原理
盡管二維凝膠電泳（2-DE）是常用的對全蛋白組的分析方法，但其存在分離能力有限、存在歧視效應、操作程序復雜等缺陷。對于分析動態范圍大、低豐度以及疏水性蛋白質的研究往往很難得到滿意的結果。Chong等使用HPLC/質譜比較分析惡性腫瘤前和癌癥兩種蛋白質差異表達。利用HPLC分離蛋白質，并用MALDI-TOF-MS鑒定收集的組分，從而在兩種細胞中的差異表達中對蛋白質進行定量分析。多維液相色譜作為一種新型分離技術，不存在相對分子質量和等電點的限制，通過不同模式的組合，消除了二維凝膠電泳的歧視效應，具有峰容量高、便于自動化等特點。二維離子交換-反相色譜(2D-IEC-RPLC)是蛋白質組學研究中最常用的多維液相色譜分離系統。......閱讀全文
蛋白質組色譜儀種類
?蛋白質組色譜儀種類有多種。1、按功能可分：分析型蛋白質組色譜儀和制備型蛋白質組色譜儀。2、按分離目的可分：實驗室蛋白質組色譜儀和工業蛋白質組色譜儀。3、按應用范圍可分：專用型蛋白質組色譜儀和通用型蛋白質組色譜儀。4、按作用可分：蛋白質組定量分析色譜儀和蛋白質組定性分析色譜儀。5、按分離特征可分：高
蛋白質凝膠色譜儀分類
蛋白質凝膠色譜儀分類有多種。1、按分離目的可分：蛋白質凝膠實驗室色譜儀和蛋白質凝膠工業色譜儀。2、按功能可分：蛋白質凝膠分析色譜儀和蛋白質凝膠制備色譜儀。3、按結構可分：臺式蛋白質凝膠色譜儀和落地式蛋白質凝膠色譜儀。4、按分離規模可分：微型蛋白質凝膠色譜儀、小型蛋白質凝膠色譜儀和大型蛋白質凝膠色譜儀
手性色譜柱——蛋白質型
蛋白質型手性色譜柱屬于第5種類型。分離依賴于疏水相互作用和極性相互作用。已經有多種蛋白質用于此類手性色譜柱。目前使用較多的是α-酸性糖蛋白（α-Acid Glycoprotein，AGP），人血清白蛋白（Human Serum Albumin，HSA），牛血清白蛋白（Bovine Serum
使用疏水色譜和親和色譜純化蛋白質介紹
疏水色譜：疏水色譜基于蛋白質表面的疏水區與介質疏水配體間的相互作用，在高濃度鹽作用下，蛋白質的疏水區表面上有序排列的水分子通過鹽離子的破壞被釋放，裸露的疏水區與疏水配體相互作用而被吸附。疏水色譜就是利用樣品中各組分在色譜填料上配基相互作用的差異，在洗脫時各組分移動速度不同而達到分離的目的。隨著鹽離子
分析型蛋白質色譜儀類型
分析型蛋白質色譜儀類型有多種。1、按分離目的可分：分析型蛋白質化驗室色譜儀和分析型蛋白質工業色譜儀。2、按分離原理可分：分析型蛋白質分配色譜儀、分析型蛋白質離子交換色譜儀和分析型蛋白質凝膠色譜儀。3、按色譜柱形狀可分：填充柱分析型蛋白質色譜儀和毛細管柱分析型蛋白質色譜儀。4、按進樣自動性可分：自動進
蛋白質凝膠工業色譜儀分類
蛋白質凝膠工業色譜儀分類有多種。1、按分離規模可分：小型蛋白質凝膠工業色譜儀和大型蛋白質凝膠工業色譜儀。2、按作用可分：蛋白質凝膠工業定量色譜儀和蛋白質凝膠工業定性色譜儀。3、按產地可分：國產蛋白質凝膠工業色譜儀和進口蛋白質凝膠工業色譜儀。4、按洗脫方式可分：等度洗脫蛋白質凝膠工業色譜儀和梯度洗脫蛋
