免疫組化基礎知識1
免疫組織化學的概念: 免疫組化是利用抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學。 免疫組化實驗所用的抗體有哪些? 免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體,應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細胞克隆所產生的抗體混合物。 免疫組化實驗所用的組織和細胞標本有哪些? 實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類,前者包括石蠟切片(病理大片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片。 其中石蠟切片是制作組織標本最常用、最基本的方法,對于組織形態保存好,且能作連續切片,有利于各種染色對照觀察;還能......閱讀全文
免疫組化基礎知識1
免疫組織化學的概念:?免疫組化是利用抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學。?免疫組化實驗所用的抗體有哪些??免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆
免疫組化基礎知識2
*組織凍結過程中,細胞內、外的水分會形成冰晶,凍結的速度愈慢,冰晶顆粒愈大,可嚴重影響組織、細胞的形態結構。因此制備凍塊時要求低溫、速凍。?1、冰凍組織塊的常用方法?*液氮中冰凍:組織投入液氮中 (一196?C)中10~20sec;?*干冰中加入丙酮(或異戊烷),液體立即氣化起泡,溫度降至一70?C
病毒基礎知識(1)
病毒的發現與研究歷史一、病毒病由來已久地球上的人類,其他動物和植物遭受病毒病的折磨已有許多世紀。許多記述表明至少在公元前二至三個世紀印度和中國就存在天花,中國從公元十世紀宋真宗時代就有接種人痘預防天花的記載了。在明代隆慶年間(1567-1572),人痘預防天花推行甚廣,先后傳至俄國、日本、朝鮮、土耳
免疫組化技術規范1
歐美國家相繼開展了免疫組化質量控制工作,建立了一套比較完善的質量控制方法和程序。中國病理工作者委員會(CCP)免疫組化研究中心借鑒國外的先進經驗并結合我國當前的實際情況開始探索一種適合我國免疫組化質控的方法,同時,發現和推廣標準化的染色程序,改善和提高免疫組化實驗的可靠性,使免疫組化技術更具標準化,
檢測數據處理基礎知識1
誤差及相關概念 → 真實值與標準值 誤差是測量值與真實結果之間的差異,要想知道誤差的大小,必須知道真實的結果,這個真實的值,我們稱之“真值”。 1. 真實值 從理論上說,樣品中某一組分的含量必然有一個客觀存在的真實數值,稱之為“真實值”或“真值”。用“μ”表示。但實際上,對于客觀存在的真值,人
RNA干擾(RNA-interference,RNAi)基礎知識(1)
Rnai最近由于RNA 干擾(RNA interference,RNA i)的發現使反義領域的研究增多。這種自然發生的現象最早是在秀麗線蟲中發現的(1),是序列特異性地使轉錄后的基因沉默的有力機制。由于最近兩年在 RNA i領域取得的進步,已經有許多這方面的綜述發表(2-4)。RNA 干擾是
免疫組化技術典型實驗案例學習1
案例一:DAB染色后切片著色一片黃/背景深背景:奧運會期間我們課題組研究生都在實驗室做實驗,許多從北京購買的試劑買不到,對我們的許多實驗產生了很大的影響。我以前一直用中杉金橋的Sp三步法染色試劑盒,效果不錯,在奧運會期間我準備做同批實驗分不同批次酶免疫組化實驗,第一批組化實驗結果很好,抗體濃度感覺比
免疫組化的經驗總結(1)-常見問題
免疫組織化學的概念:?免疫組化是利用抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑?(熒光素、酶、金屬離子、同位素)?顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學。免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。免疫組化實驗所用的組織和細胞
免疫組化(ICC)原理和IHC/ICC實驗方法1
一、免疫組化(Immunohistochemistry,IHC/ Immunocytochemistry, ICC)原理免疫組化是應用免疫學基本原理--抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋
免疫組化方法原理解述及其中關鍵環節1
一、酶免疫組化的關鍵環節1、標本固定:固定的目的是①防止標本從玻片上脫落;②除去防礙抗原-抗體結合的類脂,使抗原抗體結合物易于獲得良好的染色結果;③固定的標本易于保存。2、脫水、石蠟包埋和制片:脫水用梯度乙醇(由低到高)充分脫水、對組織要完全浸蠟、切片時刀片要干凈和鋒利。否則,容易裂片和脫片等。3、
免疫組化
免疫組織化學又稱免疫細胞化學,可以用于:(1)顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應;(2)是對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。實驗方法原理帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應抗原進行定性、定位、定量測定的
免疫組化
一,免疫組織化學簡介免疫組織化學又稱免疫細胞化學,是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應炕原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起來,借助顯微鏡(包括熒光顯微鏡、電子顯微鏡)的顯像和放大作用,在細胞、亞
免疫組化
一,免疫組織化學簡介免疫組織化學又稱免疫細胞化學,是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應炕原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起來,借助顯微鏡(包括熒光顯微鏡、電子顯微鏡)的顯像和放大作用,在細胞、亞
ELISA基礎知識
