RNAi
1995年,康乃爾大學的Su Guo博士在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲(C. elegans)中的par-1基因時,發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷上述基因的表達,而同時在對照實驗中給線蟲注射正義RNA(sense RNA)以期觀察到基因表達的增強。但得到的結果是二者都同樣地切斷了par-1基因的表達途徑。這是與傳統上對反義RNA技術的解釋正好相反的。該研究小組一直沒能給這個意外以合理解釋。直到1998年2月,華盛頓卡耐基研究院的Andrew Fire和馬薩諸塞大學醫學院的Craig Mello才首次揭開這個懸疑之謎。通過 大量艱苦的工作,他們證實,Su Guo博士遇到的正義RNA抑制基因表達的現象,以及過去的反義RNA技術對基因表達的阻斷,都是由于體外轉錄所得RNA中污染了微量雙鏈RNA而引起。當他們將體外轉錄得到的單鏈RNA純化后注射線蟲時發現,基因抑制效應變得十分微弱,而經過純化的雙鏈RNA卻正好......閱讀全文
RNAi
1995年,康乃爾大學的Su Guo博士在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲(C. elegans)中的par-1基因時,發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷上述基因的表達,而同時在對照實驗中給線蟲注射正義RNA(sense RNA)以期觀察到基因表達的增強。但得到的結果是二者都同樣
RNAi protocol
?siRNA protocolsOur current strategy with siRNA is to synthesis relatively small amounts enzymatically and use these to test for efficiency by western
RNAi技術
?DNA芯片檢測siRNA專一性? 長片斷的雙鏈RNA ?(dsRNA)?導入例如植物,真菌,果蠅,線蟲等生物的細胞中會引發同源mRNA的降解——這就是所謂的RNA interference ?(RNAi)。RNAi分兩個步驟,首先是長片斷雙鏈dsRNAs被核酶Dicer切割成21—25個堿基的sm
RNAi總結
RNA干涉(RNAi)是指雙鏈RNA分子使基因表達沉寂的現象,是在線蟲中發現的,在 1998年的一篇Nature論文中被公諸于眾。過去幾年中,科研工作者已明確轉錄后基因沉默現象普遍存在于動、植物中,在機體防御病毒入侵和轉座子沉默效應中起著重要作用。近年來的研究表明,將與mRNA對應的正義RNA和反義
RNAi相關術語
1.RNAi?:(RNA interference)RNA干擾一些小的雙鏈RNA可以高效、特異的阻斷體內特定基因表達,促使mRNA降解,誘使細胞表現出特定基因缺失的表型,稱為RNA干擾(RNA interference,RNAi?,也譯作RNA干預或者干涉)。它也是體內抵御外在感染的一種重要保護機制
RNAi的特征
①RNAi是轉錄后水平的基因沉默機制;②RNAi具有很高的特異性,只降解與之序列相應的單個內源基因的mRNA;③RNAi抑制基因表達具有很高的效率,表型可以達到缺失突變體表型的程度,而且相對很少量的dsRNA分子(數量遠遠少于內源mRNA的數量)就能完全抑制相應基因的表達,是以催化放大的方式進行的;
RNAi的功能
1.高通量的研究基因功能在后基因組時代,需要大規模高通量的研究基因的功能,由于RNAi能高效特異的阻斷基因的表達,因而RNAi成為研究基因功能的很好的工具。研究者將線蟲三號染色體上2232個基因對應的dsRNA合成出來,并注射到線蟲性腺內,然后觀察子代細胞分裂時出現的異常表型,結果發現了133個基因
RNAi 實驗介紹
1. RNAi 介紹RNA 干擾(RNAi:RNA interference)是由諾貝爾生理學/醫學獎得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello(1)在線蟲實驗中發現的,2001 年 Elbashir 等人發現哺乳類的 siRNA 可以進行 RNAi 誘導。這個方法與常規方
RNAi 實驗介紹
1. RNAi 介紹 RNA 干擾(RNAi:RNA interference)是由諾貝爾生理學/醫學獎得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello(1)在線蟲實驗中發現的,2001 年 Elbashir 等人發現哺乳類的 siRNA 可以進行 RNAi 誘導
RNAi的生物特性
RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關;② 在果蠅中,參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失,同時提高了反轉錄轉座子活性。RNAi抵御病毒感染在擬南