蛋白質、多肽液相色譜純化方法
?? 1、純化的一般目標和方法 首先，自然來源或者重組表達的蛋白質經過一些粗提的步驟（例如：勻漿、離心、硫酸銨沉淀等）成為穩定的可以用于色譜分離的樣品。 然后進行捕獲色譜（capturechromatography），主要目標是濃縮和去除大量的容易去除的雜質，此步最關心的是流速和載量，常采用高載
分析型蛋白質色譜儀類型
分析型蛋白質色譜儀類型有多種。1、按分離目的可分：分析型蛋白質化驗室色譜儀和分析型蛋白質工業色譜儀。2、按分離原理可分：分析型蛋白質分配色譜儀、分析型蛋白質離子交換色譜儀和分析型蛋白質凝膠色譜儀。3、按色譜柱形狀可分：填充柱分析型蛋白質色譜儀和毛細管柱分析型蛋白質色譜儀。4、按進樣自動性可分：自動進
制備型蛋白質色譜儀分類
制備型蛋白質色譜儀分類有多種。1、按分離目的可分：實驗室制備型蛋白質色譜儀和工業制備型蛋白質色譜儀。2、按產地可分：國產制備型蛋白質色譜儀和進口制備型蛋白質色譜儀。3、按洗脫方式可分：等度洗脫制備型蛋白質色譜儀和梯度洗脫制備型蛋白質色譜儀。4、按應用范圍可分：制備型蛋白質專用色譜儀和制備型蛋白質通用
蛋白質組色譜儀分類方法
蛋白質組色譜儀種類有多種。1、按功能可分：分析型蛋白質組色譜儀和制備型蛋白質組色譜儀。2、按分離目的可分：實驗室蛋白質組色譜儀和工業蛋白質組色譜儀。3、按應用范圍可分：專用型蛋白質組色譜儀和通用型蛋白質組色譜儀。4、按作用可分：蛋白質組定量分析色譜儀和蛋白質組定性分析色譜儀。5、按分離特征可分：高選
分離肽和蛋白質色譜柱的維護
1、使用常規要求pH：為了保證色譜柱長壽命，硅膠基質色譜柱的使用pH范圍是2～7，超出此范圍的色譜柱壽命與功能團結構有關，但是偏離2～7范圍越遠，色譜柱性能下降的越快。溫度：典型硅膠基質色譜柱的使用溫度在5℃與60℃之間，高溫使用會縮短柱壽命。緩沖溶液：生物樣品分離通常要求使用緩沖溶液控制流動相的p
高效液相蛋白質色譜儀種類
高效液相蛋白質色譜儀種類有多種。1、按分離目的可分：實驗室高效液相蛋白質色譜儀和工業高效液相蛋白質色譜儀。2、按功能可分：分析型高效液相蛋白質色譜儀和制備型高效液相蛋白質色譜儀。3、按固定相和流動相的極性大小可分：正相高效液相蛋白質色譜儀和反相高效液相蛋白質色譜儀。4、按靈敏性可分：微量高效液相蛋白
蛋白質專用色譜儀的類型
蛋白質專用色譜儀的類型有多種。1、按分離目的可分：實驗室蛋白質專用色譜儀和工業蛋白質專用色譜儀。2、按功能可分：分析型蛋白質專用色譜儀和制備型蛋白質專用色譜儀。3、按色譜柱形狀可分：填充柱蛋白質專用色譜儀和毛細管蛋白質專用色譜儀。4、按靈敏度可分：微量蛋白質專用色譜儀和痕量蛋白質專用色譜儀。5、按洗
蛋白質、多肽液相色譜純化方法簡介
?修飾肽純化的一般目標和方法? ? 首先，自然來源或者重組表達的蛋白質經過一些粗提的步驟（例如：勻漿、離心、硫酸銨沉淀等）成為穩定的可以用于色譜分離的樣品。然后進行捕獲色譜（capture chromatography），主要目標是濃縮和去除大量的容易去除的雜質，此步zui關心的是流速和載量，常采用
