診斷性二代測序指南
通過二代測序（next-generation sequencing，NGS）能夠快速地對某個個體患者的數千個甚至數百萬個DNA堿基對進行測序。這一技術快速出現并且獲得成功，這預示著一個遺傳學診斷的新的時代的到來。但是，新技術也帶來了新的挑戰，一方面是技術層面上的，即數據處理問題，另一方面是對結果的解釋和后續遺傳咨詢方面的問題，而所有這些都會涉及到對NGS在診斷方面的精確定位問題，無論是今天還是明天都是如此。在著手購置進行診斷性NGS的機器以及有關技術之前尚有許多問題需要處理。基于上述情況，我們提出了這份指南。這些指南最主要的是解決NGS檢測在罕見的和主要的單基因遺傳病方面的問題，主要集中在對基因集合的靶向分析方面，或是通過特異性捕獲檢測，或是從全外顯子測序中提取數據。原則上說，全基因組分析可能并且很快會被應用以提取相類似的數據，但全外顯子測序也能夠檢測到疾病的其他分子特征，因此其應用會更加廣泛。......閱讀全文
二代測序原理
第二代測序（Next-generation sequencing，NGS）又稱為高通量測序（High-throughput sequencing），是基于PCR和基因芯片發展而來的DNA測序技術。我們都知道一代測序為合成終止測序，而二代測序開創性的引入了可逆終止末端，從而實現邊合成邊測序（Seque
二代測序技術
人們常說“事后諸葛亮”，可見“料事如神”是一個讓人艷羨的能力。現代科技的發展讓人們無限接近這種能力，天氣預報就是現代人諸多“料事如神”本領中的一種，不斷進步中切實提高了生活品質與舒適度。個人體會進步主要體現在兩個方面：1.越來越說人話。印象里小時候聽天氣預報感覺聽的是中文，但是這些中國話想表達什么聽
不卑不亢看待二代測序
人們常說“事后諸葛亮”，可見“料事如神”是一個讓人艷羨的能力。現代科技的發展讓人們無限接近這種能力，天氣預報就是現代人諸多“料事如神”本領中的一種，不斷進步中切實提高了生活品質與舒適度。個人體會進步主要體現在兩個方面： 1.越來越說人話。印象里小時候聽天氣預報感覺聽的是中文，但是這些中國話想表
二代測序及其應用
二代測序為高通量測序，采用微珠或高密度芯片邊合成邊測序，代表有454，solexa，solid，高通量，可一次獲得數G數據，相對與第三代，都仍然需要擴增的方法放大信號，擴增后再檢測。二代測序應用如下：1、Illumina 原理：橋式PCR+4色熒光可逆終止+激光掃描成像。2、Roche 454：油包
二代測序及其應用
二代測序為高通量測序，采用微珠或高密度芯片邊合成邊測序，代表有454，solexa，solid，高通量，可一次獲得數G數據，相對與第三代，都仍然需要擴增的方法放大信號，擴增后再檢測。二代測序應用如下：1、Illumina 原理：橋式PCR+4色熒光可逆終止+激光掃描成像。2、Roche 454：油包
二代測序分析未來如何
二代測序數據分析越來越熱但是我覺得雖然在這個大環境下還是應該冷靜思考一下。數據分析和數據分析員，我覺得要先弄清這兩者的區別，數據分析，現在注重的算法和生物學的結合，優化現有的分析流程和對大數據背景下的深度挖掘（其實對計算機和算法的要求更高一些），如果數據分析員其實說白了就是一個重復分析流程的搬磚工。
診斷性二代測序指南
?? 通過二代測序（next-generation sequencing，NGS）能夠快速地對某個個體患者的數千個甚至數百萬個DNA堿基對進行測序。這一技術快速出現并且獲得成功，這預示著一個遺傳學診斷的新的時代的到來。但是，新技術也帶來了新的挑戰，一方面是技術層面上的，即數據處理問題，另一方
什么是二代測序技術
二代測序技術又稱為高通過量測序技術，是對傳統Sanger測序（稱為一代測序技術）革命性的改變。二代測序技術的核心思想是邊合成邊測序，可以一次并行對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定，所以又被稱深度測序。由于二代測序技術具有多樣本、多位點同時進行測序并且具有較高的覆蓋率等優勢，在生命科學領域已經被
什么是二代測序技術
二代測序技術又稱為高通過量測序技術，是對傳統Sanger測序（稱為一代測序技術）革命性的改變。二代測序技術的核心思想是邊合成邊測序，可以一次并行對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定，所以又被稱深度測序。由于二代測序技術具有多樣本、多位點同時進行測序并且具有較高的覆蓋率等優勢，在生命科學領域已經被
