1.實驗試劑 (1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS (2)3M NaAc (3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA (4)酚(pH8.0):氯仿:異戊醇(25:24:1) (5)氯仿:異戊醇(24:1) (6)異丙醇 (7)無水乙醇 (8)75%乙醇 (9)RNaseA 2.實驗步驟 (1)取真菌菌絲0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉 (2)加入4mL提取液,快速振蕩混勻 (3)加入等體積的4mL的氯仿:異戊醇(24:1),渦旋3~5min(此處是粗提沒有加酚,可以節約成本) (4)1000rpm,4℃,5min (5)上清用氯仿:異戊醇(24:1)再抽提一次(10,000rpm,4℃離心5min) (6)取上清,加入2/3倍體積的-20℃預冷異丙醇或2.5倍體積的無水......閱讀全文
1.實驗試劑 (1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS (2)3M NaAc (3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA (4)酚(pH8.0):氯仿:異戊醇(25:
一、真菌DNA的提取(方法一) 1.實驗試劑 (1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS (2)3M NaAc (3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA (4)酚(
搞真菌基因功能研究的不可避免的總要涉及到DNA和RNA提取,由于真菌中有較多的多糖成分影響到所提DNA和RNA的質量和后續的分析。因此一個高質量的、實惠的提取方法是我們的優先選擇,在此分享一下我一直在用的提取方法,供大家參考。真菌DNA的提取(方法一)1.取真菌菌絲0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉2
搞真菌基因功能研究的不可避免的總要涉及到DNA和RNA提取,由于真菌中有較多的多糖成分影響到所提DNA和RNA的質量和后續的分析。因此一個高質量的、實惠的提取方法是我們的優先選擇,在此分享一下我一直在用的提取方法,供大家參考。 真菌DNA的提取(方法一) 1.取真菌菌絲0.5g, 在液氮中迅速研磨
一、真菌DNA的提取(方法一) 1.實驗試劑 (1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS (2)3M NaAc (3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA (4)酚(p
一、真菌DNA的提取(方法一) 1.實驗試劑 (1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS (2)3M NaAc (3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA (4)酚(p
真菌DNA和RNA提取方法 一、真菌DNA的提取(方法一) 實驗試劑 (1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS (2)3M NaAc (3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1
液氮研磨法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 液氮研磨可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加
真菌RNA的提取可以:(1)用于真菌RNA干擾機制研究;(2)用于cDNA文庫構建等研究;(3)用于真菌分子生物學相應研究。 實驗方法原理 液氮研磨可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯仿時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進
實驗方法原理 液氮研磨可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯仿時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。 ? 實驗材料 菌絲體 試劑、試劑盒 NaC