蛋白質制備液相色譜儀分類方法
蛋白質制備液相色譜儀分類方法有多種。1、按分離目的可分：實驗室蛋白質制備液相色譜儀和工業蛋白質制備液相色譜儀。2、按產地可分：國產蛋白質制備液相色譜儀和進口蛋白質制備液相色譜儀。3、按分離規模可分：小型蛋白質制備液相色譜儀和大型蛋白質制備液相色譜儀。4、按應用范圍可分：專用型蛋白質制備液相色譜儀和通
分離肽和蛋白質色譜柱的維護
1、使用常規要求?pH：為了保證色譜柱長壽命，硅膠基質色譜柱的使用pH范圍是2～7，超出此范圍的色譜柱壽命與功能團結構有關，但是偏離2～7范圍越遠，色譜柱性能下降的越快。?溫度：典型硅膠基質色譜柱的使用溫度在5℃與60℃之間，高溫使用會縮短柱壽命。?緩沖溶液：生物樣品分離通常要求使用緩沖溶液控制流動
蛋白質、多肽液相色譜純化方法簡介
1、純化的一般目標和方法首先，自然來源或者重組表達的蛋白質經過一些粗提的步驟（例如：勻漿、離心、硫酸銨沉淀等）成為穩定的可以用于色譜分離的樣品。然后進行捕獲色譜（capture chromatography），主要目標是濃縮和去除大量的容易去除的雜質，此步最關心的是流速和載量，常采用高載量、
蛋白質、多肽液相色譜純化方法簡介
1、純化的一般目標和方法首先，自然來源或者重組表達的蛋白質經過一些粗提的步驟(例如：勻漿、離心、硫酸銨沉淀等)成為穩定的可以用于色譜分離的樣品。?然后進行捕獲色譜(capture chromatography)，主要目標是濃縮和去除大量的容易去除的雜質，此步最關心的是流速和載量，常采用高載量、快流速
蛋白質、多肽液相色譜純化方法簡介
1、純化的一般目標和方法首先，自然來源或者重組表達的蛋白質經過一些粗提的步驟(例如：勻漿、離心、硫酸銨沉淀等)成為穩定的可以用于色譜分離的樣品。然后進行捕獲色譜(capture chromatography)，主要目標是濃縮和去除大量的容易去除的雜質，此步最關心的是流速和載量，常采用高載量、快流速凝
蛋白質制備液相色譜儀分類方法
蛋白質制備液相色譜儀分類方法有多種。1、按分離目的可分：實驗室蛋白質制備液相色譜儀和工業蛋白質制備液相色譜儀。2、按產地可分：國產蛋白質制備液相色譜儀和進口蛋白質制備液相色譜儀。3、按分離規模可分：小型蛋白質制備液相色譜儀和大型蛋白質制備液相色譜儀。4、按應用范圍可分：專用型蛋白質制備液相色譜儀和通
怎樣利用高效液相色譜分離蛋白質
高效液相色譜純化蛋白質一般是反相色譜和正相色譜兩種柱子 反相色譜類似于疏水相互作用色譜，正相色譜類似于分子排阻色譜，都是針對純化蛋白質的柱子。
蛋白質、多肽液相色譜純化方法簡介
1、純化的一般目標和方法 首先，自然來源或者重組表達的蛋白質經過一些粗提的步驟(例如：勻漿、離心、硫酸銨沉淀等)成為穩定的可以用于色譜分離的樣品。 然后進行捕獲色譜(capture chromatography)，主要目標是濃縮和去除大量的容易去除的雜質，此步最關心的是流速和載量
蛋白質制備液相色譜儀分類方法