什么是基因二代測序
第二代測序為高通量測序，采用微珠或高密度芯片邊合成邊測序，代表有454，solexa，solid，高通量，可一次獲得數G數據，相對與第三代，都仍然需要擴增的方法放大信號，擴增后再檢測。第二代測序技術的核心思想是邊合成邊測序（Sequencing by Synthesis），即通過捕捉新合成的末端的標
二代測序原理及應用
二代測序原理及應用如下：一、原理二代測序原理也就是文庫構建，PCR產生的片段或基因組打斷的片段兩端需要添加接頭修飾才能進行測序。1、末端修飾。打斷的片段是隨機斷裂，其末端可能是不平的。因此，建庫第一步是補齊不平的末端。2、添加接頭。經過末端修飾后的DNA片段3’末端具有突出的A尾，而接頭具有突出的T
高通量測序技術——第二代測序技術
高通量測序技術是對傳統測序一次革命性的改變，一次對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定，因此在有些文獻中稱其為下一代測序技術(next generation sequencing)足見其劃時代的改變，同時高通量測序使得對一個物種的轉錄組和基因組進行細致全貌的分析成為可能，所以又被稱為深度測序(de
一代測序和二代測序的區別
一、含義不同：第一代測序：指雙脫氧末端終止法，擴增后通過毛細管電泳讀取序列，每次獲取數據量少。第二代測序：為高通量測序，采用微珠或高密度芯片邊合成邊測序，代表有454，solexa，solid，高通量，可一次獲得數G數據，相對與第三代，都仍然需要擴增的方法放大信號，擴增后再檢測。二、作用不同：San
第二代DNA測序技術
DNA總的說來，第一代測序技術的主要特點是測序讀長可達1000bp，準確性高達99.999%，但其測序成本高，通量低等方面的缺點，嚴重影響了其真正大規模的應用。因而第一代測序技術并不是最理想的測序方法。經過不斷的技術開發和改進，以Roche公司的454技術、illumina公司的Solexa，His
不同平臺的二代測序技術
二代測序技術基于大規模平行測序技術（massive parallel analysis，MPS），它能同時完成測序模板互補鏈的合成和序列數據的獲取。主要可以分成Roche 454焦磷酸測序、Illumina Solexa合成測序和ABI SOLiD連接法測序。 （1）Roche 454焦磷酸測
單基因檢測和二代測序
在肺癌患者中，有一批攜帶驅動基因突變的患者，在治療上可以針對突變的基因采用靶向治療。在預后上，這部分患者也往往具有較長的生存期。目前，指南推薦了9個靶向治療的相關基因，他們分別是：EGFR、ALK、ROS1、Her2、KRAS、MET、RET、BRAF和最近一年剛進入指南的NTRK基因。為了識別這一
第二代測序（NGS）技術
二代測序是一個強大的功能平臺，它可以同時給數以萬計的DNA分子進行測序。由于這種可以多個樣本同時測序的能力，在個性化醫療、遺傳疾病和臨床診斷等方面，二代測序也就是高通量測序開創了革命性的領域。 早在1900年代就發明的Sanger測序法，成為了DNA測序的黃金法則，即便到了今天它仍被廣泛用來進
一代測序，二代測序，三代測序的優點缺點
一代測序，二代測序，三代測序的優點缺點分別介紹如下：一代測序優點是讀長較長、準確性高。缺點是測序成本高、通量低，使得de novo測序、轉錄組測序等應用難以普及。二代測序優點是相比一代測序大幅降低了成本，保持了較高準確性，并且大幅降低了測序時間，將一個人類基因組從3年降為1周以內。缺點是序列讀長方面
一代測序，二代測序，三代測序的優點缺點
一代測序，二代測序，三代測序的優點缺點分別介紹如下：一代測序優點是讀長較長、準確性高。缺點是測序成本高、通量低，使得de novo測序、轉錄組測序等應用難以普及。二代測序優點是相比一代測序大幅降低了成本，保持了較高準確性，并且大幅降低了測序時間，將一個人類基因組從3年降為1周以內。缺點是序列讀長方面
二代測序的焦磷酸測序，合成法測序，連接法測序和離子半導體測序原理
