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    RNA原位雜交實驗

    原位雜交(msituhybridization,ISH),也稱作雜交組織化學或細胞學的雜交,是一種能夠從形態學上證明特異性的 DNA 或 RNA 序列存在于制備的個別細胞、組織部分、單細胞或染色體中的技術。原位雜交是研究異質細胞群中 DNA 和 RNA 序列的細胞定位的唯一方法。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法原理原位雜交的原理是含有互補序列(探針)的被標記的單鏈 DNA 或 RNA 片段在適當 的條件下與細胞的 DNA 或 RNA 雜交形成穩定的雜交體。無論是 DNA( dsDNA、寡核苷酸和 ssDNA ) 或是 RNA( SSC RNA) 探針均能用于定位 DNA 和 mRNA,并且均能用于兩 個主要類型的標記策略:直接標記,即用報道分子(如同位素)附著于 DNA 或 RNA;間接標記,在該法中將半抗原(如生物素或地高辛)附著于探針上,然后用標記的結合蛋白 (如親合素)檢測或者用特異性的抗體檢測靶探......閱讀全文

    RNA原位雜交實驗

    原位雜交(msituhybridization,ISH),也稱作雜交組織化學或細胞學的雜交,是一種能夠從形態學上證明特異性的 DNA 或 RNA 序列存在于制備的個別細胞、組織部分、單細胞或染色體中的技術。原位雜交是研究異質細胞群中 DNA 和 RNA 序列的細胞定位的唯一方法。本實驗來源「RNA

    RNA原位雜交實驗

    實驗方法原理 原位雜交的原理是含有互補序列(探針)的被標記的單鏈 DNA 或 RNA 片段在適當 的條件下與細胞的 DNA 或 RNA 雜交形成穩定的雜交體。無論是 DNA( dsDNA、寡核苷酸和 ssDNA ) 或是 RNA( SSC RNA) 探針均能用于定位 DNA 和 mRNA,并

    RNA原位雜交實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原位雜交的原理是含有互補序列(探針)的被標記的單鏈 DNA 或 RNA 片段在適當 的條件下與細胞的 DNA 或 RNA 雜交形成穩定的雜交體。無論是 DNA( dsDNA、寡核苷酸和 ssDNA ) 或是 RNA( SSC

    RNA熒光原位雜交

    原位雜交:在研究DNA分子復制原理的基礎上發展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,能過氫鍵結合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點,應帶有標記的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、地高辛等非放射性物質)DAN或 RNA

    原位雜交儀—原位雜交實驗(三)

      原位雜交第三天  1) 用1ml含10%熱滅活血清的MABT溶液置換抗體溶液,放置搖床上25分鐘,然后用1mlMABT置換,25分鐘,再用1mlMABT溶液置換,一小時以上,最后用1mlMABT溶液置換,25分鐘。  2) 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置

    原位雜交儀—原位雜交實驗(二)

      原位雜交第二天  1.  1)將探針回收,放于-20C保存(通常探針可重復使用十次左右)。  2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分鐘,重復一次。  3)置換2XSSCT1ml,60℃,放置15分鐘。  4)置換0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分鐘,重復一次。 

    熒光原位雜交實驗——熒光原位雜交技術

    熒光原位雜交可應用于:(1)動植物基因組結構研究;(2)染色體精細結構變異分析;(3)病毒感染分析;(4)腫瘤遺傳學和基因組進化研究。實驗方法原理用已知的標記單鏈核酸為探針,按照堿基互補的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱

    FISH-熒光原位雜交實驗(原位雜交)

    1. 實驗目的??????? 通過實驗了解熒光原位雜交技術的基本原理和在生物學、醫學領域的應用。掌握原位雜交技術的操作方法,熟練掌握熒光顯微鏡的使用方法。2. 實驗原理??????? 熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺

    原位雜交實驗步驟

    原位雜交實驗步驟?一質粒制備1質粒的轉化和擴增1.1制備XL1-Blue感受態細菌1.?取400uL XL1-Blue菌種加入到含200ml LB培養基的錐形瓶中,37?℃、100rpm培養4h,離心,倒置,以冰冷的0.1 mol/L CaCl_2重懸細菌,冰浴30 min,離心,棄上清,倒置,再加

    熒光原位雜交實驗

    實驗方法原理 熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變

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