蛋白質制備液相色譜儀分類方法有多種。1、按分離目的可分：實驗室蛋白質制備液相色譜儀和工業蛋白質制備液相色譜儀。2、按產地可分：國產蛋白質制備液相色譜儀和進口蛋白質制備液相色譜儀。3、按分離規模可分：小型蛋白質制備液相色譜儀和大型蛋白質制備液相色譜儀。4、按應用范圍可分：型蛋白質制備液相色譜儀和通用型
蛋白質、多肽液相色譜純化方法簡介
修飾肽純化的一般目標和方法 首先，自然來源或者重組表達的蛋白質經過一些粗提的步驟(例如：勻漿、離心、硫酸銨沉淀等)成為穩定的可以用于色譜分離的樣品。 然后進行捕獲色譜(capture chromatography)，主要目標是濃縮和去除大量的容易去除的雜質，此步最關心的是流速和載
蛋白質、多肽液相色譜純化方法介紹（三）
2、純化前的準備工作?（1）樣品穩定性試驗?a、測定樣品在pH2-9的穩定性；b、測定樣品在0-4mol/LNaCl及0-2mol/L硫酸銨中的穩定性；c、測定樣品在0-50%乙醇、甲醇中的穩定性；d、測定樣品在4-40℃的穩定性；e、室溫下靜置過夜，測定對蛋白水解酶的穩定性。（2）樣品預處理?a、
高速逆流色譜雙水相體系分離蛋白質
摘要:利用多分離柱高速逆流色譜儀,研究了聚乙二醇1000(PEG1000)-磷酸鹽雙水相體系的固定相保留率及該體系對蛋白質混合物和雞蛋清樣品的分離,以14.0%PEG1000-16.0%磷酸鹽體系的上相為固定相,在流速0.16mL/min和轉速900r/min的條件下,固定相的保留率達到33.3%"
蛋白質制備液相色譜儀分類方法詳解
蛋白質制備液相色譜儀怎么分類？蛋白質制備液相色譜儀分類方法有哪些？下面蘇州萊頓就為大家介紹蛋白質制備液相色譜儀分類方法。蛋白質制備液相色譜儀分類方法有多種。1、按分離目的可分：實驗室蛋白質制備液相色譜儀和工業蛋白質制備液相色譜儀。2、按產地可分：國產蛋白質制備液相色譜儀和進口蛋白質制備液相色譜儀。3
蛋白質制備液相色譜儀分類方法詳解
蛋白質制備液相色譜儀分類方法有多種。1、按分離目的可分：實驗室蛋白質制備液相色譜儀和工業蛋白質制備液相色譜儀。2、按產地可分：國產蛋白質制備液相色譜儀和進口蛋白質制備液相色譜儀。3、按分離規模可分：小型蛋白質制備液相色譜儀和大型蛋白質制備液相色譜儀。4、按應用范圍可分：專用型蛋白質制備液相色譜儀和通
蛋白質制備液相色譜儀分類方法詳解
蛋白質制備液相色譜儀怎么分類？蛋白質制備液相色譜儀分類方法有哪些？蛋白質制備液相色譜儀分類方法有多種。1、按分離目的可分：實驗室蛋白質制備液相色譜儀和工業蛋白質制備液相色譜儀。2、按產地可分：國產蛋白質制備液相色譜儀和進口蛋白質制備液相色譜儀。3、按分離規模可分：小型蛋白質制備液相色譜儀和大型蛋白質
蛋白質、多肽液相色譜純化方法介紹（一）
1、純化的一般目標和方法?首先，自然來源或者重組表達的蛋白質經過一些粗提的步驟（例如：勻漿、離心、硫酸銨沉淀等）成為穩定的可以用于色譜分離的樣品。然后進行捕獲色譜（capturechromatography），主要目標是濃縮和去除大量的容易去除的雜質，此步最關心的是流速和載量，常采用高載量、快流速凝