(一)原理白細胞介素-2(IL-2)是由活化的輔助性T細胞分泌的一種細胞增殖因子,具有促T細胞增殖和維持T細胞體外長期生長的作用。CTLL-2為IL-2依賴細胞株可用作IL-2生物學活性定量檢測。本實驗采用MTT分析法,通過測定CTLL-2細胞的增殖量,確定IL-2生物學活性單位。檢測IL-2的生物學活性,可以間接了解輔助性T細胞的功能。(二)材料(1)1)10%FCS-RPMI-1640培養液,含2mmol/L谷氨酰胺、25mmol/LHEPES、10U/ml青霉素、100ug/ml鏈霉素。(2)MTT(4,5-dimethythiazoyl-zyl2,5-diphenylterrajolium bromiole)用PBSA緩沖液配制成1mg/ml濃度工作液,4℃避光保存。(3)IL-2標準品。(4)PHA(200ug/ml)。(三) 方法(1)人外周血T細胞分泌IL-2的誘生:①人PBMC分離:采用常規淋巴細胞分層液濃度梯度......閱讀全文
(一)原理白細胞介素-2(IL-2)是由活化的輔助性T細胞分泌的一種細胞增殖因子,具有促T細胞增殖和維持T細胞體外長期生長的作用。CTLL-2為IL-2依賴細胞株可用作IL-2生物學活性定量檢測。本實驗采用MTT分析法,通過測定CTLL-2細胞的增殖量,確定IL-2生物學活性單位。檢測IL-2的生物
白細胞介素-2(IL-2)是由活化的輔助性T細胞分泌的一種細胞增殖因子,具有促T細胞增殖和維持T細胞體外長期生長的作用。CTLL-2為IL-2依賴細胞株可用作IL-2生物學活性定量檢測。本實驗采用MTT分析法,通過測定CTLL-2細胞的增殖量,確定IL-2生物學活性單位。檢測IL-2的生物學活性,可
實驗方法原理實驗材料 人外周血T細胞試劑、試劑盒 FCS-RPMI-1640培養液谷氨酰胺HEPES青霉素鏈霉素PBSA緩沖液儀器、耗材 離心機分光光度計搖床實驗步驟 一、人外周血T細胞分泌IL-2的誘生1. 人PBMC分離:采用常規淋巴細胞分層液濃度梯度離心法分離PBMC,用10%FC
實驗材料 IL-4誘生試劑、試劑盒 生理鹽水淋巴細胞分層液FCS-IMDM培養液PHA儀器、耗材 細胞培養板培養箱實驗步驟 一、IL-4生物學活性測定 CT.4S細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲
實驗材料 小鼠IL-4試劑、試劑盒 FCS-IMDM培養液rh IL-10標準品3H-TdR儀器、耗材 離心機培養箱實驗步驟 D36細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲線,計算待測樣品的IL-10的活性單位⑥
實驗方法原理 IL-1與小鼠胸腺細胞共同培養時,IL-1可刺激小鼠胸腺細胞增殖。進一步通過3H-TdR摻入法或染料攝入法判定小鼠胸腺細胞增殖量,推定IL-1的生物學活性。通過檢測IL-1的生物學活性,可了解單核-巨噬細胞等的功能。實驗材料 小鼠胸腺細胞試劑、試劑盒 FCS-RPMI-1640培養液L
(一)原理IL-8對中性粒細胞具有激活和趨化作用,通過檢測中性粒細胞的遷移距離可以確定IL-8的生物學活性,即對中性粒細胞的趨化活性。 (二)材料 (1)6%右旋糖酐生理鹽水溶液。 (2)淋巴細胞分層液比重為1.077+(-)0.001。 (3)2%瓊脂糖:稱取2g瓊脂糖,加入到10
實驗材料IL-4誘生試劑、試劑盒生理鹽水淋巴細胞分層液FCS-IMDM培養液PHA儀器、耗材細胞培養板培養箱實驗步驟一、IL-4生物學活性測定 CT.4S細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲線,計算
實驗材料小鼠IL-4試劑、試劑盒FCS-IMDM培養液rh IL-10標準品3H-TdR儀器、耗材離心機培養箱實驗步驟D36細胞懸液制備①↓接種細胞于96孔培養板②↓加待測樣品和標準品③↓加3H-TdR④↓收集細胞,測定3H-TdR摻入量⑤↓繪制標準曲線,計算待測樣品的IL-10的活性單位⑥展開&n
IL-8中對中性粒細胞具有激活和趨化作用,通過檢測中性粒細胞的遷移距離可以確定IL-8的生物學活性,即對中性粒細胞的趨化活性。實驗材料IL-8的誘生試劑、試劑盒右旋糖酐生理鹽水瓊脂糖淋巴細胞分層液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液儀器、耗材潔凈載玻片打孔器離心機培養箱實驗步驟一、IL-