ELISA原理與分類1. ELISA的原理ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載
HPLC基礎知識
鑒于HPLC應用在藥品分析中越來越多,因此每一個藥品分析人員應該掌握并應用HPLC。?(一)概論?一、液相色譜理論發展簡況?色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時,由于與固定相(stationary phase)發生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的
HPLC基礎知識
鑒于HPLC應用在藥品分析中越來越多,因此每一個藥品分析人員應該掌握并應用HPLC。 (一)概論 一、液相色譜理論發展簡況 色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時,由于與固定相(stationary ph
水質基礎知識
?一、9種水中的雜質二.10種常見的水處理方法三、各種水處理方法與處理對象的比較四、水處理常用名詞解釋?一、9種水中的雜質1、微粒物質(Particulate Matter)包括泥沙、鐵銹、藻類、懸浮物、微纖維等微粒雜質,肉眼可見。這些微粒常常懸浮在水流之中,水產生的渾濁現象。這些微粒很不穩定,可以
免疫組化染色過程中存在的問題、原因分析及對策1
良好的免疫組化染色切片是正確判斷染色結果的基礎和前提。由于免疫組化染色過程中存在很多步驟或環節,每一個步驟或環節都可能影響到染色的最終結果,因此,要做好一張高質量的免疫組化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技術員和病理醫生密切配合、相互協調、共同努力才能保證做出合格的免疫組化切片。雖然免疫組化染色
免疫組化染色過程中存在的問題、原因分析及其對策1
良好的免疫組化染色切片是正確判斷染色結果的基礎和前提。由于免疫組化染色過程中存在很多步驟或環節,每一個步驟或環節都可能影響到染色的最終結果,因此,要做好一張高質量的免疫組化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技術員和病理醫生密切配合、相互協調、共同努力才能保證做出合格的免疫組化切片。雖然免疫組化染色
免疫組化準備
最重要的是選擇好一抗、二抗或者還有三抗,注意抗體的特異性、效價和交叉反應,最好用單抗。其他常用試劑有:1、0.01M(pH7.4)的磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS),稀釋抗體和洗片子用;2、清潔液、純水,洗玻片用3、多聚賴氨酸處理載玻片,防止脫片4、固定液:4%多聚甲醛或冷丙酮等;5、15%~30%蔗糖
免疫組化操作
?(一)、儀器設備1. 18cm不銹鋼高壓鍋或電爐或用微波爐.2. 水浴鍋(二)、試 劑1. PBS緩沖液(pH7.2―7.4)2.0.01mol/L檸檬酸鈉緩沖液(CB,pH6.0,1000ml)3. 3%甲醇―H2O2溶液:用30%H2O2和80%甲醇溶液配制4. 風裱劑:a. 甘油和0.5mm
免疫組化步驟
1。4%多聚甲醛常規灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)中過夜。蠟塊制作。切片,貼片。0.01MKPBS清洗5min×3后;?2。加入配好的0.3%的過氧化氫甲醇溶液(甲醇80ml+0.01MKPBS 100ml+30%過氧化氫)30min,以消除內源性過氧化物酶的影響,0.01MPBS清洗5m
免疫組化實驗
實驗方法原理 免疫組織化學又稱免疫細胞化學,是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起來,借助顯微鏡(包括熒光顯微鏡、電子顯微鏡)的顯像和放大作用,在細胞、亞細胞水
免疫組化流程
實驗步驟?第一天:1、組織切片置于60℃烘烤1hr2、二甲苯1、2 分別浸泡15min,脫蠟3、水化:100% Etoh 10min X 295% Etoh 5min X 185% Etoh 5min X 170% Etoh 5min X 1注:以下步驟切勿讓組織處于干燥狀態!4、將切片置于修復盒,
蛋白激酶B(Akt1/PKBa)免疫組化試劑盒操作步驟
蛋白激酶B(Akt1/PKBa)免疫組化試劑盒操作步驟:1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀
物理吸附基礎知識
如何確定熱自由空間?測定熱自由空間有兩種方法:方法一:在歧管中充入V1體積的氦氣后,壓力為P1,打開歧管和樣品管間的隔離閥,使氣體擴散到原本已經抽空的樣品管中,平衡后的壓力為P2,此時樣品管并未浸沒在冷浴中,溫度為Tw。根據質量平衡方程可得:其中,Vfw代表熱自由空間體積,是樣品管的體積與樣品占據體
離心的基礎知識
Centrifugation?is a process used to separate or concentrate materials suspended in a liquid medium. The theoretical basis of this technique is the eff
XRF選購基礎知識
1.儀器品牌&公司實力這點和購買其他商品一樣,我們都會注意到這點,購買XRF我們要看這個品牌是不是在RoHS指令執行期間才冒出來的,大家都知道儀器技術都是要靠積累和沉淀的,還有大家關心的是會不會這個公司應為RoHS而生,因為RoHS而亡.如果這個公司賺夠錢,突然蒸發了,那用戶怎么辦,售后服務由誰來負
PCR基礎知識指南
近年來,PCR技術在“微量證據”方面大放異彩,無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸,還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液,只要能分離出一丁點的DNA,就能用PCR加以放大,進行比對。然而這僅僅只是我們對PCR技術探索、應用的一小部分,它的潛在價值不可限量,還需要人類的不斷研究。聚合酶鏈式
質譜基礎知識
◇常用的質量單位◇原子結構及其質量◇原子量◇同位素及同位素豐度同位素即具有相同的原子序數而又具有不同的質量數的原子叫作同位素。同位素豐度即自然界中某同位素原子所占的百分數叫做該同位素的天然豐度。◇同位素表示法