1,基本原理 它以酶作為標記物,與抗體或抗原聯結,與相應的抗原或抗體作用后,通過底物的顯色反應作抗原抗體的定性和定量,亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究,即酶免疫組織化學技術。 應用最多的免疫酶技術是酶聯免疫吸附實驗(ELISA),它是使抗原或抗體吸附于固相載體,使隨后進行的抗原抗體反應均在載體表面進行,從而簡化了分離步驟,提高了靈敏度,即可檢測抗原,也可檢測抗體。 2,必要的試劑 (1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent); (2)酶標記的抗原或抗體,稱為"結合物"(conjugate); (3)酶反應的底物。根據試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。 3,ELISA的類型 (1)雙抗體夾心法 為了檢測抗原可用夾心法。將特異性抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯制成的小管、小盤或小孔)上,然后加被測溶液,倘......閱讀全文
20世紀中期,以放射免疫技術為代表的標記免疫技術相繼問世,它將某種可微量或超微量測定的物質(如放射性核素、熒光素、酶、化學發光劑等)標記于抗原(抗體)上制成標記物,加入到抗原抗體的反應體系中與相應的抗體(抗原)反應,以檢測標記物的有無及含量間接反映被測物的存在與多少。這些將標記技術與抗原抗體反應
目前,免疫學檢驗中的標記技術主要包括酶免疫技術、熒光免疫技術、放射免疫技術、金免疫技術、化學發光免疫技術等。其中酶免疫技術是以酶標記的抗體(抗原)作為主要試劑,將抗原抗體反應的特異性和酶催化底物反應的高效性和專一性結合起來的一種免疫檢測技術。作為經典的三大標記技術之一,酶免疫技術在檢驗醫學中得到廣
郝繁運 綜述 中國誤診學雜志 2007年 第一期 第五次全國中青年檢驗醫學學術會議論文匯編 摘要:本文主要介紹了酶免疫分析的發展現狀,從酶免疫分析標記技術若干環節的技術進步、在方法學上與現代化技術的融合與發展、酶免疫分析技
免疫酶細胞化學免疫酶細胞化學是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗體特異反應存在的前提條件下,借助于酶細胞化學的手段,檢測某種物質(抗原/抗體)在組織細胞內存在部位的一門新技術:即預先將抗體與酶連結,再使其與組織內特異抗原反應,經細胞化學染色
基本原理 1971年Engvall和Perlma發表了酶聯免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent aay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的測定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原或抗體結
基本原理 1971年Engvall和Perlmann發表了酶聯免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的測定方法。這
基本原理 1971年Engvall和Perlmann發表了酶聯免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的
基本原理 1971年Engvall和Perlmann發表了酶聯免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的測定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原或抗
在20世紀90年代中期以前,我國血液ELISA檢驗主要靠手工操作。從20世紀90年代中期開始,逐步開始自動化。目前,不少采供血機構已實現血液ELISA檢驗的自動化。1 正確認識檢驗自動化與檢驗質量的關系人們通常認為,只要購置了自動化儀器,血液ELISA檢驗的質量自然就會得到保證。而實際上,擁有自動化
基本原理 1971年Engvall和Perlmann發表了酶聯免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的測定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原或抗
1. ELISA的原理ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原 或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用 洗滌的方法使固相載體上形成
一、ELISA的原理ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合
1. ELISA的原理ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復
ELISA原理與分類1. ELISA的原理ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載