不同的二代測序平臺的區別主要體現在測序反應的技術上，這些差別可以分為4類： 焦磷酸測序，合成法測序，連接法測序和離子半導體測序。焦磷酸測序 在焦磷酸測序中，測序反應通過每個核苷酸結合過程中釋放的焦磷酸來調控。釋放的焦磷酸參與了一系列化學反應從而導致鏈光的產生。發出的光由記錄基因蔟相應序列的相
一代測序技術，二代測序技術具有哪些優點
相比一代測序技術，二代測序技術優點如下：1、Illumina 原理：橋式PCR+4色熒光可逆終止+激光掃描成像優勢：Illumina的這種測序技術每次只添加一個dNTP的特點能夠很好的地解決同聚物長度的準確測量問題，它的主要測序錯誤來源是堿基的替換。而讀長短（200bp-500bp）也讓其應用有所局
一代測序、二代測序及三代測序的應用對比
一、初現廬山真面目 一代測序：又稱Sanger測序(多分子，單克隆) 歷史：第一代DNA測序技術(又稱Sanger測序)在1975年，由Sanger等人開創，并在1977年完成第一個基因組序列(噬菌體X174)，全長5375個堿基。研究人員經過30年的實踐并對技術及測序策略的不斷改進(如使用
一代測序、二代測序及三代測序的應用對比
一、初現廬山真面目 一代測序：又稱Sanger測序(多分子，單克隆) 歷史：第一代DNA測序技術(又稱Sanger測序)在1975年，由Sanger等人開創，并在1977年完成第一個基因組序列(噬菌體X174)，全長5375個堿基。研究人員經過30年的實踐并對技術及測序策略的不斷改進(如使用
一代測序、二代測序和三代測序各有什么優勢
一代測序、二代測序和三代測序的優勢如下：第一代測序：指雙脫氧末端終止法，（Sanger法）擴增后通過毛細管電泳讀取序列，每次獲取數據量少。優勢：由于ddNTP的2’和3’都不含羥基，其在DNA的合成過程中不能形成磷酸二酯鍵，因此可以用來中斷DNA合成反應。在4個DNA合成反應體系中分別加入一定比例帶
一代測序、二代測序和三代測序各有什么優勢
一代測序、二代測序和三代測序的優勢如下：第一代測序：指雙脫氧末端終止法，（Sanger法）擴增后通過毛細管電泳讀取序列，每次獲取數據量少。優勢：由于ddNTP的2’和3’都不含羥基，其在DNA的合成過程中不能形成磷酸二酯鍵，因此可以用來中斷DNA合成反應。在4個DNA合成反應體系中分別加入一定比例帶
二代測序（Next－generation－sequencing）的定義
二代測序也被成為高通量測序指的是現代不同的測序技術，不同于之前的Sanger測序，它的速度更快，價格也更為便宜，主要有以下幾個平臺： － Illumina (Solexa) sequencing － Roche 454 sequencing － Ion torrent: Proton
二代測序（Next－generation－sequencing）的原理
此處主要介紹Illumina 平臺的工作原理。 從本質上而言，二代測序（NGS）和Sanger測序相同，都是在每一個測序周期中，利用計算機檢測DNA聚合酶催化熒光標記的dNTP結合到DNA模板時產生的熒光信號。但與Sanger單位時間檢測單片段不同的是，NGS能同時檢測成千上萬的孔道的信號，因
第二代基因測序的意義
基因測序只是基因檢測的方法之一，其又叫基因譜測序，是國際上公認的一種基因檢測標準。?基因測序廣為人知的還有針對唐氏綜合征篩查的無創產前基因檢測。只需要孕婦5毫升血，通過化驗血液中甲型胎兒蛋白（AFP）、人類絨毛膜促性腺激素（β-hCG）的濃度，就可以算出胎兒出現唐氏綜合征的危險性。最近公眾關注的H7
第二代測序技術：高速發展的高通量測序技術
高通量測序技術是對傳統測序一次革命性的改變，一次對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定，因此在有些文獻中稱其為下一代測序技術(next generation sequencing)足見其劃時代的改變，同時高通量測序使得對一個物種的轉錄組和基因組進行細致全貌的分析成為可能，所以又被稱為深度測
相比一代測序技術，二代測序技術具有哪些優點
第一代指雙脫氧末端終止法，擴增后通過毛細管電泳讀取序列，每次獲取數據量少第二代為高通量測序，采用微珠或高密度芯片邊合成邊測序，代表有454，solexa，solid，高通量，可一次獲得數G數據，相對與第三代，都仍然需要擴增的方法放大信號，擴增后再檢測。第三代特點是單分子測序，多基于納米科技，無需擴增