ELISA的原理ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與
國產實驗室儀器近年來發展迅猛,在技術上已經較以往有了大幅度的提升,在價格上更是有較大的優勢,因此當前國產實驗室儀器的應用前景非常廣闊,而隨著實驗室儀器種類和數量的不斷增多,酶標分析儀這種儀器在實驗室中也常能看到它的身影,為了讓大家對其有更深的了解,這里就酶標分析儀的功能、
什么是酶標板,它是一種配合在酶標儀上,用來做酶聯免疫實驗的器材。雖然它看上去只是一塊普通的有孔的塑料板,但是在酶免疫測定中卻是一個不可缺少的部分。 酶聯免疫吸附實驗,簡稱ELISA,是酶免疫測定技術中應用最廣的技術。其基本方法是將已知的抗原或者抗體吸附在固相載體表面,并保持其免疫活性。然后
3 競爭抑制ELISA方法的建立3.1 抗體的酶標記及質量鑒定本試驗采用改良過碘酸鈉法將辣根過氧化物酶標記在抗體上[1],標記完后取上清用Sephedex G200 凝膠層析進行純化,洗脫液為0.2mol/L pH7.4的PBS,流速為15ml/h,分步收集,每支3ml,以紫外分光光度計測A280吸
1. ELISA的原理 ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。該法適于測定細胞培養上清、血清、血漿及組織液中的樣本,干擾小可以測到每毫升納克水平的細胞因子(或受體)的水平。在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標記的抗原或抗體,③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。該法適于測定細胞培養上清、血清、血漿及組織液中的樣本,干擾小可以測到每毫升納克水平的細胞因子(或受體)的水平。在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標記的抗原或抗體,③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出
(一)雙抗體夾心法雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下:(1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結合的抗體及雜質。(2)加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。(3)加酶標抗體:使固
引言 1971年瑞典的Engvall等人分別以纖維素和聚苯乙烯試管作為固相載體吸附抗原/抗體,建立了酶聯免疫吸附測(Enzyme Linked Immunosrbent Assay,簡稱ELISA),后來人們改用板式反應孔進行ELISA,大大地提高了實驗通量。ELISA實驗具有極高的靈活性
第一節 免疫細胞化學技術在腎臟疾病中的應用范圍在腎臟疾病時,免疫細胞化學技術主要應用于腎臟穿刺組織的檢查,也可應用于血清或腎臟洗脫液及尿液的特殊檢查,茲分述如下:一、腎臟組織的檢查腎穿刺組織一般應切割為三小塊,分別作冰凍切片、石蠟切片及超薄切片,進行熒光顯微鏡、光學顯微鏡及透射電鏡觀察。所應用的免疫
摘 要:酶聯免疫法(ELISA)是以酶標記抗體或抗原為主要試劑的一種標記免疫分析技術,其結合了抗原抗體反應的高度特異性和酶的高效催化作用,具有靈敏度高、特異性強、準確性好、檢測成本低、迅速等優點,該方法近年來被廣泛應用于食品安全中農藥殘留的檢測。 古語有云:“民以食為天”,隨著人們
一、前言ELISA在生物藥物研發的各個環節均有廣泛的應用:如以生物大分子檢測為目的,在藥效藥代評估時,對動物實驗和臨床實驗中的血液樣品的藥物濃度和生物大分子標志物進行定量檢測;以親和力測定為目的,在質量分析過程中,對抗體相對于靶點抗原的親和力檢測;以親和力篩選為目的,在抗體發現過程中,對雜交瘤細胞克
一、對照實驗 1.吸收實驗 應用尚無文獻報告的抗血清/自己制備的抗血清進行ICC染色時,需用相應的抗原吸收抗血清后,再孵育標本,判斷結果的可信性(結果應為陰性)。常用的吸收實驗分固相吸收和液相吸收兩種(見本書第一章 ),對于不能形成沉淀,難以用離心沉降法分離的一些小分子多肽類抗原,以固相吸收為佳
ELISA原理 ELISA利用抗原抗體之間專一性結合之特性,對標本進行檢測;由于結合與固體承載物(一般為塑膠孔盤)上之抗原或抗體仍可具有免疫活性,因此設計 其結合 機制後,配合酵素顯色反應,即可顯示特定抗原或抗體是否存在,并可利用顯色之深淺進行定量分析。根據待測樣品與結合機制的不同,ELI
1.1 抗體的酶標記及質量鑒定本試驗采用改良過碘酸鈉法將辣根過氧化物酶標記在抗體上[1],標記完后取上清用Sephedex G200 凝膠層析進行純化,洗脫液為0.2mol/L pH7.4的PBS,流速為15ml/h,分步收集,每支3ml,以紫外分光光度計測A280吸光度值,以洗脫檢驗地帶網體積為橫
ELISA在生物藥物研發的各個環節均有廣泛的應用:如以生物大分子檢測為目的,在藥效藥代評估時,對動物實驗和臨床實驗中的血液樣品的藥物濃度和生物大分子標志物進行定量檢測;以親和力測定為目的,在質量分析過程中,對抗體相對于靶點抗原的親和力檢測; 以親和力篩選為目的,在抗體發現過程中,對雜交瘤細